摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第8-14页 |
1.1 γ-氨基丁酸 | 第8-9页 |
1.1.1 γ-氨基丁酸的应用 | 第8页 |
1.1.2 γ-氨基丁酸制备方法 | 第8-9页 |
1.2 重组谷氨酸棒杆菌γ-氨基丁酸合成途径研究现状 | 第9-10页 |
1.3 GAD的酶学特性 | 第10-11页 |
1.4 蛋白质表达的翻译水平调节 | 第11页 |
1.5 蛋白质表达的转录水平调节 | 第11-13页 |
1.6 立题背景与意义 | 第13页 |
1.7 研究内容 | 第13-14页 |
第二章 实验材料和方法 | 第14-31页 |
2.1 实验材料 | 第14-21页 |
2.1.1 实验菌株和质粒 | 第14-17页 |
2.1.2 实验所用引物 | 第17-19页 |
2.1.3 试剂 | 第19页 |
2.1.4 实验仪器 | 第19-20页 |
2.1.5 培养基及培养条件 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-31页 |
2.2.1 分子操作 | 第21-23页 |
2.2.2 表达质粒的构建 | 第23-28页 |
2.2.3 发酵参数的测定 | 第28页 |
2.2.4 发酵产物含量的测定 | 第28页 |
2.2.5 GAD酶活测定 | 第28-30页 |
2.2.6 gadB2转录水平分析 | 第30-31页 |
第三章 结果与讨论 | 第31-56页 |
3.1 不同RBS序列对gadB2表达和GABA发酵的影响 | 第31-37页 |
3.1.1 不同RBS序列的gadB2表达质粒及重组菌株的构建 | 第31-32页 |
3.1.2 RBS(H)序列对gadB2表达和GABA发酵的影响 | 第32-34页 |
3.1.3 RBS(M)序列对gadB2表达和GABA发酵的影响 | 第34-35页 |
3.1.4 RBS(L)序列对gadB2表达和GABA发酵的影响 | 第35-37页 |
3.2 间隔序列的长度对gadB2表达和GABA发酵的影响 | 第37-40页 |
3.2.1 不同间隔序列长度的gadB2表达质粒及重组菌株的构建 | 第37-38页 |
3.2.2 间隔序列的长度对gadB2表达及GABA发酵的影响 | 第38-40页 |
3.3 不同类型启动子对gadB2表达和GABA发酵的影响 | 第40-49页 |
3.3.1 组成型启动子对gadB2表达和GABA发酵的影响 | 第40-43页 |
3.3.2 P_(sigB)和SigB-依赖型启动子对gadB2表达和GABA发酵的影响. | 第43-46页 |
3.3.3 胁迫感应启动子对gadB2表达和GABA发酵的影响 | 第46-49页 |
3.4 P_(dnaK)的启动子结构对GABA摇瓶发酵的影响 | 第49-52页 |
3.4.1 P_(dnaK)系列gadB2表达质粒和重组菌株的构建 | 第50页 |
3.4.2 P_(dnaK)系列表达菌株菌体生长情况 | 第50-51页 |
3.4.3 P_(dnaK)的启动子结构对gadB2表达和GABA发酵的影响 | 第51-52页 |
3.5 共表达gadB1~(mut)和gadB2对GABA发酵的影响 | 第52-56页 |
3.5.1 共表达质粒及重组菌株的构建 | 第52-53页 |
3.5.2 共表达gadB1~(mut)和gadB2对GABA发酵的影响 | 第53-56页 |
主要结论与展望 | 第56-58页 |
主要结论 | 第56-57页 |
展望 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-64页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第64页 |