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白介素-1β和肿瘤坏死因子-α对酸敏感离子通道1a介导的关节软骨细胞凋亡的作用及其机制研究

中英文缩写词对照第8-10页
中文摘要第10-13页
Abstract第13-16页
1 引言第17-21页
2 实验材料第21-29页
    2.1 实验动物第21页
    2.2 材料与试剂第21-23页
    2.3 主要溶液配制第23-26页
    2.4 图像分析软件第26-27页
    2.5 引物序列第27页
    2.6 主要耗材与仪器第27-29页
3 实验方法第29-48页
    3.1 类风湿关节炎动物模型构建第29-30页
    3.2 酶联免疫吸附实验(ELISA)第30-31页
    3.3 关节滑液pH值测量第31-32页
    3.4 ASIC1a与NF-κB p65免疫荧光双标染色第32页
    3.5 大鼠关节软骨细胞分离、培养与鉴定第32-34页
    3.6 实时定量PCR第34-36页
    3.7 蛋白免疫印迹方法(Western blot)检测蛋白的表达第36-38页
    3.8 免疫荧光单标染色第38页
    3.9 细胞活力检测第38页
    3.10 细胞毒性(LDH)检测第38-39页
    3.11 投射电镜观察细胞凋亡形态第39页
    3.12 激光共聚焦检测胞内钙离子内流第39-40页
    3.13 ASIC1启动子的构建第40-41页
    3.14 双荧光素酶报告基因(Dual Luciferase)检测第41-42页
    3.15 电泳迁移率变动分析(EMSA)第42-43页
    3.16 染色质免疫沉淀(CHIP)第43-45页
    3.17 ASIC1a-short hairpin (sh)RNA瞬时转染入软骨细胞第45-46页
    3.18 线粒体膜电位检测(JC-1法)第46页
    3.19 关节软骨细胞凋亡流式检测第46-47页
    3.20 统计学分析第47-48页
4 结果第48-82页
    4.1 ASIC1a和NF-κB p65在AA大鼠关节软骨中高表达与共定位情况第48-52页
    4.2 IL-1β和TNF-α以浓度依赖方式上调原代大鼠关节软骨细胞ASIC1a的表达第52-58页
    4.3 MAPK和NF-κB信号通路在IL-1β和TNF-α调控大鼠关节软骨细胞ASIC1a表达中的作用第58-62页
    4.4 转录因子NF-κB参与IL-1β和TNF-α上调ASIC1a表达的过程第62-67页
    4.5 IL-1β和TNF-α加剧酸诱导原代大鼠关节软骨细胞的毒性第67-70页
    4.6 IL-1β和TNF-α加剧ASIC1a介导的关节软骨细胞凋亡第70-77页
    4.7 ASIC1a激活增强IL-1β和TNF-α诱导的软骨细胞基质相关基因表达第77-79页
    4.8 钙离子在IL-1β和TNF-α增强ASIC1a介导的软骨细胞凋亡过程中的作用第79-82页
5 讨论第82-87页
6 结论第87-89页
参考文献第89-99页
附录第99-102页
致谢第102-104页
REVIEW Functions of interleukin-34 and its emerging association with rheumatoid arthritis第104-137页
    References第124-137页

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