| 摘要 | 第8-12页 |
| Abstract | 第12-16页 |
| 缩略语名词表 | 第17-18页 |
| 1 文献综述 | 第18-23页 |
| 1.1 研究背景 | 第18-21页 |
| 1.1.1 植物的非生物胁迫 | 第18-19页 |
| 1.1.2 甘蓝型油菜非生物胁迫研究现状 | 第19-20页 |
| 1.1.3 cDNA-AFLP技术在作物上的研究进展 | 第20-21页 |
| 1.2 研究目的及意义 | 第21-22页 |
| 1.3 研究内容 | 第22-23页 |
| 2 油菜极端温度胁迫下差异表达基因的分析 | 第23-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第23页 |
| 2.1.3 实验室所用引物 | 第23页 |
| 2.1.4 试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-30页 |
| 2.2.1 温度胁迫处理 | 第24页 |
| 2.2.2 总RNA提取 | 第24-25页 |
| 2.2.3 双链cDNA的合成 | 第25页 |
| 2.2.4 cDNA-AFLP程序 | 第25-30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-38页 |
| 2.3.1 总RNA的提取 | 第30-31页 |
| 2.3.2 cDNA合成 | 第31页 |
| 2.3.3 预扩增 | 第31-32页 |
| 2.3.4 极端温度胁迫下油菜叶片差异表达基因的分析 | 第32-33页 |
| 2.3.5 DEFs分类 | 第33-34页 |
| 2.3.6 差异片段的回收与测序 | 第34-38页 |
| 2.4 讨论 | 第38-40页 |
| 2.5 小结 | 第40-41页 |
| 3 36个DEGs在盐、干旱、水淹胁迫下的甘蓝型油菜叶片中的表达模式分析 | 第41-48页 |
| 3.1 实验方法 | 第41-45页 |
| 3.1.1 逆境胁迫处理 | 第41页 |
| 3.1.2 半定量RT-PCR技术 | 第41-42页 |
| 3.1.3 差异基因的半定量分析 | 第42-45页 |
| 3.2 结果与分析 | 第45-46页 |
| 3.2.1 半定量结果分析 | 第45-46页 |
| 3.3 讨论 | 第46-47页 |
| 3.4 小结 | 第47-48页 |
| 4 两个油菜温度逆境应答基因的超表达载体构建及拟南芥的遗传转化 | 第48-63页 |
| 4.1 实验材料 | 第48-49页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第48页 |
| 4.1.2 菌株和质粒 | 第48页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第48页 |
| 4.1.4 实验仪器设备 | 第48页 |
| 4.1.5 培养基和溶液的配制 | 第48-49页 |
| 4.2 目的基因克隆 | 第49-50页 |
| 4.2.1 引物设计 | 第49页 |
| 4.2.2 目的基因全长CDS序列的扩增 | 第49-50页 |
| 4.3 目的基因超表达载体的构建 | 第50-52页 |
| 4.3.1 载体质粒的提取 | 第51页 |
| 4.3.2 目的基因的连接及转化 | 第51-52页 |
| 4.3.3 重组质粒的PCR鉴定与测序 | 第52页 |
| 4.4 目的基因转化拟南芥 | 第52-54页 |
| 4.4.1 冻融法转化农杆菌 | 第52-53页 |
| 4.4.2 浸花法转化拟南芥 | 第53-54页 |
| 4.4.3 拟南芥幼苗微量DNA的提取 | 第54页 |
| 4.4.4 转基因拟南芥植株检测 | 第54页 |
| 4.5 结果与分析 | 第54-61页 |
| 4.5.1 目的基因的克隆 | 第54-55页 |
| 4.5.2 目的基因超表达载体的构建与鉴定 | 第55-56页 |
| 4.5.3 重组质粒转化农杆菌阳性转化菌的筛选 | 第56-57页 |
| 4.5.4 转基因拟南芥T_0代的筛选 | 第57-58页 |
| 4.5.5 转基因拟南芥T_0代的检测 | 第58-60页 |
| 4.5.6 转基因拟南芥T_1、T_2代的检测 | 第60页 |
| 4.5.7 转基因拟南芥T_2代的功能验证 | 第60-61页 |
| 4.6 讨论和小结 | 第61-63页 |
| 4.6.1 目的基因的克隆与表达载体的构建 | 第61-62页 |
| 4.6.2 转基因拟南芥植株的检测及表型观察 | 第62-63页 |
| 5 总结与展望 | 第63-64页 |
| 5.1 主要结论 | 第63页 |
| 5.2 后续研究工作 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
