| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 烷基酚类物质的雌激素效应及Sox基因的研究进展 | 第9-21页 |
| 1.1 环境内分泌干扰物的类型与分布 | 第9-10页 |
| 1.2 OP对动物内分泌和生殖的毒性效应 | 第10-13页 |
| 1.2.1 OP对类固醇激素合成的影响 | 第10-13页 |
| 1.2.2 OP对动物的生殖毒性 | 第13页 |
| 1.3 Sox基因家族的研究进展 | 第13-18页 |
| 1.3.1 Sox基因在脊椎动物胚胎发育中的表达 | 第14-18页 |
| 1.4 Sox 9基因的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第19-21页 |
| 第2章 中国林蛙的Sox 9α克隆、进化及机能分析 | 第21-39页 |
| 2.1 前言 | 第21页 |
| 2.2 材料 | 第21-22页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第22页 |
| 2.2.3 动物处理 | 第22页 |
| 2.3 方法 | 第22-27页 |
| 2.3.1 Total RNA 提取 | 第22-23页 |
| 2.3.2 cDNA的合成 | 第23-24页 |
| 2.3.3 引物设计与合成 | 第24页 |
| 2.3.4 RT-PCR 扩增 | 第24-25页 |
| 2.3.5 胶体回收 | 第25页 |
| 2.3.6 载体构建 | 第25-26页 |
| 2.3.7 质粒提取 | 第26页 |
| 2.3.8 质粒酶切 | 第26-27页 |
| 2.3.9 功能结构域预测及进化树构建 | 第27页 |
| 2.4 结果与分析 | 第27-37页 |
| 2.4.1 Sox 9α基因的克隆 | 第27-32页 |
| 2.4.2 序列拼接及比对 | 第32-33页 |
| 2.4.3 蛋白质结构预测 | 第33-34页 |
| 2.4.4 ClustalW2分析及进化树构建 | 第34-36页 |
| 2.4.5 Sox9α mRNA的组织表达 | 第36-37页 |
| 2.5 讨论 | 第37-39页 |
| 第3章 辛基酚对中国林蛙精巢Sox 9α表达的影响 | 第39-53页 |
| 3.1 前言 | 第39页 |
| 3.2 材料 | 第39-40页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第39-40页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第40页 |
| 3.2.3 动物处理 | 第40页 |
| 3.3 方法 | 第40-44页 |
| 3.3.1 Total RNA 提取 | 第40页 |
| 3.3.2 cDNA 的合成 | 第40-41页 |
| 3.3.3 引物设计与合成 | 第41页 |
| 3.3.4 RT-PCR 及测序 | 第41页 |
| 3.3.5 实时定量PCR | 第41-42页 |
| 3.3.6 Sox 9α探针合成 | 第42-43页 |
| 3.3.7 原位杂交 | 第43-44页 |
| 3.4 结果与分析 | 第44-51页 |
| 3.4.1 RT-PCR及测序 | 第44-46页 |
| 3.4.2 实时定量PCR | 第46-48页 |
| 3.4.3 Sox 9α RNA探针合成 | 第48-51页 |
| 3.4.4 Sox 9α 的细胞定位 | 第51页 |
| 3.5 讨论 | 第51-53页 |
| 总结 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 攻读硕士学位期间研究成果 | 第65页 |
