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GLP-1受体激动剂Exendin-4改善老龄大鼠骨质疏松作用机理的研究

缩略语表第7-9页
中文摘要第9-13页
Abstract第13-17页
前言第18-19页
文献回顾第19-31页
    1. 骨质疏松与骨质疏松的治疗第19-24页
    2. 骨质疏松与肠道激素的关系第24-27页
    3. 骨质疏松与间充质干细胞分化第27-28页
    4. WNT 信号通路与 BMSCS 成骨分化密切相关第28-31页
第一部分 EXENDIN-4 对大鼠老龄性骨质疏松的治疗作用第31-45页
    1 材料第32页
        1.1 动物第32页
        1.2 试剂第32页
        1.3 仪器设备第32页
    2 方法第32-35页
        2.1 实验分组及样本收集处理第32-33页
        2.2 Micro-CT 分析第33页
        2.3 生物力学特性分析第33页
        2.4 骨代谢生化指标检测第33-34页
        2.5 骨组织形态计量学指标测定第34-35页
        2.6 统计学处理第35页
    3 结果第35-42页
        3.1 Exendin-4 改善老龄大鼠骨小梁微结构第35-37页
        3.2 Exendin-4 增强股骨的机械强度第37-38页
        3.3 Exendin-4 减少老龄大鼠尿液中钙磷流失,升高血清中 BAP 和 OCN 水平第38-40页
        3.4 Exendin-4 提高老龄大鼠骨形成率(BFR)和骨矿化率(MAR)第40-41页
        3.5 Exendin-4 增加老龄大鼠骨髓中成骨细胞数量并减少脂肪细胞数量第41-42页
    4 讨论第42-45页
第二部分 EXENDIN-4 对 BMSCS 增殖分化的影响第45-64页
    1 材料第45-48页
        1.1 动物第45页
        1.2 器材第45-46页
        1.3 试剂第46-47页
        1.4 试剂的配制第47-48页
        1.5 仪器设备第48页
    2 方法第48-55页
        2.1 间充质干细胞的分离培养及纯化第48-49页
        2.2 间充质干细胞的鉴定第49页
        2.3 细胞免疫荧光检测第49页
        2.4 BMSCs 增殖检测第49-50页
        2.5 诱导分化培养基的配制第50页
        2.6 ALP 染色第50页
        2.7 茜素红染色第50-51页
        2.8 油红 O 染色第51-52页
        2.9 RNA 的提取第52页
        2.10 浓度检测第52页
        2.11 逆转录第52-53页
        2.12 PCR 扩增第53页
        2.13 琼脂糖凝胶电泳第53页
        2.14 蛋白样品的准备第53-54页
        2.15 分离胶的配制第54页
        2.16 浓缩胶的配制第54页
        2.17 Western blot第54-55页
        2.18 统计学处理第55页
    3 结果第55-61页
        3.1 流式细胞仪鉴定间充质干细胞第55-56页
        3.2 BMSCs 成骨分化和成脂分化第56-57页
        3.3 Exendin-4 剂量依赖性促进 BMSCs 增殖第57-58页
        3.4 间充质干细胞表达 GLP-1 受体第58-59页
        3.5 Exendin-4 促进成骨分化,抑制成脂分化第59-60页
        3.6 Exendin-4 促进成骨分化基因的表达,抑制成脂分化基因的表达第60-61页
    4 讨论第61-64页
第三部分 GLP-1 受体信号通路在 BMSCS 分化中的调控作用及分子机制第64-73页
    1 材料第64-65页
        1.1 细胞第64页
        1.2 试剂第64-65页
        1.3 器材第65页
    2 方法第65-67页
        2.1 GLP-1R-shRNA 慢病毒表达载体的构建与鉴定第65页
        2.2 核蛋白和胞浆蛋白的提取第65-66页
        2.3 Western Blot第66页
        2.4 统计学处理第66-67页
    3 结果第67-70页
        3.1 构建 GLP-1R 基因沉默的细胞第67-68页
        3.2 Exendin-4 激活 Wnt 信号通路,引起β-catenin 转位入核第68-69页
        3.3 Exendin-4 通过 PKA 信号通路激活 Wnt 信号通路,调控细胞分化方向第69-70页
    4 讨论第70-73页
小结第73-74页
参考文献第74-83页
个人简历和研究成果第83-84页
致谢第84页

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