中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
符号说明 | 第11-13页 |
前言 | 第13-18页 |
研究现状、成果 | 第13-17页 |
研究目的、方法 | 第17-18页 |
一、miR-181b和miR-182在胃腺癌中的作用研究 | 第18-36页 |
1.1 对象和方法 | 第18-28页 |
1.1.1 实验对象 | 第18-19页 |
1.1.2 实验方法 | 第19-28页 |
1.2 结果 | 第28-32页 |
1.2.1 Real-time PCR检测miR-181b,miR-182在胃腺癌组织和正常胃组织中的差异表达 | 第28-29页 |
1.2.2 pcDNA3/pri-miR-181b,pcDNA3/pri-miR-182质粒的构建 | 第29-30页 |
1.2.3 细胞转染效率检测 | 第30页 |
1.2.4 Real-time PCR检测pcDNA3/pri-miR-181b,pcDNA3/pri-miR-182质粒的有效性 | 第30-31页 |
1.2.5 MTT实验检测miR-181b,miR-182对胃腺癌细胞生长活性的影响 | 第31页 |
1.2.6 细胞集落形成实验检测miR-181b,miR-182对胃腺癌细胞集落形成能力的影响 | 第31-32页 |
1.3 讨论 | 第32-34页 |
1.3.1 miR-181b和miR-182在肿瘤中的作用 | 第32-33页 |
1.3.2 miR-181b和miR-182对胃腺癌细胞的表型影响 | 第33-34页 |
1.4 小结 | 第34-36页 |
二、miR-181b和miR-182在胃腺癌中靶基因的确定及验证 | 第36-54页 |
2.1 对象和方法 | 第36-45页 |
2.1.1 实验对象 | 第36-38页 |
2.1.2 实验方法 | 第38-45页 |
2.2 结果 | 第45-51页 |
2.2.1 EGFP荧光报告载体的构建 | 第45-46页 |
2.2.2 EGFP荧光报告载体实验验证CREBl是miR-181b,miR-182的直接作用靶基因 | 第46-50页 |
2.2.3 Real-Time PCR方法检测在过表达miR-181b,miR-182后的MGC803细胞中和胃腺癌组织中CREB1 mRNA的表达水平 | 第50-51页 |
2.2.4 Western blot检测在过表达miR-181b,miR-182后的MGC803细胞中CREB1蛋白的表达水平 | 第51页 |
2.3 讨论 | 第51-53页 |
2.3.1 荧光报告载体实验的应用 | 第52页 |
2.3.2 miR-181b和miR-182对靶基因CREB1的负性调节作用 | 第52-53页 |
2.4 小结 | 第53-54页 |
三、靶基因CREB1在胃腺癌中的作用研究 | 第54-60页 |
3.1 对象和方法 | 第54-55页 |
3.1.1 实验对象 | 第54页 |
3.1.2 实验方法 | 第54-55页 |
3.2 结果 | 第55-57页 |
3.2.1 pSilencer/CREB1-shRNA质粒的构建 | 第55-56页 |
3.2.2 Western blot验证pSilencer/CREB1-shRNA质粒的有效性 | 第56-57页 |
3.2.3 MTT检测基因CREB1对胃腺癌细胞生长活性的影响 | 第57页 |
3.2.4 细胞集落形成实验分析CREB1对胃腺癌细胞集落形成能力的影响 | 第57页 |
3.3 讨论 | 第57-59页 |
3.3.1 基因CREB1的介绍 | 第57-58页 |
3.3.2 基因CREB1与肿瘤的关系 | 第58页 |
3.3.3 基因CREB1对胃腺癌细胞生长的影响 | 第58-59页 |
3.4 小结 | 第59-60页 |
结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第67-68页 |
综述 microRNA 在胃肠道肿瘤中的作用 | 第68-77页 |
综述参考文献 | 第72-77页 |
致谢 | 第77页 |