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体外循环对大鼠心肌损伤的影响及富氢水通过PI3K/Akt信号通路的心肌保护作用机制的研究

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
英文缩略语第11-17页
第一部分 :体外循环对大鼠心肌损伤的影响及机制探讨第17-52页
    1 前言第17-18页
    2 材料与方法第18-27页
        2.1 材料与试剂第18-20页
            2.1.1 主要试剂第18-19页
            2.1.2 主要仪器设备第19-20页
            2.1.3 实验动物第20页
        2.2 实验方法第20-27页
            2.2.1 建立大鼠无血预充体外循环伴心脏停跳模型第20-21页
            2.2.2 实验分组及处理第21-22页
            2.2.3 标本采集与处理第22页
            2.2.4 心肌含水量的测定第22页
            2.2.5 血浆cTnI、hFABP浓度变化第22页
            2.2.6 血浆TNF–α、IL–6和IL–10浓度的测定第22页
            2.2.7 血浆8-iso-PGF2α水平的测定第22页
            2.2.8 心肌组织丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)和超氧化物歧化酶(SOD)活性测定第22-23页
            2.2.9 心肌形态学观察第23页
            2.2.10 免疫组织化学法检测心肌组织AQP-1、AQP-4蛋白表达第23页
            2.2.11 Western blot检测心肌组织中AQP-1和AQP-4蛋白的表达第23-25页
            2.2.12 Real-Time PCR检测心肌组织AQP-1、AQP-4 mRNA表达第25-27页
            2.2.13 统计学分析第27页
    3 结果第27-46页
        3.1 大鼠的一般情况第27页
        3.2 各组大鼠心肌损伤指标的变化第27-29页
            3.2.1 大鼠心肌含水量的变化第28页
            3.2.2 血浆cTnI、hFABP浓度变化第28-29页
        3.3 血浆TNF-α、IL-6和IL-10浓度变化第29-31页
            3.3.1 血浆TNF-α、IL-6浓度第29-30页
            3.3.2 血浆IL-10浓度第30-31页
        3.4 血浆8-iso-PGF2α水平的测定第31-32页
        3.5 心肌组织丙二醛(MDA)含量,髓过氧化物酶(MPO)和超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化第32-33页
            3.5.1 心肌组织MDA含量和MPO活性第32页
            3.5.2 心肌组织SOD活性第32-33页
        3.6 大鼠心肌组织形态学改变第33-35页
            3.6.1 HE染色光镜观察第33-34页
            3.6.2 透射电镜观察第34-35页
        3.7 各组大鼠心肌组织水通道蛋白表达的变化第35-39页
            3.7.1 免疫组化检测心肌组织AQP-1蛋白分布与表达第35-36页
            3.7.2 免疫组化检测心肌组织AQP-4蛋白表达第36-37页
            3.7.3 Western blot检测心肌水通道蛋白表达第37-38页
            3.7.4 Real-Time PCR检测AQP水通道蛋白mRNA表达第38-39页
        3.8 心肌组织AQP-1、AQP-4蛋白表达变化与心肌损伤的关系第39-42页
            3.8.1 心肌组织AQP-1,4蛋白表达变化与心肌含水量的关系第39-40页
            3.8.2 心肌组织AQP-1、AQP-4蛋白表达变化与血浆cTnI、hFABP浓度的关系第40-42页
        3.9 心肌组织AQP-1、AQP-4蛋白表达变化与炎症介质的关系第42-44页
        3.10 心肌组织AQP-1、AQP-4蛋白表达变化与过氧化损伤的关系第44-46页
    4 讨论第46-51页
    5 结论第51-52页
第二部分 :富氢水对体外循环大鼠心肌保护作用及机制探讨第52-73页
    1 前言第52-53页
    2 材料和方法第53-56页
        2.1 材料与试剂第53-54页
            2.1.1 主要试剂第53-54页
            2.1.2 主要仪器设备第54页
            2.1.3 实验动物第54页
        2.2 实验方法第54-56页
            2.2.1 大鼠体外循环伴心脏停跳模型制备第54页
            2.2.2 HRS的制备第54页
            2.2.3 实验分组及取材第54页
            2.2.4 血流动力学改变检测第54-55页
            2.2.5 大鼠心肌含水量测定第55页
            2.2.6 苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织形态学变化第55页
            2.2.7 Masson染色第55页
            2.2.8 ELISA检测第55页
            2.2.9 TUNEL试验第55页
            2.2.10 Western blot检测第55-56页
            2.2.11 统计分析第56页
    3 结果第56-70页
        3.1 大鼠血流动力学的变化第56-59页
        3.2 大鼠心肌含水量变化第59-60页
        3.3 HRS改善CPB大鼠心肌损伤第60-62页
            3.3.1 HE染色光镜观察第60页
            3.3.2 Masson三色染色光镜观察第60页
            3.3.3 ELISA检测心肌损伤相关因子变化第60-62页
        3.4 ELISA检测大鼠的氧化应激相关因子和炎症因子分泌第62-64页
        3.5 TUNEL实验检测细胞凋亡第64-65页
        3.6 Western blot实验检测细胞凋亡相关蛋白、AQPs蛋白及PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达第65-70页
    4 讨论第70-72页
    5 结论第72-73页
第三部分 :富氢水通过PI3K/Akt信号通路改善体外循环大鼠心肌损伤第73-92页
    1 前言第73-74页
    2 材料和方法第74-76页
        2.1 材料与试剂第74页
            2.1.1 主要试剂第74页
            2.1.2 主要仪器设备第74页
            2.1.3 实验动物第74页
            2.1.4 实验细胞第74页
        2.2 实验方法第74-76页
            2.2.1 大鼠体外循环伴心脏停跳模型制备第74页
            2.2.2 HRS的制备第74页
            2.2.3 实验分组及取材第74-75页
            2.2.4 大鼠心肌含水量测定第75页
            2.2.5 ELISA检测第75页
            2.2.6 Masson染色第75页
            2.2.7 TUNEL实验第75页
            2.2.8 Western blot检测第75页
            2.2.9 细胞模型建立第75页
            2.2.10 MTT比色法第75-76页
            2.2.11 流式细胞术检测凋亡第76页
            2.2.12 统计分析第76页
    3 结果第76-90页
        3.1 大鼠心肌含水量变化第76-77页
        3.2 ELISA检测心肌损伤相关因子、氧化应激相关因子和炎症因子变化第77-80页
        3.3 Masson三色染色光镜观察第80-81页
        3.4 TUNEL试验检测各组大鼠细胞凋亡第81-82页
        3.5 Western blot实验检测各组大鼠细胞凋亡相关蛋白、AQP蛋白及PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达第82-84页
        3.6 MTT实验检测各组细胞活力第84-85页
        3.7 流式细胞术检测细胞凋亡第85-86页
        3.8 Western blot实验检测心肌细胞细胞凋亡相关蛋白、AQP蛋白及PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达第86-90页
    4 讨论第90-91页
    5 结论第91-92页
本研究创新性的自我评价第92-93页
参考文献第93-104页
综述第104-122页
    参考文献第112-122页
攻读学位期间取得的研究成果第122-124页
致谢第124-125页
个人简历第125页

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