| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第1章 引言 | 第10-12页 |
| 第2章 材料 | 第12-16页 |
| 2.1 标本及细胞系 | 第12页 |
| 2.1.1 标本 | 第12页 |
| 2.1.2 细胞系 | 第12页 |
| 2.2 主要实验设备 | 第12-13页 |
| 2.3 主要试剂及耗材 | 第13-14页 |
| 2.4 自配试剂 | 第14-16页 |
| 第3章 实验方法 | 第16-23页 |
| 3.1 蛋白印迹Western blot检测喉癌组织中CD47蛋白的表达 | 第16-18页 |
| 3.1.1 总蛋白提取 | 第16页 |
| 3.1.2 蛋白浓度测定(BCA法) | 第16页 |
| 3.1.3 SDS-PAGE电泳 | 第16-17页 |
| 3.1.4 转膜 | 第17页 |
| 3.1.5 封闭 | 第17页 |
| 3.1.6 化学发光、显影、定影 | 第17-18页 |
| 3.1.7 凝胶图像分析 | 第18页 |
| 3.2 人喉癌细胞Hep-2 的培养 | 第18-19页 |
| 3.2.1 细胞的复苏 | 第18页 |
| 3.2.2 细胞传代 | 第18-19页 |
| 3.3 Hep-2 细胞的转染 | 第19-20页 |
| 3.3.1 Hep-2 细胞感染预实验 | 第19页 |
| 3.3.2 重组慢病毒转染喉鳞癌细胞Hep-2 | 第19-20页 |
| 3.3.3 Western blot检测慢病毒转染NC-LV及CD47-RNAi-LV后Hep-2细胞中CD47的表达量 | 第20页 |
| 3.4 MTT法检测细胞活性变化 | 第20页 |
| 3.5 Annexin V –PE/7-AAD双染法检测细胞凋亡率 | 第20-21页 |
| 3.6 Transwell侵袭实验检测细胞体外侵袭能力的变化 | 第21-22页 |
| 3.7 统计学分析 | 第22-23页 |
| 第4章 结果 | 第23-29页 |
| 4.1 Western blot结果显示CD47在喉癌组织中呈高表达，与肿瘤的T分期、临床分期及淋巴结转移有关 | 第23-24页 |
| 4.2 CD47-RNAi-LV对Hep-2 细胞CD47蛋白表达的影响 | 第24-26页 |
| 4.3 MTT法检测CD47对Hep-2 细胞增殖的影响 | 第26-27页 |
| 4.4 流式细胞术检测CD47对Hep-2 细胞凋亡的影响 | 第27页 |
| 4.5 Transwell细胞侵袭实验检测CD47对Hep-2 细胞侵袭能力的影响 | 第27-29页 |
| 第5章 讨论 | 第29-32页 |
| 第6章 结论和展望 | 第32-33页 |
| 6.1 结论 | 第32页 |
| 6.2 展望 | 第32-33页 |
| 致谢 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-37页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第37-38页 |
| 综述 | 第38-44页 |
| 参考文献 | 第42-44页 |
