摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
英文缩略语 | 第11-17页 |
第一部分 :体外循环对大鼠心肌损伤的影响及机制探讨 | 第17-52页 |
1 前言 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-27页 |
2.1 材料与试剂 | 第18-20页 |
2.1.1 主要试剂 | 第18-19页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第19-20页 |
2.1.3 实验动物 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-27页 |
2.2.1 建立大鼠无血预充体外循环伴心脏停跳模型 | 第20-21页 |
2.2.2 实验分组及处理 | 第21-22页 |
2.2.3 标本采集与处理 | 第22页 |
2.2.4 心肌含水量的测定 | 第22页 |
2.2.5 血浆cTnI、hFABP浓度变化 | 第22页 |
2.2.6 血浆TNF–α、IL–6和IL–10浓度的测定 | 第22页 |
2.2.7 血浆8-iso-PGF2α水平的测定 | 第22页 |
2.2.8 心肌组织丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)和超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 | 第22-23页 |
2.2.9 心肌形态学观察 | 第23页 |
2.2.10 免疫组织化学法检测心肌组织AQP-1、AQP-4蛋白表达 | 第23页 |
2.2.11 Western blot检测心肌组织中AQP-1和AQP-4蛋白的表达 | 第23-25页 |
2.2.12 Real-Time PCR检测心肌组织AQP-1、AQP-4 mRNA表达 | 第25-27页 |
2.2.13 统计学分析 | 第27页 |
3 结果 | 第27-46页 |
3.1 大鼠的一般情况 | 第27页 |
3.2 各组大鼠心肌损伤指标的变化 | 第27-29页 |
3.2.1 大鼠心肌含水量的变化 | 第28页 |
3.2.2 血浆cTnI、hFABP浓度变化 | 第28-29页 |
3.3 血浆TNF-α、IL-6和IL-10浓度变化 | 第29-31页 |
3.3.1 血浆TNF-α、IL-6浓度 | 第29-30页 |
3.3.2 血浆IL-10浓度 | 第30-31页 |
3.4 血浆8-iso-PGF2α水平的测定 | 第31-32页 |
3.5 心肌组织丙二醛(MDA)含量,髓过氧化物酶(MPO)和超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化 | 第32-33页 |
3.5.1 心肌组织MDA含量和MPO活性 | 第32页 |
3.5.2 心肌组织SOD活性 | 第32-33页 |
3.6 大鼠心肌组织形态学改变 | 第33-35页 |
3.6.1 HE染色光镜观察 | 第33-34页 |
3.6.2 透射电镜观察 | 第34-35页 |
3.7 各组大鼠心肌组织水通道蛋白表达的变化 | 第35-39页 |
3.7.1 免疫组化检测心肌组织AQP-1蛋白分布与表达 | 第35-36页 |
3.7.2 免疫组化检测心肌组织AQP-4蛋白表达 | 第36-37页 |
3.7.3 Western blot检测心肌水通道蛋白表达 | 第37-38页 |
3.7.4 Real-Time PCR检测AQP水通道蛋白mRNA表达 | 第38-39页 |
3.8 心肌组织AQP-1、AQP-4蛋白表达变化与心肌损伤的关系 | 第39-42页 |
3.8.1 心肌组织AQP-1,4蛋白表达变化与心肌含水量的关系 | 第39-40页 |
3.8.2 心肌组织AQP-1、AQP-4蛋白表达变化与血浆cTnI、hFABP浓度的关系 | 第40-42页 |
3.9 心肌组织AQP-1、AQP-4蛋白表达变化与炎症介质的关系 | 第42-44页 |
3.10 心肌组织AQP-1、AQP-4蛋白表达变化与过氧化损伤的关系 | 第44-46页 |
4 讨论 | 第46-51页 |
5 结论 | 第51-52页 |
第二部分 :富氢水对体外循环大鼠心肌保护作用及机制探讨 | 第52-73页 |
1 前言 | 第52-53页 |
2 材料和方法 | 第53-56页 |
2.1 材料与试剂 | 第53-54页 |
