| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第1章 引言 | 第13-16页 |
| 第2章 材料与方法 | 第16-30页 |
| 2.1 材料 | 第16-18页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第16页 |
| 2.1.2 慢病毒载体 | 第16页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.2 方法 | 第18-29页 |
| 2.2.1 主要溶液配置 | 第18-20页 |
| 2.2.2 GIST-T1 细胞的培养 | 第20-22页 |
| 2.2.3 hETV1 基因沉默慢病毒质粒的构建 | 第22-23页 |
| 2.2.4 shRNA 慢病毒颗粒转染 | 第23-24页 |
| 2.2.5 Western Blot 筛选 shRNA-hETV1 | 第24-26页 |
| 2.2.6 MTT 法观察细胞增殖 | 第26页 |
| 2.2.7 GIST-T1 细胞凋亡观察 | 第26-27页 |
| 2.2.8 Transwell 侵袭实验 | 第27-28页 |
| 2.2.9 细胞爬片和免疫组化 | 第28-29页 |
| 2.3 统计学处理 | 第29-30页 |
| 第3章 结果 | 第30-42页 |
| 3.1 比较体外干扰 hETV1 转录因子的各个靶点基因对转染后 GIST- T1 细胞 hETV1 蛋白表达强度的检测 | 第30-33页 |
| 3.1.1 抽提质粒的鉴定 | 第30-31页 |
| 3.1.2 测序酶切鉴定正确的质粒 | 第31页 |
| 3.1.3 WesternBlot 筛选 hETV1-shRNA | 第31-33页 |
| 3.2 shRNA-hETV1 慢病毒转染 GIST-T1 细胞 | 第33页 |
| 3.3 体外干扰 hETV1 转录因子对 GIST-T1 细胞生长和凋亡的影响 | 第33-38页 |
| 3.3.1 观察干扰前后细胞的生长曲线变化 | 第33-36页 |
| 3.3.2 观察干扰前后细胞凋亡情况 | 第36-38页 |
| 3.4 体外干扰 hETV1 转录因子对 GIST-T1 细胞体外侵袭力和蛋白表达的影响 | 第38-42页 |
| 3.4.1 观察干扰前后细胞侵袭力的变化 | 第38-39页 |
| 3.4.2 观察干扰前后细胞蛋白表达的影响 | 第39-42页 |
| 第4章 讨论 | 第42-46页 |
| 第5章 结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
| 综述 | 第51-56页 |
| 参考文献 | 第54-56页 |
