摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第13-30页 |
1.1 华山松大小蠹 | 第13-14页 |
1.2 昆虫与肠道微生物 | 第14-19页 |
1.2.1 研究概况 | 第14-15页 |
1.2.2 昆虫肠道细菌多样性 | 第15-18页 |
1.2.3 昆虫肠道真菌多样性 | 第18-19页 |
1.3 昆虫肠道微生物研究方法 | 第19-28页 |
1.3.1 稀释涂布平板法 | 第19-20页 |
1.3.2 分子杂交技术 | 第20-21页 |
1.3.3 核苷酸测序技术 | 第21-28页 |
1.4 研究内容和目的意义 | 第28-30页 |
1.4.1 研究目的与意义 | 第28页 |
1.4.2 研究内容 | 第28-29页 |
1.4.3 技术路线 | 第29-30页 |
第二章 华山松大小蠹肠道细菌群落的多样性 | 第30-45页 |
2.1 样品采集 | 第30-32页 |
2.1.1 试验采样地概况 | 第30-31页 |
2.1.2 样品采集 | 第31页 |
2.1.3 前期处理 | 第31-32页 |
2.1.4 主要器材及试剂 | 第32页 |
2.2 试验方法 | 第32-36页 |
2.2.1 肠道细菌总 DNA 提取 | 第32-33页 |
2.2.2 巢式 PCR | 第33页 |
2.2.3 变性梯度凝胶电泳 DGGE | 第33-35页 |
2.2.4 克隆转化 | 第35-36页 |
2.3 数据处理 | 第36-37页 |
2.3.1 系统发育树的构建 | 第36页 |
2.3.2 DGGE 图谱分析 | 第36页 |
2.3.3 多样性指数分析 | 第36-37页 |
2.3.4 运算分类单位(OTU)及多样性分析 | 第37页 |
2.4 试验结果与分析 | 第37-44页 |
2.4.1 巢式 PCR 的结果检测 | 第37页 |
2.4.2 华山松大小蠹不同发育阶段细菌群落结构多样性分析 | 第37-39页 |
2.4.3 聚类分析和优势菌属 | 第39-41页 |
2.4.4 运算分类单位(OTUs) | 第41-42页 |
2.4.5 细菌群落结构分析 | 第42-44页 |
2.5 小结 | 第44-45页 |
第三章 华山松大小蠹肠道真菌群落的多样性 | 第45-56页 |
3.1 样品采集 | 第45-46页 |
3.1.1 试验采样地概况 | 第45页 |
3.1.2 样品采集 | 第45页 |
3.1.3 前期处理 | 第45页 |
3.1.4 主要器材及试剂 | 第45-46页 |
3.2 试验方法 | 第46-47页 |
3.2.1 真菌总 DNA 提取 | 第46页 |
3.2.2 巢式 PCR | 第46-47页 |
3.2.3 变性梯度凝胶电泳 DGGE | 第47页 |
3.3 数据处理 | 第47-48页 |
3.4 试验结果与分析 | 第48-53页 |
3.4.1 巢式 PCR | 第48页 |
3.4.2 DGGE | 第48-49页 |
3.4.3 DGGE 图谱分析 | 第49-50页 |
3.4.4 OTUs | 第50-53页 |
3.5 讨论 | 第53-55页 |
3.5.1 华山松大小蠹肠道真菌群落多样性分析 | 第53-54页 |
3.5.2 真菌群落结构 | 第54-55页 |
3.5.3 优势菌种分析 | 第55页 |
3.5.4 生物防治 | 第55页 |
3.6 小结 | 第55-56页 |
第四章 华山松大小蠹肠道产纤维素细菌的筛选与鉴定 | 第56-74页 |
4.1 样品采集 | 第57-58页 |
4.1.1 试验采样地概况 | 第57页 |
4.1.2 样品采集 | 第57页 |
4.1.3 前期处理 | 第57页 |
4.1.4 对照菌株 | 第57页 |
4.1.5 主要器材及试剂 | 第57-58页 |
4.2 试验方法 | 第58-65页 |
4.2.1 CMC 降解细菌的筛选与计数 | 第58-59页 |
4.2.2 细菌 CMCase 活性测定 | 第59页 |
4.2.3 ARDRA | 第59-60页 |
4.2.4 聚类分析 | 第60-61页 |
4.2.5 OTU | 第61页 |
4.2.6 细菌形态鉴定 | 第61-63页 |
4.2.7 真菌形态鉴定 | 第63页 |
4.2.8 真菌分子鉴定 | 第63-65页 |
4.3 试验结果与分析 | 第65-71页 |
4.3.1 华山松大小蠹幼虫纤维素降解细菌菌落计数 | 第65页 |
4.3.2 产 CMCase 细菌菌株分离与鉴定 | 第65-69页 |
4.3.3 产 CMCase 细菌群落分析 | 第69页 |
4.3.4 产 CMCase 真菌形态鉴定 | 第69-70页 |
4.3.5 真菌分子鉴定 | 第70-71页 |
4.4 讨论 | 第71-73页 |
4.5 小结 | 第73-74页 |
第五章 秦岭细粘束孢漆酶纯化与酶学特性 | 第74-81页 |
5.1 试验材料 | 第75-76页 |
5.1.1 供试菌种 | 第75-76页 |
5.1.2 主要器材及试剂 | 第76页 |
5.2 试验方法 | 第76-78页 |
5.2.1 部分纯化的漆酶 SDS-PAGE 分析 | 第76-78页 |
5.2.2 部分纯化的漆酶 native-PAGE 分析 | 第78页 |
5.2.3 酶动力学分析 | 第78页 |
5.2.4 酸根阴离子对漆酶活性的影响 | 第78页 |
5.3 数据处理 | 第78页 |
5.4 试验结果与分析 | 第78-80页 |
5.4.1 漆酶蛋白分子量测定和纯化分析 | 第78-79页 |
5.4.2 酶动力学性质分析 | 第79页 |
5.4.3 酸根阴离子对漆酶活性的影响 | 第79页 |
5.4.4 讨论 | 第79-80页 |
5.5 小结 | 第80-81页 |
第六章 总结 | 第81-83页 |
6.1 创新之处 | 第81页 |
6.2 研究结论 | 第81页 |
6.3 研究展望 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-101页 |
附录1 | 第101-104页 |
附录2 | 第104-109页 |
附录3 | 第109-113页 |
附录4 | 第113-123页 |
缩略词 | 第123-124页 |
致谢 | 第124-125页 |
作者简介 | 第125页 |