| 中文摘要 | 第9-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 第一部分 CrkL表达稳定下调的慢性粒细胞性白血病K562细胞株的建立 | 第17-30页 |
| 材料和方法 | 第17-23页 |
| 1. 材料 | 第17-18页 |
| 1.1 细胞系及培养条件 | 第17页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第17-18页 |
| 2. 方法 | 第18-23页 |
| 2.1 载体的构建与验证 | 第18-19页 |
| 2.2 CrkL表达稳定下调的慢性粒细胞白血病K562细胞株的建立 | 第19-23页 |
| 2.3 统计学分析 | 第23页 |
| 结果 | 第23-26页 |
| 1. K562细胞转染效率 | 第23-24页 |
| 2. Western blot 检测各组单克隆细胞株 CrkL 蛋白水平 | 第24页 |
| 3. q RT-PCR 检测各组细胞 CrkL mRNA 水平 | 第24-25页 |
| 4. Western blot检测各组单克隆细胞株磷酸化CrkL蛋白水平 | 第25-26页 |
| 讨论 | 第26-27页 |
| 结论 | 第27页 |
| 参考文献 | 第27-30页 |
| 第二部分 CrkL对慢性粒细胞性白血病K562细胞恶性行为的影响及分子机制研究 | 第30-66页 |
| 材料和方法 | 第30-36页 |
| 1. 材料 | 第30-32页 |
| 1.1 细胞系及培养条件 | 第30页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第30-32页 |
| 2. 方法 | 第32-36页 |
| 2.1 CrkL稳定转染K562细胞形态表征 | 第32页 |
| 2.2 台盼蓝计数法测定CrkL下调对K562细胞增殖能力的影响 | 第32-33页 |
| 2.3 甲基纤维素半固体培养基培养检测CrkL下调对K562细胞克隆形成能力的影响 | 第33页 |
| 2.4 Transwell小室法检测CrkL下调对K562细胞迁移能力的影响 | 第33-34页 |
| 2.5 Transwell小室法检测CrkL下调对K562细胞侵袭能力的影响 | 第34页 |
| 2.6 流式细胞术检测CrkL下调对K562细胞周期的影响 | 第34页 |
| 2.7 CrkL下调对K562细胞Imatinib mesylate耐药性的影响 | 第34页 |
| 2.8 Hoechst33258检测CrkL下调对K562细胞Imatinib mesylate诱导凋亡的影响 | 第34-35页 |
| 2.9 CrkL下调对K562细胞BCL-X、BCL-2、c-MYC、FAK、STAT5A、STAT5B、p-STAT5、ERK1/2、p-ERK1/2、p-AKT、p-JNK、p-c-JUN、p130CAS、Rac1、Rap1、DOCK180和p-mTOR蛋白表达水平的影响 | 第35页 |
| 2.10 CrkL下调对K562细胞MMP2、MMP9、E-cadherin、BCRP、c-SRC、CD41、CD61 mRNA表达水平的影响 | 第35-36页 |
| 结果 | 第36-55页 |
| 1. CrkL下调对K562细胞亚显微结构的影响 | 第36-37页 |
| 2. CrkL下调抑制K562细胞体外增殖能力 | 第37页 |
| 3. CrkL下调抑制K562细胞体外克隆形成能力 | 第37-38页 |
| 4. CrkL下调抑制K562细胞体外迁移能力 | 第38-39页 |
| 5. CrkL下调抑制K562细胞体外侵袭能力 | 第39-40页 |
| 6. CrkL下调对K562细胞周期的影响 | 第40-41页 |
| 7. CrkL下调对K562细胞凋亡有一定促进作用 | 第41-42页 |
| 8. CrkL下调对K562细胞Imatinib mesylate耐药性的影响 | 第42-43页 |
| 9. CrkL下调促进K562细胞向巨核系分化 | 第43-45页 |
| 10. CrkL下调对K562细胞相关信号通路的影响 | 第45-55页 |
| 讨论 | 第55-59页 |
| 结论 | 第59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 综述 | 第66-76页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
