| 摘要 | 第8-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-36页 |
| 第一章 毛色的形成及其调控 | 第10-20页 |
| 1 黑素体及黑色素的合成 | 第10-13页 |
| 2 黑色素细胞的发生与黑色素的转运 | 第13页 |
| 3 黑色素生成的调控 | 第13-20页 |
| 3.1 黑色素生成涉及的信号通路 | 第13-16页 |
| 3.2 影响黑色素生成的主要基因 | 第16-20页 |
| 第二章 microRNA与毛色形成 | 第20-26页 |
| 1 miRNA的发现与生物合成 | 第20-21页 |
| 2 miRNAs的作用机制 | 第21-22页 |
| 3 miRNAs的功能 | 第22-24页 |
| 3.1 miRNAs的组织特异性 | 第22页 |
| 3.2 miRNAs与胚胎发育 | 第22-23页 |
| 3.3 miRNAs与肿瘤发生 | 第23页 |
| 3.4 miRNAs与毛色形成 | 第23-24页 |
| 4 miR-186的研究进展 | 第24-26页 |
| 第三章 研究目的、意义与内容 | 第26-27页 |
| 参考文献 | 第27-36页 |
| 第二部分 试验部分 | 第36-90页 |
| 第一章 miR-186与MITF的生物信息学分析及二者在不同毛色皮肤中的表达 | 第36-58页 |
| 1 材料 | 第36-37页 |
| 1.1 实验材料 | 第36-37页 |
| 1.2 实验仪器及耗材 | 第37页 |
| 2 实验方法 | 第37-48页 |
| 2.1 miR-186的生物信息学预测及靶基因筛查 | 第37页 |
| 2.2 绵羊不同毛色皮肤中内源性miR-186和MITF mRNA检测 | 第37-41页 |
| 2.3 MITF双荧光报告载体的构建和miR-186-5p真核表达载体构建及质粒提取 | 第41-48页 |
| 3 结果 | 第48-54页 |
| 3.1 miR-186-5p的靶基因预测 | 第48-49页 |
| 3.2 绵羊皮肤总RNA纯度及完整性的鉴定 | 第49-50页 |
| 3.3 miR-186-5p及其靶基因MITF的内源性表达 | 第50-51页 |
| 3.4 MITF 3'UTR表达载体的构建 | 第51-52页 |
| 3.5 HEK293T细胞转染效率检测 | 第52-53页 |
| 3.6 双荧光报告荧光检测结果 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-58页 |
| 第二章 miR-186-5p对绵羊黑色素细胞黑色素生成的影响 | 第58-77页 |
| 1 材料和方法 | 第59-66页 |
| 1.1 实验材料 | 第59-60页 |
| 1.2 实验方法 | 第60-66页 |
| 2 实验结果 | 第66-73页 |
| 2.1 绵羊黑色素细胞转染效率检测 | 第66页 |
| 2.2 转染后绵羊黑色素细胞总RNA纯度及完整性的鉴定 | 第66-67页 |
| 2.3 转染后绵羊黑色素细胞提取总蛋白质量鉴定 | 第67页 |
| 2.4 各个转染组绵羊黑色素细胞黑色素含量测定 | 第67-68页 |
| 2.5 RT-PCR检测miR-186-5p、MITF、TYR、TYRP1和TYRP2在mRNA水平的表达量 | 第68-70页 |
| 2.6 转染后各转染组细胞中MITF、TYR、TYRP1和TYRP2蛋白的表达水平 | 第70页 |
| 2.7 转染后细胞增殖迁移情况 | 第70-71页 |
| 2.8 免疫组化鉴定各转染组细胞中MITF蛋白的表达 | 第71-72页 |
| 2.9 原位杂交鉴定miR-186-5p在黑色素细胞中的分布 | 第72-73页 |
| 3 讨论 | 第73-74页 |
| 4 结论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-77页 |
| 第三章 mir-186与α-MSH共同作用对黑色素细胞的影响 | 第77-90页 |
| 1 材料与方法 | 第78-79页 |
| 1.1 实验材料 | 第78页 |
| 1.2 实验试剂、耗材及仪器 | 第78页 |
| 1.3 实验方法 | 第78-79页 |
| 2 实验结果 | 第79-85页 |
| 2.1 各个实验组绵羊黑色素细胞总RNA纯度及完整性的鉴定 | 第79-80页 |
| 2.2 各个实验组绵羊黑色素细胞总蛋白质量鉴定 | 第80页 |
| 2.3 各个实验组绵羊黑色素细胞黑色素含量测定 | 第80-81页 |
| 2.4 RT-PCR检测MITF、TYR、TYRP1和TYRP2的表达水平 | 第81-82页 |
| 2.5 各实验组细胞中MITF、TYR、TYRP1和TYRP2蛋白的表达水平 | 第82-83页 |
| 2.6 转染添加对黑色素细胞增殖迁移的影响 | 第83-84页 |
| 2.7 免疫组化鉴定各实验组细胞中MITF蛋白的表达 | 第84-85页 |
| 3 讨论 | 第85-87页 |
| 4 结论 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-90页 |
| 全文总结 | 第90-91页 |
| 创新 | 第91-92页 |
| Abstract | 第92-94页 |
| 中英文对照及缩写表 | 第96-98页 |
| 致谢 | 第98页 |
