中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
英文缩写词表 | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-30页 |
1.1 植物磷营养概述 | 第11页 |
1.2 植物对低磷胁迫的响应 | 第11-13页 |
1.2.1 植物形态变化 | 第12页 |
1.2.2 植物生理生化方面变化 | 第12-13页 |
1.3 植物磷营养分子生物学研究 | 第13-23页 |
1.3.1 磷转运体的研究 | 第13-16页 |
1.3.2 磷转运相关突变体的研究 | 第16-17页 |
1.3.3 植物磷营养转录水平调控机制 | 第17-22页 |
1.3.4 植物磷营养转录后水平调控机制 | 第22-23页 |
1.4 WRKY转录因子 | 第23-28页 |
1.4.1 WRKY蛋白结构特征 | 第23-24页 |
1.4.2 W-box元件 | 第24页 |
1.4.3 WRKY转录因子的功能 | 第24-28页 |
1.5 本研究工作的意义 | 第28-30页 |
第二章 实验材料与方法 | 第30-58页 |
2.1 实验材料 | 第30-32页 |
2.1.1 植物材料 | 第30页 |
2.1.2 实验中所用的相关引物 | 第30-32页 |
2.1.3 实验中所用的菌株、载体及试剂 | 第32页 |
2.2 实验仪器 | 第32-33页 |
2.3 实验方法 | 第33-58页 |
2.3.1 拟南芥培养方法 | 第33-34页 |
2.3.2 无机磷含量测定 | 第34-35页 |
2.3.3 磷吸收实验 | 第35-36页 |
2.3.4 花青素含量测定 | 第36页 |
2.3.5 植物总DNA提取 | 第36-37页 |
2.3.6 植物基因表达检测 | 第37-40页 |
2.3.7 载体构建 | 第40-44页 |
2.3.8 转基因植物材料及杂交材料的获得 | 第44-45页 |
2.3.9 基因定点突变 | 第45-46页 |
2.3.10 GUS染色分析 | 第46-47页 |
2.3.11 烟草瞬时转化 | 第47页 |
2.3.12 蛋白表达纯化、电泳以及Western Blot | 第47-50页 |
2.3.13 凝胶阻滞实验(EMSA) | 第50-52页 |
2.3.14 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第52-55页 |
2.3.15 无细胞体系降解实验 | 第55页 |
2.3.16 体外磷酸化 | 第55-56页 |
2.3.17 酵母双杂交实验 | 第56-58页 |
第三章 实验结果与分析 | 第58-83页 |
3.1 WRKY42定位于细胞核 | 第58-59页 |
3.2 WRKY42能够结合W-box元件 | 第59-60页 |
3.3 WRKY42基因表达模式 | 第60-62页 |
3.4 低磷条件下WRKY42基因表达量降低 | 第62-63页 |
3.5 WRKY42负向调控PHO1的表达 | 第63-70页 |
3.5.1 WRKY42相关材料鉴定 | 第63-64页 |
3.5.2 WRKY42过量表达株系表现出低磷敏感表型 | 第64-66页 |
3.5.3 WRKY42过量表达株系冠部磷含量降低 | 第66-67页 |
3.5.4 WRKY42过量表达株系中PHO1表达量降低 | 第67页 |
3.5.5 WRKY42直接结合PHO1启动子 | 第67-69页 |
3.5.6 WRKY42与WRKY6在负调控PHO1方面存在功能冗余 | 第69-70页 |
3.6 WRKY42正向调控PHT1;1的表达 | 第70-80页 |
3.6.1 WRKY42过量表达株系根部无机磷含量升高 | 第70-71页 |
3.6.2 WRKY42过量表达株系磷吸收能力增加 | 第71-72页 |
3.6.3 WRKY42过量表达株系对砷酸盐胁迫敏感 | 第72-73页 |
3.6.4 WRKY42促进PHT1;1的表达 | 第73-75页 |
3.6.5 WRKY42体内直接结合PHT1;1启动子 | 第75-76页 |
3.6.6 WRKY42体外结合PHT1;1启动子 | 第76-77页 |
3.6.7 WRKY42主要通过调控PHT1;1的表达促进植物磷吸收 | 第77-80页 |
3.7 低磷条件下WRKY42蛋白降解 | 第80-83页 |
3.7.1 半体内降解实验检测低磷条件下WRKY42蛋白水平 | 第80-81页 |
3.7.2 植株体内WRKY42蛋白水平检测 | 第81-83页 |
第四章 讨论与展望 | 第83-87页 |
4.1 WRKY42是植物维持磷稳态的重要调节因子 | 第83-85页 |
4.2 WRKY42和WRKY6对PHO1的调控存在功能冗余 | 第85页 |
4.3 WRKY42和WRKY6对PHT1;1的调控机制不同 | 第85-86页 |
4.4 WRKY42的表达受到外界磷浓度的调控 | 第86-87页 |
第五章 结论 | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-104页 |
致谢 | 第104-105页 |
附录 (AtPPCK2蛋白激酶参与磷营养过程的分子机制研究) | 第105-118页 |
引言 | 第105-107页 |
实验结果与分析 | 第107-117页 |
1. 低磷条件下PPCK2基因表达检测 | 第107-108页 |
2. PPCK2相关材料检测 | 第108-109页 |
3. PPCK2过量表达材料低磷表型观察 | 第109页 |
4. PPCK2过量表达材料砷酸盐胁迫表型观察 | 第109-110页 |
5. PPCK2相关材料磷吸收实验 | 第110-111页 |
6. PPCK2过量表达材料中PHT1;1和PHT1;4表达水平检测 | 第111-112页 |
7. PPCK2亚细胞定位观察 | 第112-113页 |
8. PPCK2激酶活性检测 | 第113-114页 |
9. 酵母双杂交筛选与PPCK2互作的转录因子 | 第114-115页 |
10. PPCK2体外磷酸化WRKY28 | 第115-117页 |
讨论 | 第117-118页 |
个人简历 | 第118页 |