| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 1 引言 | 第9-15页 |
| ·水通道蛋白的发现 | 第9页 |
| ·水通道蛋白亚家族及结构 | 第9-11页 |
| ·水通道蛋白三大亚家族 | 第9-10页 |
| ·水通道蛋白的结构 | 第10-11页 |
| ·水通道蛋白分布 | 第11-13页 |
| ·泌尿系统中的水通道蛋白 | 第11-12页 |
| ·呼吸系统中的水通道蛋白 | 第12页 |
| ·消化系统中的水通道蛋白 | 第12页 |
| ·生殖系统中的水通道蛋白 | 第12页 |
| ·神经系统中的水通道蛋白 | 第12-13页 |
| ·肿瘤组织和水通道蛋白 | 第13页 |
| ·siRNA 干扰技术的研究进展 | 第13-14页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第14-15页 |
| 2 实验材料和方法 | 第15-22页 |
| ·实验材料 | 第15-16页 |
| ·主要生化和分子生物学试剂 | 第15页 |
| ·质粒及载体 | 第15页 |
| ·细胞系 | 第15页 |
| ·主要实验仪器和耗材 | 第15-16页 |
| ·实验方法 | 第16-22页 |
| ·感受态细胞 DH5α 和 DB3.1 的制备 | 第16页 |
| ·pENTR2B 和 pAd/CMV/V5-DEST 载体的扩增 | 第16页 |
| ·初始克隆重组体的构建与鉴定 | 第16-18页 |
| ·重组腺病毒质粒的构建与鉴定 | 第18页 |
| ·AQP1-shRNA 重组腺病毒质粒的包装 | 第18-19页 |
| ·细胞培养和感染 | 第19-20页 |
| ·免疫荧光检测 | 第20页 |
| ·Western Blot 检测 | 第20-21页 |
| ·细胞膜水通透性的检测 | 第21页 |
| ·MTT 检测 | 第21页 |
| ·平板单层损伤愈合检测 | 第21-22页 |
| 3 结果 | 第22-33页 |
| ·AQP1-shRNA 重组腺病毒质粒的构建 | 第22-27页 |
| ·shRNA 质粒与 pENTR2B 载体的重组 | 第22-24页 |
| ·重组腺病毒质粒的构建结果与鉴定 | 第24-27页 |
| ·AQP1-shRNA 重组腺病毒质粒的功能鉴定 | 第27-29页 |
| ·外源性AQP1 与内源性AQP1 表达方式不同 | 第27页 |
| ·AQP1-shRNA 重组腺病毒质粒对hAQP1 的干涉作用 | 第27-29页 |
| ·AQP1-shRNA 重组腺病毒质粒对 AQP1 水转运功能的影响 | 第29-31页 |
| ·AQP1-shRNA 重组腺病毒质粒显著干涉外源性AQP1 对水的通透性 | 第29-30页 |
| ·AQP1-shRNA 重组腺病毒质粒显著干涉内源性AQP1 对水的通透性 | 第30-31页 |
| ·AQP1-shRNA 重组腺病毒质粒对细胞运动性的影响 | 第31-33页 |
| ·AQP1-shRNA 重组腺病毒质粒干涉非糖基化的AQP1 抑制细胞的运动性 | 第31-32页 |
| ·AQP1-shRNA 重组腺病毒质粒干涉糖基化的AQP1 显著抑制细胞的运动性 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| ·AQP1-shRNA 重组腺病毒质粒鉴定 | 第33页 |
| ·AQP1-shRNA 重组腺病毒质粒功能鉴定 | 第33页 |
| ·AQP1 介导的水转运功能 | 第33-34页 |
| ·AQP1 在细胞迁移过程中的作用分析 | 第34-35页 |
| 结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-40页 |
| 致谢 | 第40页 |
