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河西走廊盐碱土壤中未培养放线菌多样性研究

摘要第8-9页
Abstract第9-10页
第一章 前言第11-26页
    1.1 放线菌第11-14页
        1.1.1 放线菌概述第11-12页
        1.1.2 盐碱环境放线菌研究现状及意义第12-14页
    1.2 盐碱土壤微生物多样性研究方法第14-22页
        1.2.1 盐碱土壤微生物多样性含义第14-15页
            1.2.1.1 物种多样性第14页
            1.2.1.2 遗传多样性第14-15页
            1.2.1.3 功能多样性第15页
        1.2.2 盐碱土壤微生物多样性的研究方法第15-22页
            1.2.2.1 传统的微生物平板纯培养法第15-16页
            1.2.2.2 生物化学方法第16-18页
            1.2.2.3 分子生物学方法第18-22页
    1.3 放线菌分类学研究第22-24页
        1.3.1 国外分类学进展第22-23页
        1.3.2 国内分类学进展第23-24页
        1.3.3 多相分类研究第24页
    1.4 展望第24-25页
    1.5 本研究目的与意义第25-26页
第二章 材料与方法第26-36页
    2.1 试验材料第26-28页
        2.1.1 土壤样品采集及处理第26-27页
        2.1.2 主要试剂与器材第27-28页
            2.1.2.1 主要试剂第27页
            2.1.2.2 主要仪器第27页
            2.1.2.3 引物第27-28页
            2.1.2.4 培养基第28页
    2.2 研究方法第28-36页
        2.2.1 土壤微生物总DNA提取方法优化第28-30页
            2.2.1.1 方法一(Omega试剂盒法)第28-29页
            2.2.1.2 方法二(MoBio试剂盒法)第29页
            2.2.1.3 方法三(CTAB-SDS法)第29-30页
            2.2.1.4 方法四(CaCl2-SDS-酶解法)第30页
            2.2.1.5 土壤DNA纯度及浓度的检测第30页
        2.2.2 放线菌 16S rRNA基因的PCR扩增及纯化第30-33页
            2.2.2.1 第一轮PCR扩增第30-31页
            2.2.2.2 第二轮PCR扩增第31-32页
            2.2.2.3 Reconditioning PCR扩增第32-33页
        2.2.3 PCR产物纯化第33页
        2.2.4 目的基因与载体连接第33页
        2.2.5 转化第33页
        2.2.6 阳性克隆筛选第33-34页
        2.2.7 16S rRNA基因扩增片段限制性内切酶分析(ARDRA)及测序第34-35页
        2.2.8 系统发育分析及序列登录号第35页
        2.2.9 数据处理第35-36页
第三章 结果与分析第36-56页
    3.1 土壤总DNA提取方法优化及 16S rRNA基因PCR扩增第36-37页
    3.2 ARDRA分析第37-38页
    3.3 多样性指数分析第38-41页
        3.3.1 河西走廊各地区土壤放线菌多样性指数分析第38-40页
        3.3.2 河西走廊盐碱土壤中放线菌多样性指数分析第40-41页
    3.4 系统发育分析第41-56页
        3.4.1 疏勒河流域地区盐碱土壤中放线菌系统发育分析第41-45页
        3.4.2 黑河流域地区盐碱土壤中放线菌系统发育分析第45-48页
        3.4.3 石羊河流域地区盐碱土壤中放线菌系统发育分析第48-51页
        3.4.4 河西走廊地区盐碱土壤中放线菌系统发育分析第51-56页
第四章 讨论第56-58页
第五章 结论第58-61页
    5.1 DNA提取方法优化第58页
    5.2 放线菌多样性指数分析第58-59页
    5.3 放线菌系统发育分析第59-61页
        5.3.1 疏勒河流域放线菌系统发育分析第59页
        5.3.2 黑河流域放线菌系统发育分析第59页
        5.3.3 石羊河流域放线菌系统发育分析第59-60页
        5.3.4 河西走廊地区不同类型土壤中放线菌系统发育分析第60-61页
参考文献第61-70页
参与项目与科研成果第70-71页
致谢第71页

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