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人hAPRIL-Fc、hBAFF-Fc融合蛋白的原核高效表达、纯化及功能鉴定

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
引言第6-11页
第一部分 文献综述第11-26页
    第一章 增值诱导配体(APRIL)的研究进展第12-17页
        1.1 APRIL及其受体的结构特点第12-13页
            1.1.1 APRIL的结构第12-13页
            1.1.2 APRIL的受体及其结构特征第13页
        1.2 APRIL介导的信号转导途径第13-14页
        1.3 APRIL的生物学功能第14-16页
            1.3.1 对肿瘤细胞的增值作用第14-15页
            1.3.2 对免疫系统的调节作用第15页
            1.3.3 其它功能第15-16页
        1.4 APRIL与自身免疫性疾病第16页
        1.5 展望第16-17页
    第二章 B淋巴细胞刺激因子(BAFF)的研究进展第17-22页
        2.1 BAFF的表达及其分子结构特点第17页
        2.2 BAFF的受体第17-18页
        2.3 BAFF介导的信号通路第18-19页
        2.4 BAFF的生物学功能第19-20页
            2.4.1 对B淋巴细胞的共刺激作用第19页
            2.4.2 对肿瘤细胞生长的抑制作用第19-20页
            2.4.3 对T细胞的影响第20页
        2.5 BAFF在疾病中的作用第20-21页
            2.5.1 类风湿性关节炎(RA)第20页
            2.5.2 干燥综合征(SS)第20页
            2.5.3 慢性B淋巴细胞白血病第20-21页
        2.6 结论与展望第21-22页
    第三章 融合基因的研究进展第22-24页
        3.1 利用融合基因增强目的基因的表达第22页
        3.2 利用融合蛋白对目的基因进行示踪第22页
        3.3 利用融合蛋白改变目的蛋白的免疫原性第22-23页
        3.4 利用融合蛋白增强目的蛋白的功能第23-24页
    第四章 溶菌酶的研究进展第24-26页
        4.1 溶菌酶的分类第24页
        4.2 溶菌酶的结构第24页
        4.3 溶菌酶的生物学功能第24-25页
            4.3.1 溶菌酶在身体防御机制方面的作用第24-25页
            4.3.2 溶菌酶与其它物质之间的联系第25页
            4.3.3 溶菌酶的其它作用第25页
        4.4 国内外溶菌酶生产现状及问题第25-26页
第二部分 实验部分第26-57页
    第五章 hAPRIL-Fc和hBAFF-Fc的构建、表达及生物功能鉴定第27-45页
        5.1 实验材料第27-28页
            5.1.1 实验动物、质粒和菌株第27页
            5.1.2 试剂和耗材第27页
            5.1.3 主要实验仪器第27-28页
        5.2 实验方法第28-38页
            5.2.1 hAPRIL-Fc、hBAFF-Fc原核表达载体的构建第28-35页
            5.2.2 hAPRIL-Fc、hBAFF-Fc蛋白在原核中的表达、纯化及活性鉴定第35-38页
        5.3 实验方法结果与分析第38-43页
            5.3.1 hAPRIL-Fc、hBAFF-Fc基因的合成第38页
            5.3.2 hAPRIL-Fc、hBAFF-Fc表达载体的构建第38-39页
            5.3.3 hAPRIL-Fc、hBAFF-Fc蛋白的表达、纯化第39-40页
            5.3.4 MTT分别检测hAPRIL-Fc、hBAFF-Fc对小鼠B淋巴细胞的作用第40-41页
            5.3.5 激光共聚焦检测hAPRIL-Fc、hBAFF-Fc蛋白对小鼠B淋巴细胞的结合第41-42页
            5.3.6 流式细胞法检测hAPRIL-Fc、hBAFF-Fc蛋白对小鼠B淋巴细胞的结合第42-43页
        5.4 讨论第43-45页
    第六章 非洲爪蟾溶菌酶的克隆表达及生物学性质的鉴定第45-57页
        6.1 实验材料第45页
            6.1.1 实验动物、质粒和宿主菌第45页
            6.1.2 试剂和耗材第45页
            6.1.3 实验仪器第45页
        6.2 实验方法第45-51页
            6.2.1 从非洲爪蟾组织样品中提取总RNA第45-46页
            6.2.2 逆转录获得cDNA第46页
            6.2.3 RT-PCR获得非洲爪蟾溶菌酶的保守片段第46-51页
        6.3 实验结果第51-55页
            6.3.1 非洲爪蟾LYZ(xlLYZ)基因序列及内含子分析第51-52页
            6.3.2 非洲爪蟾LYZ(xlLYZ)蛋白空间结构比对第52页
            6.3.3 不同物种LYZ氨基酸序列比对第52-53页
            6.3.4 进化树分析第53-54页
            6.3.5 非洲爪蟾LYZ蛋白的表达与纯化第54页
            6.3.6 非洲爪蟾LYZ蛋白的最适PH和温度第54-55页
            6.3.7 非洲爪蟾LYZ蛋白的活性测试第55页
        6.4 讨论第55-57页
全文总结第57-58页
参考文献第58-63页
附录: 硕士在读期间研究成果第63-64页
致谢第64页

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