| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-25页 |
| ·概述 | 第11-12页 |
| ·国内外研究进展 | 第12-21页 |
| ·猪α-干扰素国内外研究进展 | 第12-13页 |
| ·毕赤酵母生产表达外源蛋白的发酵过程 | 第13页 |
| ·毕赤酵母发酵培养基和环境因子的优化 | 第13-14页 |
| ·毕赤酵母甲醇生长动力学模型 | 第14-15页 |
| ·毕赤酵母高密度补料培养控制策略 | 第15-18页 |
| ·人工神经网络模型在发酵过程中的应用 | 第18-20页 |
| ·发酵过程的多变量聚类分析和故障诊断/早期预警系统 | 第20-21页 |
| ·本论文主要研究内容 | 第21-25页 |
| ·毕赤酵母生产表达猪α-干扰素过程中存在的科学问题 | 第21-22页 |
| ·毕赤酵母生产表达猪α-干扰素过程中存在的实际问题 | 第22页 |
| ·本论文主要研究内容 | 第22-25页 |
| 第二章 基于人工神经网络模式识别的毕赤酵母高密度流加培养控制策略 | 第25-37页 |
| ·前言 | 第25-26页 |
| ·材料与方法 | 第26-31页 |
| ·主要仪器与设备 | 第26页 |
| ·实验菌株 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·分析方法 | 第27页 |
| ·流加控制方法 | 第27页 |
| ·基于人工神经网络模式识别的流加控制策略 (ANNPR-Ctrl) | 第27-31页 |
| ·结果与讨论 | 第31-35页 |
| ·使用ANNPR-Ctrl 系统实现产pIFN-α重组毕赤酵母高密度培养的高效化 | 第31-32页 |
| ·使用ANNPR-Ctrl 和DO-Stat 法进行流加培养时DO 变化情况的比较 | 第32-33页 |
| ·使用ANNPR-Ctrl 和DO-Stat 法进行流加培养时底物添加量和流加速度的比较 | 第33-34页 |
| ·使用ANNPR-Ctrl 实现重组毕赤酵母高密度培养的通用化 | 第34-35页 |
| ·本章小结 | 第35-37页 |
| 第三章 在线多变量监控改善毕赤酵母表达猪α-干扰素生产性能 | 第37-49页 |
| ·前言 | 第37-38页 |
| ·材料与方法 | 第38-41页 |
| ·主要仪器与设备 | 第38页 |
| ·菌株 | 第38-39页 |
| ·培养基 | 第39页 |
| ·分析方法 | 第39-40页 |
| ·发酵罐规模下的诱导条件和在线检测控制系统 | 第40-41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-47页 |
| ·诱导阶段pIFN-α抗病毒活性和各主要监测变量的变化趋势 | 第41页 |
| ·诱导阶段，不同甲醇浓度控制水平下的pIFN-α抗病毒活性和OUR | 第41-43页 |
| ·过渡期的比生长速度对诱导期pIFN-α抗病毒活性和OUR 的影响 | 第43-46页 |
| ·多批次发酵结果性能比较分析 | 第46-47页 |
| ·本章小结 | 第47-49页 |
| 第四章 基于复合型诱导控制策略 (低温+高溶解氧浓度) 的猪α-干扰素优化表达系统 | 第49-65页 |
| ·前言 | 第49-50页 |
| ·材料与方法 | 第50-52页 |
| ·实验菌株 | 第50页 |
| ·培养基 | 第50页 |
| ·主要仪器 | 第50页 |
| ·分析方法 | 第50-52页 |
| ·结果与讨论 | 第52-63页 |
| ·降低诱导温度增强细胞对甲醇环境的适应能力 | 第52-53页 |
| ·诱导温度对AOX 酶活性、细胞代谢活性以及pIFN-α抗病毒活性的影响 | 第53-55页 |
| ·不同诱导温度下胞内外蛋白酶浓度比较 | 第55页 |
| ·不同诱导温度下甲醛及甲酸脱氢酶活性比较 | 第55-56页 |
| ·诱导稳定期、不同诱导温度下关键酶基因RT-PCR 定量结果比较 | 第56-58页 |
| ·甲醇浓度控制在10 g/L 时，不同诱导温度下DO、OUR 和CER 的变化趋势 | 第58页 |
| ·复合诱导 (低温+高溶解氧浓度) 控制提高pIFN-α表达水平 | 第58-60页 |
| ·不同控制条件下主要性能指标比较 | 第60-61页 |
| ·低温诱导以及复合诱导 (低温+高溶解氧浓度) 控制提高pIFN-α表达水平代谢机理分析 | 第61-63页 |
| ·本章小结 | 第63-65页 |
| 第五章 基于多变量聚类分析的猪α-干扰素表达过程的故障诊断和早期预警系统 | 第65-75页 |
| ·前言 | 第65-67页 |
| ·材料与方法 | 第67页 |
| ·实验菌株 | 第67页 |
| ·培养基 | 第67页 |
| ·主要仪器 | 第67页 |
| ·分析方法 | 第67页 |
| ·结果与讨论 | 第67-74页 |
| ·以pIFN-α抗病毒活性为指标对发酵生产性能进行划分 | 第67-68页 |
| ·“正常” 和 “异常” 发酵批次下，诱导期在线状态变量的2 维平面聚类分析 | 第68-69页 |
| ·“正常” 和 “异常” 批次下，生长期相关生理变量的2 维平面图聚类分析 | 第69-72页 |
| ·利用预先得到的“最佳聚类分界线”进行发酵初期的“病态生理诊断” | 第72-74页 |
| ·本章小结 | 第74-75页 |
| 第六章 甲醇/山梨醇共混诱导改善中型罐放大生产表达猪α-干扰素生产性能 | 第75-87页 |
| ·前言 | 第75-76页 |
| ·材料与方法 | 第76-77页 |
| ·菌株 | 第76页 |
| ·培养基 | 第76页 |
| ·主要仪器 | 第76页 |
| ·分析方法 | 第76页 |
| ·10 L 发酵罐下流加培养和诱导方法 | 第76-77页 |
| ·结果与讨论 | 第77-85页 |
| ·相同诱导条件下，发酵放大前后pIFN-α表达差异比较 | 第77-78页 |
| ·甲醇/山梨醇共混诱导提高pIFN-α表达水平 | 第78-79页 |
| ·不同山梨醇流加速度下甲醇和山梨醇消耗情况 | 第79-80页 |
| ·甲醇/山梨醇共混诱导对AOX 及甲醛异化代谢途径关键酶的影响 | 第80-81页 |
| ·甲醇/山梨醇共混诱导对TCA 循环中两个关键酶的影响 | 第81-82页 |
| ·甲醇/山梨醇共混诱导改变毕赤酵母能量代谢途径 | 第82-84页 |
| ·10 L 发酵罐不同实验条件下各主要发酵性能指标比较 | 第84-85页 |
| ·本章小结 | 第85-87页 |
| 结论 | 第87-88页 |
| 展望 | 第88-89页 |
| 论文创新点 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-101页 |
| 附录：作者攻读博士学位期间发表主要论文 | 第101页 |
