英文缩写 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
前言 | 第11-14页 |
材料和方法 | 第14-25页 |
1 实验材料 | 第14页 |
2 仪器和试剂 | 第14-16页 |
2.1 仪器 | 第14-15页 |
2.2 试剂 | 第15-16页 |
3 LEPCs的分离和鉴定 | 第16-18页 |
3.1 Percoll工作液的配制 | 第16页 |
3.2 单个核细胞的分离 | 第16页 |
3.3 流式细胞仪分析 | 第16-17页 |
3.4 免疫细胞化学染色 | 第17-18页 |
3.5 LEPCs的扩增 | 第18页 |
4 PEI-alginate纳米粒和纳米复合物的制备和特征检测 | 第18-19页 |
4.1 制备PEI-alginate纳米粒和PEI-alginate/siRNA纳米复合物 | 第18页 |
4.2 琼脂糖凝胶电泳检测PEI-alginate纳米粒包封siRNA的效率 | 第18-19页 |
4.3 PEI-alginate/siRNA纳米复合物毒性检测 | 第19页 |
4.4 PEI-alginate/siRNA纳米复合物转染效率检测 | 第19页 |
5 PEI-alginate/siRNA纳米复合物在细胞内的分布和降解 | 第19-20页 |
5.1 扫描电子显微镜标本制备及观察 | 第19-20页 |
5.2 透射电子显微镜标本制备及观察 | 第20页 |
6 VEGFR-3 siRNA的筛选 | 第20-22页 |
6.1 细胞内总RNA的提取 | 第20-21页 |
6.2 RT-PCR分析 | 第21-22页 |
6.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第22页 |
7 PEI-alginate/siRNA纳米复合物抑制淋巴管新生实验 | 第22-24页 |
7.1 细胞活性检测 | 第22页 |
7.2 PCNA染色 | 第22-23页 |
7.3 Transwell跨膜迁移实验 | 第23页 |
7.4 Matrigel凝胶内毛细淋巴管样结构形成实验 | 第23-24页 |
8 统计学分析 | 第24-25页 |
结果 | 第25-36页 |
1 LEPCs的生物学特征 | 第25-26页 |
2 PEI-alginate/siRNA纳米复合物的特征 | 第26-28页 |
2.1 PEI-alginate纳米粒包封siRNA的效率 | 第26-27页 |
2.2 不同N/P比值的PEI-alginate/siRNA纳米复合物的毒性 | 第27-28页 |
2.3 PEI-alginate/siRNA的粒径、电荷和转染效率 | 第28页 |
3 PEI-alginate/siRNA纳米复合物在细胞内的分布和降解 | 第28-30页 |
3.1 PEI-alginate/siRNA纳米复合物的特征和分布 | 第28-29页 |
3.2 PEI-alginate/siRNA纳米复合物在细胞内的降解 | 第29-30页 |
4 VEGFR-3 siRNA的筛选 | 第30-31页 |
5 PEI-alginate纳米粒转染siRNA后抑制LEPCs介导的淋巴管新生 | 第31-36页 |
5.1 LEPCs的活性变化 | 第31-32页 |
5.2 LEPCs的增殖变化 | 第32-33页 |
5.3 LEPCs的迁移变化 | 第33-34页 |
5.4 毛细淋巴管样结构的形成 | 第34-36页 |
讨论 | 第36-40页 |
全文小结 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-49页 |
综述 | 第49-59页 |
参考文献 | 第55-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
附录 | 第60-61页 |