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乳酸及单羧酸转运体与肾癌血管内皮细胞增殖和能量代谢机制的研究

摘要第2-4页
abstract第4-5页
引言第8-10页
材料与方法第10-24页
    1.1 材料第10-12页
        1.1.1 实验细胞株来源第10页
        1.1.2 主要实验试剂第10-11页
        1.1.3 主要实验仪器第11页
        1.1.4 常用溶液配制方法第11-12页
    1.2 方法第12-24页
        1.2.1 细胞培养第12-14页
        1.2.2 细胞共培养体系构建第14-16页
        1.2.3 细胞增殖实验(CCK-8assay)第16页
        1.2.4 细胞侵袭实验(Transwellassay)第16页
        1.2.5 细胞迁移实验(woundhealing)第16-17页
        1.2.6 实时荧光定量PCR第17-20页
            1.2.6.1 细胞总RNA提取第17页
            1.2.6.2 RNA纯度及浓度检测第17-18页
            1.2.6.3 逆转录第18-19页
            1.2.6.4 RealTimeRCR反应第19页
            1.2.6.5 数据处理第19-20页
        1.2.7 蛋白质印迹(Westernblot)第20-22页
            1.2.7.1 细胞总蛋白提取第20页
            1.2.7.2 BCA法蛋白浓度测定第20页
            1.2.7.3 制备SDS-PAGE凝胶第20-21页
            1.2.7.4 样品变性和电泳第21页
            1.2.7.5 转膜及检测第21-22页
        1.2.8 培养液中乳酸含量测定第22页
        1.2.9 靶向抑制MCT1和MCT4后细胞增殖情况第22-23页
        1.2.10 统计学处理第23-24页
结果第24-30页
    2.1 共培养前后786-O和HUVEC增殖能力变化第24页
    2.2 共培养前后786-O和HUVEC侵袭能力变化第24-25页
    2.3 共培养前后786-O和HUVEC迁移能力变化第25-26页
    2.4 RT-PCR法测786-O和HUVEC中MCT1、MCT4表达第26-27页
    2.5 Westernblot法测786-O和HUVEC中MCT1、MCT4表达第27页
    2.6 培养基乳酸浓度测定第27-28页
    2.7 加入抑制剂后细胞增殖能力变化第28页
    2.8 加入抑制剂后培养基乳酸浓度第28-30页
讨论第30-33页
结论第33-34页
本研究的不足之处第34-35页
参考文献第35-37页
综述第37-44页
    参考文献第41-44页
攻读硕士期间研究成果第44-45页
致谢第45-46页

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