| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩写词 | 第9-17页 |
| 第1章 绪论 | 第17-37页 |
| 1.1 手足口病简介 | 第17-26页 |
| 1.1.1 手足口病流行病学概述 | 第17页 |
| 1.1.2 肠道病毒 EV71 型病毒学特征 | 第17-19页 |
| 1.1.3 柯萨奇病毒 A 组 16 型病毒学特征 | 第19-20页 |
| 1.1.4 EV71 疫苗研究进展 | 第20-23页 |
| 1.1.5 CVA16 疫苗研究现状 | 第23-25页 |
| 1.1.6 手足口病动物模型 | 第25-26页 |
| 1.2 小 RNA 病毒科病毒 VP4 蛋白的研究进展 | 第26-30页 |
| 1.2.1 小 RNA 病毒的结构及特点 | 第26-27页 |
| 1.2.2 抗体与小 RNA 病毒的结构构象 | 第27-28页 |
| 1.2.3 小 RNA 病毒 VP4 蛋白与中和抗体 | 第28-30页 |
| 1.3 乙型肝炎病毒核心蛋白作为表位疫苗载体的研究进展 | 第30-33页 |
| 1.3.1 HBc 的生物学结构特点 | 第30-31页 |
| 1.3.2 HBc 作为疫苗载体的应用 | 第31-33页 |
| 1.4 原核表达系统简介 | 第33-35页 |
| 1.4.1 T7 表达系统 | 第33-34页 |
| 1.4.2 目的蛋白表达形式及在细胞中的定位 | 第34页 |
| 1.4.3 外源基因在大肠杆菌中表达的优缺点 | 第34页 |
| 1.4.4 大肠杆菌表达系统的研究新进展 | 第34-35页 |
| 1.5 本文的研究内容及意义 | 第35-37页 |
| 第2章 基于 HBc 和 EV71-VP4 蛋白的病毒样颗粒制备 | 第37-69页 |
| 2.1 实验材料及溶液配制 | 第37-38页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第37页 |
| 2.1.2 溶液配制 | 第37-38页 |
| 2.2 实验材料及仪器设备 | 第38-39页 |
| 2.3 实验方法 | 第39-58页 |
| 2.3.1 HBc-EV71-VP4-N20 融合蛋白设计路线 | 第39-40页 |
| 2.3.2 重组原核表达载体 pET-22b（+）-HBc 及 pET-22b（+）-HBc-EV71-VP4-N20 的构建 | 第40-52页 |
| 2.3.3 HBc、HBc-EV71-VP4-N20 融合蛋白的原核表达 | 第52-54页 |
| 2.3.4 目的蛋白 HBc、HBc-EV71-VP4-N20 的镍柱纯化 | 第54-58页 |
| 2.4 实验结果 | 第58-66页 |
| 2.4.1 重组原核表达载体 pET-22b（+）-HBc-EV71-VP4-N20 的构建 | 第58-60页 |
| 2.4.2 重组原核表达载体 pET-22b（+）-HBc 的构建 | 第60-62页 |
| 2.4.3 融合蛋白 HBc、HBc-EV71-VP4-N20 的原核表达 | 第62-66页 |
| 2.5 讨论 | 第66-67页 |
| 2.6 本章小结 | 第67-69页 |
| 第3章 EV71 病毒的扩增、培养鉴定及灭活 | 第69-83页 |
| 3.1 实验材料 | 第69页 |
| 3.2 实验仪器 | 第69页 |
| 3.3 实验方法 | 第69-78页 |
| 3.3.1 RD 细胞的培养 | 第69-71页 |
| 3.3.2 EV71 病毒的扩增培养 | 第71-72页 |
| 3.3.3 EV71 病毒的鉴定 | 第72-75页 |
| 3.3.4 EV71 病毒的灭活 | 第75-78页 |
| 3.4 实验结果 | 第78-81页 |
| 3.4.1 EV71 病毒 PCR 鉴定及测序的实验结果 | 第78页 |
| 3.4.2 BPL 灭活 EV71 病毒效果的验证及病毒的纯化 | 第78-79页 |
| 3.4.3 Western Blot 及 SDS-PAGE 检测灭活 EV71 病毒的实验结果 | 第79-80页 |
| 3.4.4 透射电子显微镜观察灭活 EV71 病毒的结果 | 第80-81页 |
| 3.5 讨论 | 第81页 |
| 3.6 本章小结 | 第81-83页 |
| 第4章 HBc-EV71-VP4-N20 病毒样颗粒的免疫学检测 | 第83-103页 |
| 4.1 实验材料 | 第83页 |
| 4.2 实验仪器 | 第83-84页 |
| 4.3 实验方法 | 第84-93页 |
| 4.3.1 HBc-EV71-VP4-N20 病毒样颗粒免疫方案的设计 | 第84-86页 |
| 4.3.2 EV71 病毒 CCID50的检测 | 第86页 |
| 4.3.3 HBc-EV71-VP4-N20 病毒样颗粒的免疫学检测 | 第86-91页 |
| 4.3.4 小鼠体内攻毒实验 | 第91页 |
| 4.3.5 肽库筛查 HBc-EV71-VP4-N20 蛋白的抗原决定簇位点 | 第91-93页 |
| 4.4 实验结果 | 第93-101页 |
| 4.4.1 EV71 病毒 CCID50的检测结果 | 第93-94页 |
| 4.4.2 HBc-EV71-VP4-N20 病毒样颗粒的免疫学检测结果 | 第94-99页 |
| 4.4.3 小鼠体内攻毒实验结果 | 第99-100页 |
| 4.4.4 肽库筛查 HBc-EV71-VP4-N20 蛋白的抗原决定簇位点 | 第100-101页 |
| 4.5 讨论 | 第101-102页 |
| 4.6 本章小结 | 第102-103页 |
| 结论 | 第103-105页 |
| 参考文献 | 第105-113页 |
| 附录 | 第113-119页 |
| 攻读博士学位期间所发表的学术论文 | 第119-121页 |
| 致谢 | 第121页 |
