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在大肠杆菌中利用苯丙氨酸生产L-酪氨酸及其衍生物的研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
英文名词缩写表第14-15页
第一章 文献综述第15-25页
    1.1 L-酪氨酸的理化性质及作用第15页
    1.2 代谢途径第15-19页
    1.3 生产方法第19-21页
        1.3.1 提取法第19-20页
        1.3.2 化学合成法第20页
        1.3.3 直接发酵法第20-21页
        1.3.4 基因重组法第21页
    1.4 MH4循环的简介第21-22页
    1.5 多巴(L-DOPA)简介第22-23页
    1.6 本论文研究内容第23-25页
第二章 常规试验方法第25-33页
    2.1 实验仪器第25页
    2.2 实验试剂第25-26页
    2.3 培养基第26页
    2.4 质粒提取第26-27页
    2.5 PCR第27-28页
        2.5.1 克隆PCR第27页
        2.5.2 验证PCR第27-28页
    2.6 酶切体系第28页
    2.7 琼脂糖凝胶电泳第28-29页
    2.8 DNA产物回收第29-30页
        2.8.1 液体回收第29页
        2.8.2 胶回收第29-30页
    2.9 连接和转化第30-31页
        2.9.1 化学转化法第30-31页
        2.9.2 电转化法第31页
    2.10 感受态细胞的制备第31-32页
        2.10.1 感受态细胞的制备(化学法)第31页
        2.10.2 感受态细胞的制备(电转法)第31-32页
    2.11 目的蛋白的表达第32页
    2.12 OD_(600)测细胞浓度第32-33页
第三章 通过苯丙氨酸羟化酶构建生产L-酪氨酸的基因工程菌第33-45页
    3.1 引言第33页
    3.2 实验材料第33-34页
        3.2.1 实验菌株第33-34页
        3.2.2 培养基第34页
    3.3 实验方法第34-36页
        3.3.1 质粒的构建第34-35页
        3.3.2 酶活分析第35-36页
        3.3.3 转化第36页
        3.3.4 L-酪氨酸的检测方法第36页
    3.4 实验结果第36-43页
        3.4.1 L-酪氨酸合成途径的设计第36页
        3.4.2 转化苯丙氨酸生成L-酪氨酸第36-38页
        3.4.3 L-酪氨酸合成途径的优化第38-39页
        3.4.4 pCS-AX及pCS-APTA-AX的构建第39-40页
        3.4.5 MH4循环的优化第40-42页
        3.4.6 发酵条件的优化第42-43页
            3.4.6.1 发酵温度的优化选择第42-43页
            3.4.6.2 发酵转速的优化选择第43页
            3.4.6.3 发酵培养基的优化选择第43页
    3.5 结果讨论及小结第43-45页
第四章 对L-酪氨酸衍生物多巴(L-DOPA)的生产研究第45-50页
    4.1 引言第45页
    4.2 实验材料第45页
        4.2.1 实验菌株第45页
        4.2.2 培养基第45页
    4.3 实验方法第45-47页
        4.3.1 质粒的构建第45-46页
        4.3.2 转化第46页
        4.3.3 L-DOPA的检测方法第46-47页
    4.4 实验结果与讨论第47-48页
        4.4.1 L-DOPA合成途径的设计第47页
        4.4.2 pSA-hpaBC质粒的构建第47-48页
        4.4.3 培养基中加入抗氧化物质第48页
    4.5 实验结果讨论及小结第48-50页
第五章 结论与展望第50-52页
    5.1 结论与展望第50-51页
    5.2 创新点第51-52页
参考文献第52-55页
致谢第55-56页
研究成果及发表的学术论文第56-57页
作者简介第57页
导师简介第57-58页
学位论文答辩委员会决议书第58-59页

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