中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
前言 | 第11-15页 |
第一部分 TLN1在卵巢浆液性癌组织中的表达及意义 | 第15-23页 |
材料和方法 | 第16-18页 |
一、材料 | 第16-17页 |
1. 组织标本 | 第16页 |
2. 试剂 | 第16页 |
3. 溶液配制 | 第16-17页 |
4. 仪器设备 | 第17页 |
二、实验方法 | 第17-18页 |
1. 免疫组化染色 | 第17-18页 |
2. 免疫组化结果判断 | 第18页 |
3. 统计学方法 | 第18页 |
结果 | 第18-20页 |
1. TLN1在OSC组织中过表达;淋巴结转移灶中TLN1表达水平高于原发灶 | 第18-19页 |
2. TLN1在低级别和高级别浆液性癌中呈差异性表达 | 第19-20页 |
讨论 | 第20-23页 |
第二部分 调控TLN1的MIRNA预测及验证 | 第23-55页 |
材料与方法 | 第24-47页 |
一、材料 | 第24-30页 |
1. 细胞 | 第24页 |
2. 试剂(盒) | 第24-26页 |
3. 溶液配制 | 第26-29页 |
4. 仪器设备 | 第29-30页 |
二、实验方法 | 第30-47页 |
1. OSC中调控TLN1的miRNA的预测 | 第30-31页 |
2. 细胞培养 | 第31页 |
3. 细胞转染 | 第31-35页 |
4. 定量RT-PCR检测miR-9对OSC细胞TLN1 mRNA表达水平的影响 | 第35-37页 |
5. Western blot检测miR-9对OSC细胞TLN1蛋白表达水平的影响 | 第37-39页 |
6. 双荧光素酶报告基因实验 | 第39-46页 |
7. 统计学分析 | 第46-47页 |
结果 | 第47-52页 |
1. 生物信息学预测TLN1可能是miR-9的靶基因 | 第47-48页 |
2. RNA提取鉴定 | 第48页 |
3. 转染miR-9 mimic和anti-miR-9有效调节miR-9的表达 | 第48-49页 |
4. miR-9水平与TLN1 mRNA及蛋白表达水平负相关 | 第49-51页 |
5. miR-9直接靶向TLN1-3'-UTR | 第51-52页 |
讨论 | 第52-55页 |
第三部分 MIR-9对卵巢浆液性癌细胞的生物学影响及作用机制 | 第55-76页 |
材料和方法 | 第56-61页 |
一、材料 | 第56-57页 |
1. 细胞 | 第56页 |
2. 试剂和器材 | 第56-57页 |
3. 溶液配制 | 第57页 |
4. 仪器 | 第57页 |
二、实验方法 | 第57-61页 |
1. 细胞培养 | 第57页 |
2. 定量RT-PCR法检测人卵巢上皮细胞系和OSC细胞株中miR-9的表达水平 | 第57页 |
3. miRNA转染 | 第57页 |
4. siRNA转染 | 第57-58页 |
5. MTT实验 | 第58-59页 |
6. 平板克隆形成实验 | 第59页 |
7. 细胞凋亡检测实验 | 第59页 |
8. Transwell迁移实验 | 第59-60页 |
9. Transwell侵袭实验 | 第60页 |
10. Western blot检测miR-9过表达对OSC中FAK/AKT通路活性的影响 | 第60页 |
11. 统计学分析 | 第60-61页 |
结果 | 第61-71页 |
1. miR-9在OSC细胞株SKOV3、CAOV3和OVCAR3中低表达 | 第61页 |
2. miR-9过表达对OSC细胞生物学特性的影响 | 第61-65页 |
3. 下调TLN1表达对OSC细胞生物学特性的影响 | 第65-71页 |
讨论 | 第71-76页 |
总结 | 第76-77页 |
主要创新点 | 第77-78页 |
后续工作及展望 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-88页 |
综述 | 第88-98页 |
参考文献 | 第94-98页 |
中英文缩写对照 | 第98-99页 |
研究生期间投稿或发表的论文和综述 | 第99页 |
研究生期间获奖情况 | 第99-100页 |
致谢 | 第100-103页 |