| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第一章 引言 | 第10-17页 |
| 1.1 防御素的分类和结构特征 | 第10-12页 |
| 1.1.1 α-防御素 | 第11页 |
| 1.1.2 β-防御素 | 第11页 |
| 1.1.3 θ-防御素 | 第11-12页 |
| 1.2 防御素生物学活性 | 第12-17页 |
| 1.2.1 抗菌活性及作用机制 | 第12-13页 |
| 1.2.2 抗病毒作用 | 第13页 |
| 1.2.3 抗肿瘤作用 | 第13页 |
| 1.2.4 其它生物学活性 | 第13页 |
| 1.2.5 应用前景 | 第13-14页 |
| 1.2.6 鱼类β-防御素研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.7 鱼类β-防御素转录调控分析 | 第15页 |
| 1.2.8 本论文研究目的和意义 | 第15-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-30页 |
| 2.1 仪器与试剂 | 第17-20页 |
| 2.1.1 主要仪器设备 | 第17页 |
| 2.1.2 主要试剂与试剂盒 | 第17-18页 |
| 2.1.3 细胞实验主要试剂及耗材 | 第18页 |
| 2.1.4 菌种与细胞、质粒载体 | 第18-19页 |
| 2.1.5 引物表 | 第19-20页 |
| 2.2 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.3 草鱼DB1、DB2、DB3基因克隆 | 第21-23页 |
| 2.3.1 DB1、DB2、DB3的同源克隆 | 第21页 |
| 2.3.2 DB13'末端的扩增 | 第21-22页 |
| 2.3.3 DB15'末端的扩增 | 第22-23页 |
| 2.3.4 草鱼DB1、DB2、DB3全长的拼接 | 第23页 |
| 2.3.5 草鱼DB1、DB2、DB3的系统进化分析 | 第23页 |
| 2.4 草鱼DB1、DB2、DB3组织表达水平分析 | 第23-24页 |
| 2.4.1 草鱼DB1、DB2、DB3组织表达检测 | 第23-24页 |
| 2.4.2 LPS刺激草鱼后DB1、DB2、DB3组织表达分析 | 第24页 |
| 2.5 草鱼p65和DB1、DB2、DB3启动子亲和分析 | 第24-27页 |
| 2.5.1 草鱼DB1、DB2、DB3启动子的克隆 | 第24-25页 |
| 2.5.2 草鱼DB1、DB3启动子质粒的构建 | 第25页 |
| 2.5.3 草鱼p65全长及截断蛋白的原核表达及纯化 | 第25-26页 |
| 2.5.4 草鱼DB1、DB2、DB3启动子和草鱼p65的亲和性分析 | 第26-27页 |
| 2.6 草鱼p65对DB1、DB3转录调控 | 第27-28页 |
| 2.6.1 CO细胞培养 | 第27页 |
| 2.6.2 细胞转染 | 第27页 |
| 2.6.3 荧光素酶活性检测 | 第27-28页 |
| 2.6.4 草鱼DB3启动子的转录调控分析 | 第28页 |
| 2.7 草鱼DB1、DB2、DB3重组蛋白抗菌活性分析 | 第28-30页 |
| 2.7.1 草鱼DB1、DB2、DB3原核表达质粒的构建 | 第28页 |
| 2.7.2 草鱼DB1、DB2、DB3原核表达与纯化 | 第28-29页 |
| 2.7.3 草鱼DB1、DB2、DB3重组蛋白肠激酶切 | 第29页 |
| 2.7.4 草鱼DB1、DB2、DB3抗菌实验 | 第29-30页 |
| 第三章 结果与分析 | 第30-48页 |
| 3.1 草鱼DB1、DB2、DB3的克隆及其分析 | 第30-35页 |
| 3.1.1 草鱼DB1、DB2、DB3全长cDNA的克隆 | 第30-32页 |
| 3.1.2 草鱼DB1、DB2、DB3全长cDNA序列分析 | 第32-34页 |
| 3.1.3 草鱼DB1、DB2、DB3基因结构分析 | 第34-35页 |
| 3.2 草鱼DB1、DB2、DB3系统进化分析 | 第35-37页 |
| 3.3 草鱼DB1、DB2、DB3的组织表达 | 第37-40页 |
| 3.3.1 草鱼DB1、DB2、DB3的组织固有表达 | 第37-38页 |
| 3.3.2 草鱼DB1、DB2、DB3在LPS刺激后的表达 | 第38-40页 |
| 3.4 草鱼DB1、DB2、DB3启动子克隆及分析 | 第40-41页 |
| 3.4.1 草鱼DB1启动子特征 | 第40-41页 |
| 3.4.2 草鱼DB3启动子特征 | 第41页 |
| 3.5 草鱼DB1、DB3转录调控分析 | 第41-45页 |
| 3.5.1 草鱼p65全长及截断蛋白的原核表达和纯化 | 第41-42页 |
| 3.5.2 草鱼DB1启动子和p65的亲和性分析 | 第42-43页 |
| 3.5.3 草鱼DB3启动子和p65的亲和性分析 | 第43页 |
| 3.5.4 草鱼p65对草鱼DB1基因的转录调控分析 | 第43-44页 |
| 3.5.5 草鱼p65对草鱼DB3基因的转录调控分析 | 第44-45页 |
| 3.6 草鱼DB1、DB2、DB3抑菌实验 | 第45-48页 |
| 3.6.1 草鱼DB1、DB2、DB3蛋白的原核表达和纯化 | 第45-46页 |
| 3.6.2 草鱼DB1、DB2、DB3肠激酶切 | 第46页 |
| 3.6.3 草鱼DB1、DB2、DB3蛋白抑菌实验 | 第46-48页 |
| 第四章 讨论 | 第48-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第58页 |
