中英文缩写词对照 | 第8-10页 |
中文摘要 | 第10-13页 |
Abstract | 第13-16页 |
1 引言 | 第17-21页 |
2 实验材料 | 第21-29页 |
2.1 实验动物 | 第21页 |
2.2 材料与试剂 | 第21-23页 |
2.3 主要溶液配制 | 第23-26页 |
2.4 图像分析软件 | 第26-27页 |
2.5 引物序列 | 第27页 |
2.6 主要耗材与仪器 | 第27-29页 |
3 实验方法 | 第29-48页 |
3.1 类风湿关节炎动物模型构建 | 第29-30页 |
3.2 酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第30-31页 |
3.3 关节滑液pH值测量 | 第31-32页 |
3.4 ASIC1a与NF-κB p65免疫荧光双标染色 | 第32页 |
3.5 大鼠关节软骨细胞分离、培养与鉴定 | 第32-34页 |
3.6 实时定量PCR | 第34-36页 |
3.7 蛋白免疫印迹方法(Western blot)检测蛋白的表达 | 第36-38页 |
3.8 免疫荧光单标染色 | 第38页 |
3.9 细胞活力检测 | 第38页 |
3.10 细胞毒性(LDH)检测 | 第38-39页 |
3.11 投射电镜观察细胞凋亡形态 | 第39页 |
3.12 激光共聚焦检测胞内钙离子内流 | 第39-40页 |
3.13 ASIC1启动子的构建 | 第40-41页 |
3.14 双荧光素酶报告基因(Dual Luciferase)检测 | 第41-42页 |
3.15 电泳迁移率变动分析(EMSA) | 第42-43页 |
3.16 染色质免疫沉淀(CHIP) | 第43-45页 |
3.17 ASIC1a-short hairpin (sh)RNA瞬时转染入软骨细胞 | 第45-46页 |
3.18 线粒体膜电位检测(JC-1法) | 第46页 |
3.19 关节软骨细胞凋亡流式检测 | 第46-47页 |
3.20 统计学分析 | 第47-48页 |
4 结果 | 第48-82页 |
4.1 ASIC1a和NF-κB p65在AA大鼠关节软骨中高表达与共定位情况 | 第48-52页 |
4.2 IL-1β和TNF-α以浓度依赖方式上调原代大鼠关节软骨细胞ASIC1a的表达 | 第52-58页 |
4.3 MAPK和NF-κB信号通路在IL-1β和TNF-α调控大鼠关节软骨细胞ASIC1a表达中的作用 | 第58-62页 |
4.4 转录因子NF-κB参与IL-1β和TNF-α上调ASIC1a表达的过程 | 第62-67页 |
4.5 IL-1β和TNF-α加剧酸诱导原代大鼠关节软骨细胞的毒性 | 第67-70页 |
4.6 IL-1β和TNF-α加剧ASIC1a介导的关节软骨细胞凋亡 | 第70-77页 |
4.7 ASIC1a激活增强IL-1β和TNF-α诱导的软骨细胞基质相关基因表达 | 第77-79页 |
4.8 钙离子在IL-1β和TNF-α增强ASIC1a介导的软骨细胞凋亡过程中的作用 | 第79-82页 |
5 讨论 | 第82-87页 |
6 结论 | 第87-89页 |
参考文献 | 第89-99页 |
附录 | 第99-102页 |
致谢 | 第102-104页 |
REVIEW Functions of interleukin-34 and its emerging association with rheumatoid arthritis | 第104-137页 |
References | 第124-137页 |