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拟南芥转录因子AtWRKY42调控磷吸收和转运的分子机制

中文摘要第4-5页
Abstract第5页
英文缩写词表第9-11页
第一章 文献综述第11-30页
    1.1 植物磷营养概述第11页
    1.2 植物对低磷胁迫的响应第11-13页
        1.2.1 植物形态变化第12页
        1.2.2 植物生理生化方面变化第12-13页
    1.3 植物磷营养分子生物学研究第13-23页
        1.3.1 磷转运体的研究第13-16页
        1.3.2 磷转运相关突变体的研究第16-17页
        1.3.3 植物磷营养转录水平调控机制第17-22页
        1.3.4 植物磷营养转录后水平调控机制第22-23页
    1.4 WRKY转录因子第23-28页
        1.4.1 WRKY蛋白结构特征第23-24页
        1.4.2 W-box元件第24页
        1.4.3 WRKY转录因子的功能第24-28页
    1.5 本研究工作的意义第28-30页
第二章 实验材料与方法第30-58页
    2.1 实验材料第30-32页
        2.1.1 植物材料第30页
        2.1.2 实验中所用的相关引物第30-32页
        2.1.3 实验中所用的菌株、载体及试剂第32页
    2.2 实验仪器第32-33页
    2.3 实验方法第33-58页
        2.3.1 拟南芥培养方法第33-34页
        2.3.2 无机磷含量测定第34-35页
        2.3.3 磷吸收实验第35-36页
        2.3.4 花青素含量测定第36页
        2.3.5 植物总DNA提取第36-37页
        2.3.6 植物基因表达检测第37-40页
        2.3.7 载体构建第40-44页
        2.3.8 转基因植物材料及杂交材料的获得第44-45页
        2.3.9 基因定点突变第45-46页
        2.3.10 GUS染色分析第46-47页
        2.3.11 烟草瞬时转化第47页
        2.3.12 蛋白表达纯化、电泳以及Western Blot第47-50页
        2.3.13 凝胶阻滞实验(EMSA)第50-52页
        2.3.14 染色质免疫共沉淀(ChIP)第52-55页
        2.3.15 无细胞体系降解实验第55页
        2.3.16 体外磷酸化第55-56页
        2.3.17 酵母双杂交实验第56-58页
第三章 实验结果与分析第58-83页
    3.1 WRKY42定位于细胞核第58-59页
    3.2 WRKY42能够结合W-box元件第59-60页
    3.3 WRKY42基因表达模式第60-62页
    3.4 低磷条件下WRKY42基因表达量降低第62-63页
    3.5 WRKY42负向调控PHO1的表达第63-70页
        3.5.1 WRKY42相关材料鉴定第63-64页
        3.5.2 WRKY42过量表达株系表现出低磷敏感表型第64-66页
        3.5.3 WRKY42过量表达株系冠部磷含量降低第66-67页
        3.5.4 WRKY42过量表达株系中PHO1表达量降低第67页
        3.5.5 WRKY42直接结合PHO1启动子第67-69页
        3.5.6 WRKY42与WRKY6在负调控PHO1方面存在功能冗余第69-70页
    3.6 WRKY42正向调控PHT1;1的表达第70-80页
        3.6.1 WRKY42过量表达株系根部无机磷含量升高第70-71页
        3.6.2 WRKY42过量表达株系磷吸收能力增加第71-72页
        3.6.3 WRKY42过量表达株系对砷酸盐胁迫敏感第72-73页
        3.6.4 WRKY42促进PHT1;1的表达第73-75页
        3.6.5 WRKY42体内直接结合PHT1;1启动子第75-76页
        3.6.6 WRKY42体外结合PHT1;1启动子第76-77页
        3.6.7 WRKY42主要通过调控PHT1;1的表达促进植物磷吸收第77-80页
    3.7 低磷条件下WRKY42蛋白降解第80-83页
        3.7.1 半体内降解实验检测低磷条件下WRKY42蛋白水平第80-81页
        3.7.2 植株体内WRKY42蛋白水平检测第81-83页
第四章 讨论与展望第83-87页
    4.1 WRKY42是植物维持磷稳态的重要调节因子第83-85页
    4.2 WRKY42和WRKY6对PHO1的调控存在功能冗余第85页
    4.3 WRKY42和WRKY6对PHT1;1的调控机制不同第85-86页
    4.4 WRKY42的表达受到外界磷浓度的调控第86-87页
第五章 结论第87-88页
参考文献第88-104页
致谢第104-105页
附录 (AtPPCK2蛋白激酶参与磷营养过程的分子机制研究)第105-118页
    引言第105-107页
    实验结果与分析第107-117页
        1. 低磷条件下PPCK2基因表达检测第107-108页
        2. PPCK2相关材料检测第108-109页
        3. PPCK2过量表达材料低磷表型观察第109页
        4. PPCK2过量表达材料砷酸盐胁迫表型观察第109-110页
        5. PPCK2相关材料磷吸收实验第110-111页
        6. PPCK2过量表达材料中PHT1;1和PHT1;4表达水平检测第111-112页
        7. PPCK2亚细胞定位观察第112-113页
        8. PPCK2激酶活性检测第113-114页
        9. 酵母双杂交筛选与PPCK2互作的转录因子第114-115页
        10. PPCK2体外磷酸化WRKY28第115-117页
    讨论第117-118页
个人简历第118页

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