| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 符号说明 | 第8-9页 |
| 文献综述 | 第9-14页 |
| 1.1 溶瘤病毒 | 第9页 |
| 1.2 仙台病毒基本概述 | 第9页 |
| 1.3 仙台病毒研究进展及应用 | 第9-10页 |
| 1.4 凋亡 | 第10-11页 |
| 1.5 自噬 | 第11页 |
| 1.6 自噬与肿瘤 | 第11-12页 |
| 1.7 自噬与凋亡 | 第12页 |
| 1.8 PI3K/Akt/mTOR信号通路 | 第12-13页 |
| 1.9 PI3K/Akt/mTOR通路在肿瘤中的作用 | 第13-14页 |
| 第一章 HVJ-E诱导Hela细胞自噬 | 第14-26页 |
| 1.1 材料 | 第14-16页 |
| 1.1.1 细胞、病毒和质粒 | 第14页 |
| 1.1.2 主要实验仪器 | 第14-15页 |
| 1.1.3 主要试剂和药品 | 第15-16页 |
| 1.2 方法 | 第16-21页 |
| 1.2.1 细胞培养及形态学观察 | 第16页 |
| 1.2.2 CCK-8法测定细胞增殖 | 第16页 |
| 1.2.3 透射电镜检测自噬小体 | 第16-17页 |
| 1.2.4 GFP-LC3质粒转染Hela细胞 | 第17页 |
| 1.2.5 Western-blot分析 | 第17-20页 |
| 1.2.6 数据统计分析 | 第20-21页 |
| 1.3 结果 | 第21-25页 |
| 1.3.1 Hela细胞在HVJ-E作用下的形态变化 | 第21页 |
| 1.3.2 HVJ-E抑制Hela细胞增殖 | 第21-22页 |
| 1.3.3 HVJ-E诱导Hela细胞产生自噬小体 | 第22页 |
| 1.3.4 HVJ-E诱导Hela细胞产生荧光自噬聚点 | 第22-24页 |
| 1.3.5 HVJ-E诱导Hela细胞LC3I/II转换 | 第24-25页 |
| 1.4 讨论 | 第25-26页 |
| 第二章 Akt/mTOR在HVJ-E致Hela细胞自噬中发挥作用 | 第26-34页 |
| 2.1 材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 细胞、病毒和质粒 | 第26页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.3 主要试剂和药品 | 第27页 |
| 2.2 方法 | 第27-28页 |
| 2.2.1 透射电镜检测自噬小体 | 第27-28页 |
| 2.2.2 western-blot分析 | 第28页 |
| 2.3 结果 | 第28-32页 |
| 2.3.1 HVJ-E抑制Akt/mTOR的活性存在时间相关性 | 第28-29页 |
| 2.3.2 激动剂显著减少HVJ-E诱导的自噬体和溶酶体数量 | 第29-30页 |
| 2.3.3 HVJ-E抑制Akt/mTOR的活性存在剂量相关性 | 第30-32页 |
| 2.5 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 Erk1/2在HVJ-E诱导Hela细胞自噬中的作用 | 第34-39页 |
| 3.1 材料 | 第34-35页 |
| 3.1.1 细胞、病毒和质粒 | 第34页 |
| 3.1.2 主要实验仪器 | 第34-35页 |
| 3.1.3 主要试剂和药品 | 第35页 |
| 3.2 方法 | 第35-36页 |
| 3.2.1 透射电镜观察细胞 | 第35页 |
| 3.2.2 GFP-LC3转染Hela细胞 | 第35页 |
| 3.2.3 Lyso-Tracker Red探针染溶酶体 | 第35-36页 |
| 3.2.4 western-blot检测 | 第36页 |
| 3.3 结果 | 第36-38页 |
| 3.3.1 抑制Erk1/2能减少Hela产生自噬体或自噬溶酶体 | 第36页 |
| 3.3.2 抑制Erk1/2的活性,GFP-LC3荧光聚点减少 | 第36-37页 |
| 3.3.3 抑制Erk1/2的活性,既能抑制自噬也能抑制凋亡 | 第37-38页 |
| 3.4 讨论 | 第38-39页 |
| 第四章 诱导自噬促进HVJ-E致Hela细胞凋亡 | 第39-43页 |
| 4.1 材料 | 第39页 |
| 4.1.1 主要仪器设备 | 第39页 |
| 4.1.2 主要试剂和药品 | 第39页 |
| 4.2 方法 | 第39-40页 |
| 4.2.1 western-blot检测相关蛋白 | 第39页 |
| 4.2.2 流式细胞术FACS (AnnexinV/PI双染法)检测细胞凋亡 | 第39-40页 |
| 4.3 结果 | 第40-41页 |
| 4.3.1 自噬增强HVJ-E诱导的HeLa细胞凋亡 | 第40-41页 |
| 4.4 讨论 | 第41-43页 |
| 全文总结 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
