| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第13-22页 |
| 1 多房棘球蚴绦虫与泡状棘球蚴病简介 | 第13-16页 |
| 1.1 多房棘球绦虫简介 | 第13-14页 |
| 1.2 泡状棘球蚴病简介 | 第14-15页 |
| 1.3 泡球蚴体外培养模型简介 | 第15-16页 |
| 2 泡球蚴生发层细胞多潜能性的介绍 | 第16-17页 |
| 2.1 全能成体干细胞 | 第16页 |
| 2.2 泡球蚴生发层细胞的多潜能性影响泡球蚴的生长发育 | 第16-17页 |
| 3 转录因子Sox2的研究进展 | 第17-21页 |
| 3.1 Sox2的发现 | 第17页 |
| 3.2 Sox2的结构 | 第17-18页 |
| 3.3 Sox2的表达与定位 | 第18页 |
| 3.4 Sox2的功能 | 第18-21页 |
| 4 研究内容及意义 | 第21-22页 |
| 第二章 EmSOX2基因的克隆及分析 | 第22-36页 |
| 1 材料与方法 | 第22-28页 |
| 1.1 实验材料 | 第22页 |
| 1.2 试剂与仪器 | 第22-23页 |
| 1.3 实验方法 | 第23-28页 |
| 2 实验结果 | 第28-34页 |
| 2.1 RNA的提取 | 第28-29页 |
| 2.2 RACE克隆结果 | 第29-30页 |
| 2.3 EmSOX2基因结构及分析 | 第30-34页 |
| 3 讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 EmSOX2多克隆抗体制备 | 第36-49页 |
| 1 材料与方法 | 第36-45页 |
| 1.1 实验材料 | 第36页 |
| 1.2 试剂与仪器 | 第36-37页 |
| 1.3 主要试剂配制 | 第37-39页 |
| 1.4 实验方法 | 第39-45页 |
| 2 实验结果 | 第45-48页 |
| 2.1 原核表达重组质粒pET28a-EmSOX2的构建 | 第45页 |
| 2.2 EmSOX2原核重组蛋白的诱导表达与纯化 | 第45-47页 |
| 2.3 EmSOX2真核重组表达载体的构建 | 第47页 |
| 2.4 检测EmSOX2抗体特异性 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-49页 |
| 第四章 EmSOX2的细胞定位及在泡球蚴不同发育阶段的表达分析 | 第49-59页 |
| 1 材料与方法 | 第49-54页 |
| 1.1 实验材料 | 第49页 |
| 1.2 试剂与仪器 | 第49-50页 |
| 1.3 主要试剂配制 | 第50页 |
| 1.4 实验方法 | 第50-54页 |
| 2 实验结果 | 第54-57页 |
| 2.1 EmSOX2融合蛋白在真核细胞293T中的定位 | 第54-55页 |
| 2.2 EmSOX2在体外培养泡球蚴囊泡中的定位 | 第55-56页 |
| 2.3 EmSOX2蛋白在泡球蚴不同发育时期的表达 | 第56-57页 |
| 2.4 EmSOX2 mRNA在泡球蚴不同发育时期的表达 | 第57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| 第五章 利用iPS技术分析EmSOX2功能 | 第59-78页 |
| 1 材料 | 第59-61页 |
| 1.1 实验材料 | 第59页 |
| 1.2 试剂与仪器 | 第59-60页 |
| 1.3 主要试剂配制 | 第60-61页 |
| 2 实验方法 | 第61-69页 |
| 2.1 构建PMXs-EmSOX2逆转录病毒载体 | 第61-62页 |
| 2.2 小鼠胚胎成纤维细胞(MEF细胞)的获取及体外培养 | 第62-63页 |
| 2.3 通过照射X射线处理MEF来制作feeder饲养层细胞 | 第63页 |
| 2.4 逆转录病毒包装 | 第63-64页 |
| 2.5 诱导小鼠MEF细胞产生iPS细胞 | 第64-66页 |
| 2.6 iPS细胞的筛选与鉴定 | 第66-69页 |
| 3 实验结果 | 第69-76页 |
| 3.1 构建PMXs-EmSOX2逆转录病毒载体 | 第69-70页 |
| 3.2 MEF细胞体外培养 | 第70-71页 |
| 3.3 制作feeder饲养层细胞 | 第71页 |
| 3.4 iPS诱导 | 第71-73页 |
| 3.5 iPS细胞传代培养后形态观察 | 第73-74页 |
| 3.6 iPS克隆的碱式磷酸酶染色 | 第74-75页 |
| 3.7 检测iPS克隆标志基因的表达 | 第75-76页 |
| 4 讨论 | 第76-78页 |
| 第六章 小结与展望 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
