| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 绪论 | 第11-15页 |
| 1.1 课题来源、研究的目的和意义 | 第11-12页 |
| 1.1.1 课题来源 | 第11页 |
| 1.1.2 研究目的 | 第11-12页 |
| 1.1.3 研究意义 | 第12页 |
| 1.2 国内外研究概况 | 第12-14页 |
| 1.2.1 国外研究 | 第12-14页 |
| 1.2.2 国内研究 | 第14页 |
| 1.3 论文的主要研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-24页 |
| 2.1 研究资料及仪器设备 | 第15-16页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第15页 |
| 2.1.2 主要仪器与试剂 | 第15-16页 |
| 2.2 研究方法 | 第16-24页 |
| 2.2.1 靶向GPC-3 干扰质粒的构建与鉴定 | 第16-18页 |
| 2.2.2 细胞复苏﹑培养和冻存 | 第18-19页 |
| 2.2.3 细胞计数和细胞活力检测 | 第19页 |
| 2.2.4 细胞转染 | 第19页 |
| 2.2.5 细胞GPC-3 mRNA检测 | 第19-20页 |
| 2.2.6 细胞蛋白分析 | 第20-21页 |
| 2.2.7 CCK-8 法检测细胞增殖 | 第21页 |
| 2.2.8 平板克隆形成分析 | 第21页 |
| 2.2.9 细胞非锚着依赖性生长测定 | 第21页 |
| 2.2.10 细胞周期分析 | 第21页 |
| 2.2.11 建立裸鼠移植瘤模型 | 第21-22页 |
| 2.2.12 皮下肿瘤生长曲线测绘 | 第22页 |
| 2.2.13 移植瘤病理组织学检查 | 第22页 |
| 2.2.14 免疫组织化学分析 | 第22-23页 |
| 2.2.15 统计学分析 | 第23-24页 |
| 第三章 结果 | 第24-34页 |
| 3.1 不同肝癌细胞株GPC-3 表达差异分析 | 第24-25页 |
| 3.2 GPC3miRNA干扰质粒的构建与鉴定 | 第25页 |
| 3.3 miRNA转染肝癌细胞 | 第25页 |
| 3.4 miRNA下调GPC-3 表达 | 第25-26页 |
| 3.5 miRNA抑制肝癌细胞增殖 | 第26-27页 |
| 3.6 miRNA抑制肝癌细胞克隆形成 | 第27-29页 |
| 3.7 miRNA影响肝癌细胞增殖周期 | 第29-30页 |
| 3.8 miRNA下调Wnt信号通路相关蛋白的表达 | 第30页 |
| 3.9 miRNA抑制裸鼠皮下肿瘤生长 | 第30-32页 |
| 3.10 移植瘤病理学与Wnt/β-catenin信号通路关键分子表达 | 第32-34页 |
| 第四章 讨论 | 第34-37页 |
| 第五章 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 英文缩写词表 | 第42-43页 |
| 综述 | 第43-53页 |
| 综述参考文献 | 第49-53页 |
| 攻读硕士学位期间公开发表论文与成绩 | 第53-56页 |
| A: 在国内外刊物上发表的论文 | 第53-54页 |
| B: 在国际学术会议上发表的论文 | 第54-55页 |
| C: 所参加的项目 | 第55页 |
| D: 参加主办国家级医学继续教育项目 | 第55页 |
| E: 申报国家发明专项 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |