| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩略语 | 第9-14页 |
| 第一部分 PVT1和miR-195-5p在子宫内膜癌组织中的表达水平及相关性研究 | 第14-32页 |
| 1 前言 | 第14-16页 |
| 2 材料和方法 | 第16-21页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第16-17页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第16页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第17页 |
| 2.2 研究对象和分组 | 第17-18页 |
| 2.3 实验方法 | 第18-21页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第18-19页 |
| 2.3.2 Real-timePCR | 第19-20页 |
| 2.3.3 荧光原位杂交 | 第20-21页 |
| 2.3.4 双荧光素酶报告基因检测 | 第21页 |
| 2.3.5 实验统计方法 | 第21页 |
| 3 实验结果 | 第21-28页 |
| 3.1 临床病理资料 | 第21-23页 |
| 3.2 子宫内膜癌组织中PVT1和miR-195-5p的表达及其与子宫内膜癌的临床病理参数的分析 | 第23-26页 |
| 3.2.1 Real-timePCR法和荧光原位杂交实验检测PVT1在子宫内膜癌组织中的表达及其与子宫内膜癌的临床病理参数的分析 | 第23-24页 |
| 3.2.2 Real-timePCR法检测miR-195-5p在子宫内膜癌组织中的表达及其与子宫内膜癌的临床病理参数的分析 | 第24-26页 |
| 3.3 子宫内膜癌组织中PVT1和miR-195-5p表达的相关性分析 | 第26-27页 |
| 3.4 PVT1通过预测的结合位点靶向结合miR-195-5p | 第27-28页 |
| 4 讨论 | 第28-31页 |
| 5 结论 | 第31-32页 |
| 第二部分 PVT1负性调控miR-195-5p对子宫内膜癌干细胞生物学行为的影响 | 第32-58页 |
| 1 前言 | 第32-33页 |
| 2 材料和方法 | 第33-42页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第33-34页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第33页 |
| 2.1.2 细胞株 | 第33页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第33-34页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-42页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第34-35页 |
| 2.2.2 流式细胞术 | 第35页 |
| 2.2.3 免疫荧光染色 | 第35-36页 |
| 2.2.4 Real-timePCR | 第36-38页 |
| 2.2.5 细胞增殖实验 | 第38页 |
| 2.2.6 细胞迁移、侵袭实验 | 第38-39页 |
| 2.2.7 细胞周期实验 | 第39页 |
| 2.2.8 细胞凋亡实验 | 第39页 |
| 2.2.9 裸鼠皮下移植实验 | 第39页 |
| 2.2.10 H&E染色实验 | 第39-40页 |
| 2.2.11 免疫组织化学实验 | 第40页 |
| 2.2.12 Westernblotting | 第40-42页 |
| 2.2.13 实验统计方法 | 第42页 |
| 3 实验结果 | 第42-56页 |
| 3.1 从人子宫内膜癌细胞系Ishikawa中分离和培养肿瘤干细胞 | 第42-43页 |
| 3.2 人子宫内膜癌干细胞表达干细胞相关因子 | 第43-44页 |
| 3.3 人子宫内膜癌干细胞具有促进细胞增殖、迁移和侵袭的能力 | 第44-47页 |
| 3.4 人子宫内膜癌干细胞在裸鼠成瘤模型中具有更强的生长能力和多能干细胞特性 | 第47-49页 |
| 3.5 PVT1在ECSCs中高表达,miR-195-5p在ECSCs中低表达 | 第49-50页 |
| 3.6 沉默PVT1抑制ECSCs的增殖、迁移和侵袭、细胞周期S期阻滞,促进ECSCs凋亡 | 第50-52页 |
| 3.7 过表达miR-195-5p抑制ECSCs的增殖、迁移和侵袭、细胞周期S期阻滞,促进ECSCs凋亡 | 第52-54页 |
| 3.8 miR-195-5p可逆转PVT1对ECSCs恶性生物学的影响 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 第三部分 PVT1负性调控miR-195-5p影响子宫内膜癌干细胞的恶性生物学行为的机制研究 | 第58-69页 |
| 1 前言 | 第58-59页 |
| 2 材料和方法 | 第59-61页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第59-60页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第59页 |
| 2.1.2 细胞株 | 第59页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第59-60页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第60页 |
| 2.2 实验方法 | 第60-61页 |
| 2.2.1 细胞培养及转染 | 第60页 |
| 2.2.2 Real-timePCR | 第60页 |
| 2.2.3 双荧光素酶报告基因检测 | 第60页 |
| 2.2.4 Westernblotting | 第60页 |
| 2.2.5 裸鼠皮下移植实验 | 第60页 |
| 2.2.6 免疫组织化学实验 | 第60页 |
| 2.2.7 实验统计方法 | 第60-61页 |
| 3 实验结果 | 第61-65页 |
| 3.1 PVT1 通过负性调控 mi R-195-5p，抑制 mi R-195-5p 对靶基因FGFR1 和 FGF2 的调控，调节 PI3K、p-AKT1、AKT1、p-Erk 1/2、Erk 1/2、p-p38 MAPK 和 p38 MAPK 的表达，进而影响 ECSCs 的生物学行为 | 第61-63页 |
| 3.2 沉默PVT1联合应用过表达miR-195-5p显著抑制裸鼠移植瘤生长 | 第63-64页 |
| 3.3 PVT1通过负性调控miR-195-5p影响子宫内膜癌干细胞生物学行为的机制模式图 | 第64-65页 |
| 4 讨论 | 第65-68页 |
| 5 结论 | 第68-69页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-82页 |
| 综述 | 第82-92页 |
| 参考文献 | 第87-92页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 个人简历 | 第94页 |
