| 缩略语表 | 第7-9页 |
| 摘要 | 第9-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 前言 | 第15-19页 |
| 1.1 金黄色葡萄球菌感染可引起人细菌性脑膜炎 | 第15页 |
| 1.2 细菌性脑膜炎的发生简介 | 第15-16页 |
| 1.3 PSM是新发现的金黄色葡萄球菌关键毒力因子 | 第16-17页 |
| 1.4 金黄色葡萄球菌穿血脑屏障的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.5 研究方向和意义 | 第18-19页 |
| 第一章 PSMα影响金黄色葡萄球菌穿透血脑屏障的机制研究 | 第19-40页 |
| 1.1 引言 | 第19页 |
| 1.2 实验材料与仪器 | 第19-22页 |
| 1.2.1 菌株、细胞、实验动物 | 第19页 |
| 1.2.2 主要实验材料及试剂 | 第19-21页 |
| 1.2.3 主要实验仪器 | 第21-22页 |
| 1.3 实验方法 | 第22-29页 |
| 1.3.1 细菌培养 | 第22页 |
| 1.3.2 细菌生长曲线的测定 | 第22-23页 |
| 1.3.3 细菌上清制备 | 第23页 |
| 1.3.4 细胞培养 | 第23页 |
| 1.3.5 野生株和敲除株细菌注射动物存活实验 | 第23-24页 |
| 1.3.6 检测小鼠灌注对脑细菌载量差异的影响 | 第24页 |
| 1.3.7 小鼠脑组织菌量计数、病理切片 | 第24页 |
| 1.3.8 Evans blue 染色实验 | 第24-25页 |
| 1.3.9 体外血脑屏障模型构建 | 第25-26页 |
| 1.3.10 金葡菌菌体与hCMEC/D3单细胞层相互作用 | 第26页 |
| 1.3.11 黏附和侵袭实验 | 第26页 |
| 1.3.12 染色观察细菌侵入细胞情况 | 第26-27页 |
| 1.3.13 细菌上清作用与hCMEC/D3单细胞层相互作用 | 第27页 |
| 1.3.14 利用LDH试剂盒检测细菌上清的细胞毒作用 | 第27页 |
| 1.3.15 小鼠体内炎症因子的检测 | 第27-28页 |
| 1.3.16 Westernblot检测细胞紧密连接蛋白 | 第28-29页 |
| 1.3.17 统计学分析 | 第29页 |
| 1.4 实验结果 | 第29-39页 |
| 1.4.1 金黄色葡萄球菌野生株USA300和敲除株ΔPSMα生长速率相同. | 第29-30页 |
| 1.4.2 PSMα是金黄色葡萄球菌的重要毒力因子 | 第30页 |
| 1.4.3 PSMα在金黄色葡萄球菌穿血脑屏障的过程中发挥着重要作用 | 第30-33页 |
| 1.4.4 金黄色葡萄球菌不能通过直接穿细胞的方式穿透血脑屏障 | 第33-35页 |
| 1.4.5 PSMα可直接对微血管内皮细胞产生破坏作用 | 第35-37页 |
| 1.4.6 Westernblot检测细胞紧密连接蛋白 | 第37-38页 |
| 1.4.7 小鼠体内细胞炎症因子的检测 | 第38-39页 |
| 1.5 结果讨论 | 第39-40页 |
| 第二章 利用丙氨酸突变探究PSMα4结构与功能的关系 | 第40-50页 |
| 2.1 引言 | 第40页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第40-41页 |
| 2.2.1 材料 | 第40-41页 |
| 2.2.1.1 多肽和细胞 | 第40页 |
| 2.2.1.2 主要试剂 | 第40-41页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第41页 |
| 2.3 方法 | 第41-44页 |
| 2.3.1 多肽合成 | 第41-42页 |
| 2.3.2 hCMEC/D3细胞培养 | 第42页 |
| 2.3.3 中性粒细胞(PMN)的分离 | 第42-43页 |
| 2.3.4 PSMα4及其突变体对红细胞裂解 | 第43页 |
| 2.3.5 PSMα4及其突变体对PMN、hCMEC/D3细胞的细胞毒作用 | 第43页 |
| 2.3.6 圆二色性 | 第43页 |
| 2.3.7 趋化实验 | 第43-44页 |
| 2.3.8 统计学处理 | 第44页 |
| 2.4 实验结果 | 第44-48页 |
| 2.4.1 PSMα4及其突变体对红细胞的细胞毒作用 | 第44页 |
| 2.4.2 PSMα4及其突变体对PMN的细胞毒作用 | 第44-46页 |
| 2.4.3 PSMα4及其突变体对hCMEC/D3细胞的细胞毒作用 | 第46页 |
| 2.4.4 圆二色性 | 第46-47页 |
| 2.4.5 趋化实验 | 第47-48页 |
| 2.4.6 PSMα4的空间结构预测 | 第48页 |
| 2.5 结果讨论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 主要简历 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