2.1.1 主要试剂 | 第53-54页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第54页 |
2.1.3 实验动物 | 第54页 |
2.2 实验方法 | 第54-56页 |
2.2.1 大鼠体外循环伴心脏停跳模型制备 | 第54页 |
2.2.2 HRS的制备 | 第54页 |
2.2.3 实验分组及取材 | 第54页 |
2.2.4 血流动力学改变检测 | 第54-55页 |
2.2.5 大鼠心肌含水量测定 | 第55页 |
2.2.6 苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织形态学变化 | 第55页 |
2.2.7 Masson染色 | 第55页 |
2.2.8 ELISA检测 | 第55页 |
2.2.9 TUNEL试验 | 第55页 |
2.2.10 Western blot检测 | 第55-56页 |
2.2.11 统计分析 | 第56页 |
3 结果 | 第56-70页 |
3.1 大鼠血流动力学的变化 | 第56-59页 |
3.2 大鼠心肌含水量变化 | 第59-60页 |
3.3 HRS改善CPB大鼠心肌损伤 | 第60-62页 |
3.3.1 HE染色光镜观察 | 第60页 |
3.3.2 Masson三色染色光镜观察 | 第60页 |
3.3.3 ELISA检测心肌损伤相关因子变化 | 第60-62页 |
3.4 ELISA检测大鼠的氧化应激相关因子和炎症因子分泌 | 第62-64页 |
3.5 TUNEL实验检测细胞凋亡 | 第64-65页 |
3.6 Western blot实验检测细胞凋亡相关蛋白、AQPs蛋白及PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达 | 第65-70页 |
4 讨论 | 第70-72页 |
5 结论 | 第72-73页 |
第三部分 :富氢水通过PI3K/Akt信号通路改善体外循环大鼠心肌损伤 | 第73-92页 |
1 前言 | 第73-74页 |
2 材料和方法 | 第74-76页 |
2.1 材料与试剂 | 第74页 |
2.1.1 主要试剂 | 第74页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第74页 |
2.1.3 实验动物 | 第74页 |
2.1.4 实验细胞 | 第74页 |
2.2 实验方法 | 第74-76页 |
2.2.1 大鼠体外循环伴心脏停跳模型制备 | 第74页 |
2.2.2 HRS的制备 | 第74页 |
2.2.3 实验分组及取材 | 第74-75页 |
2.2.4 大鼠心肌含水量测定 | 第75页 |
2.2.5 ELISA检测 | 第75页 |
2.2.6 Masson染色 | 第75页 |
2.2.7 TUNEL实验 | 第75页 |
2.2.8 Western blot检测 | 第75页 |
2.2.9 细胞模型建立 | 第75页 |
2.2.10 MTT比色法 | 第75-76页 |
2.2.11 流式细胞术检测凋亡 | 第76页 |
2.2.12 统计分析 | 第76页 |
3 结果 | 第76-90页 |
3.1 大鼠心肌含水量变化 | 第76-77页 |
3.2 ELISA检测心肌损伤相关因子、氧化应激相关因子和炎症因子变化 | 第77-80页 |
3.3 Masson三色染色光镜观察 | 第80-81页 |
3.4 TUNEL试验检测各组大鼠细胞凋亡 | 第81-82页 |
3.5 Western blot实验检测各组大鼠细胞凋亡相关蛋白、AQP蛋白及PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达 | 第82-84页 |
3.6 MTT实验检测各组细胞活力 | 第84-85页 |
3.7 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第85-86页 |
3.8 Western blot实验检测心肌细胞细胞凋亡相关蛋白、AQP蛋白及PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达 | 第86-90页 |
4 讨论 | 第90-91页 |
5 结论 | 第91-92页 |
本研究创新性的自我评价 | 第92-93页 |
参考文献 | 第93-104页 |
综述 | 第104-122页 |
参考文献 | 第112-122页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第122-124页 |
致谢 | 第124-125页 |
个人简历 | 第125页 |