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利用RBS序列和启动子策略高效表达谷氨酸脱羧酶

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第一章 绪论第8-14页
    1.1 γ-氨基丁酸第8-9页
        1.1.1 γ-氨基丁酸的应用第8页
        1.1.2 γ-氨基丁酸制备方法第8-9页
    1.2 重组谷氨酸棒杆菌γ-氨基丁酸合成途径研究现状第9-10页
    1.3 GAD的酶学特性第10-11页
    1.4 蛋白质表达的翻译水平调节第11页
    1.5 蛋白质表达的转录水平调节第11-13页
    1.6 立题背景与意义第13页
    1.7 研究内容第13-14页
第二章 实验材料和方法第14-31页
    2.1 实验材料第14-21页
        2.1.1 实验菌株和质粒第14-17页
        2.1.2 实验所用引物第17-19页
        2.1.3 试剂第19页
        2.1.4 实验仪器第19-20页
        2.1.5 培养基及培养条件第20-21页
    2.2 实验方法第21-31页
        2.2.1 分子操作第21-23页
        2.2.2 表达质粒的构建第23-28页
        2.2.3 发酵参数的测定第28页
        2.2.4 发酵产物含量的测定第28页
        2.2.5 GAD酶活测定第28-30页
        2.2.6 gadB2转录水平分析第30-31页
第三章 结果与讨论第31-56页
    3.1 不同RBS序列对gadB2表达和GABA发酵的影响第31-37页
        3.1.1 不同RBS序列的gadB2表达质粒及重组菌株的构建第31-32页
        3.1.2 RBS(H)序列对gadB2表达和GABA发酵的影响第32-34页
        3.1.3 RBS(M)序列对gadB2表达和GABA发酵的影响第34-35页
        3.1.4 RBS(L)序列对gadB2表达和GABA发酵的影响第35-37页
    3.2 间隔序列的长度对gadB2表达和GABA发酵的影响第37-40页
        3.2.1 不同间隔序列长度的gadB2表达质粒及重组菌株的构建第37-38页
        3.2.2 间隔序列的长度对gadB2表达及GABA发酵的影响第38-40页
    3.3 不同类型启动子对gadB2表达和GABA发酵的影响第40-49页
        3.3.1 组成型启动子对gadB2表达和GABA发酵的影响第40-43页
        3.3.2 P_(sigB)和SigB-依赖型启动子对gadB2表达和GABA发酵的影响.第43-46页
        3.3.3 胁迫感应启动子对gadB2表达和GABA发酵的影响第46-49页
    3.4 P_(dnaK)的启动子结构对GABA摇瓶发酵的影响第49-52页
        3.4.1 P_(dnaK)系列gadB2表达质粒和重组菌株的构建第50页
        3.4.2 P_(dnaK)系列表达菌株菌体生长情况第50-51页
        3.4.3 P_(dnaK)的启动子结构对gadB2表达和GABA发酵的影响第51-52页
    3.5 共表达gadB1~(mut)和gadB2对GABA发酵的影响第52-56页
        3.5.1 共表达质粒及重组菌株的构建第52-53页
        3.5.2 共表达gadB1~(mut)和gadB2对GABA发酵的影响第53-56页
主要结论与展望第56-58页
    主要结论第56-57页
    展望第57-58页
致谢第58-59页
参考文献第59-64页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第64页

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