摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
引言 | 第10-11页 |
上篇 文献综述 | 第11-28页 |
第一章 大豆疫霉病原菌概述 | 第12-16页 |
1 大豆疫霉的生活史 | 第12-13页 |
2 大豆疫霉的侵染及病害循坏 | 第13-14页 |
3 大豆疫霉引起病害症状 | 第14-15页 |
4 大豆疫霉的防治 | 第15-16页 |
第二章 细胞自噬与细胞凋亡的研究概述 | 第16-28页 |
1 细胞自噬简介 | 第16-17页 |
1.1 什么是细胞自噬? | 第16页 |
1.2 细胞自噬的类型 | 第16-17页 |
2 细胞自噬的分子机制 | 第17-20页 |
3 细胞自噬的信号调控 | 第20-21页 |
4 细胞自噬的检测方法 | 第21-22页 |
5 细胞自噬在丝状真菌中的功能 | 第22-24页 |
6 细胞凋亡的研究概述 | 第24-26页 |
7 展望 | 第26-28页 |
下篇 研究内容 | 第28-72页 |
第一章 大豆疫霉细胞自噬观察 | 第30-40页 |
1 材料与方法 | 第32-34页 |
1.1 实验菌株的保存 | 第32页 |
1.2 常用培养基制备以及试剂制备 | 第32-33页 |
1.3 MDC染色观察 | 第33-34页 |
1.4 大豆疫霉GFP-PsAtg8过表达转化子的获得 | 第34页 |
1.5 共聚焦显微镜荧光观察 | 第34页 |
2 结果分析 | 第34-37页 |
2.1 大豆疫霉细胞自噬的检测 | 第34-36页 |
2.2 大豆疫霉孢子囊形成过程中细胞自噬发生增强 | 第36-37页 |
2.3 大豆疫霉孢子萌发过程中细胞自噬发生增强 | 第37页 |
3 讨论 | 第37-40页 |
第二章 大豆疫霉自噬基因PsAtg6a的功能分析 | 第40-60页 |
1 材料与方法 | 第42-52页 |
1.1 植物材料及实验菌株的保存与培养 | 第42页 |
1.2 常用培养基制备以及试剂制备 | 第42页 |
1.3 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备与转化 | 第42-43页 |
1.4 大豆疫霉细胞自噬基因PsATG6的表达模式分析 | 第43-46页 |
1.5 大豆疫霉PsAtg6a基因沉默和过表达转化子的获得 | 第46-51页 |
1.6 PsAtg6a基因沉默和过表达转化子生物学表型分析 | 第51-52页 |
2 结果与分析 | 第52-57页 |
2.1 大豆疫霉PsAtg6基因的表达分析 | 第52-53页 |
2.2 大豆疫霉PsAtg6a转化子转录水平验证以及致病性验证 | 第53-56页 |
2.3 PsAtg6a基因沉默或过表达不影响大豆疫霉菌丝生长 | 第56页 |
2.4 PsAtg6a沉默转化子孢子囊产生减少 | 第56-57页 |
3 讨论 | 第57-60页 |
第三章 大豆疫霉细胞凋亡相关基因的鉴定与表达分析 | 第60-72页 |
1 材料方法 | 第61-63页 |
1.1 植物材料及实验菌株的保存与培养 | 第61-62页 |
1.2 大豆疫霉中四个细胞凋亡相关基因的生物信息学分析 | 第62页 |
1.3 大豆疫霉侵染大豆叶片不同时间点取样 | 第62页 |
1.4 RNA提取 | 第62页 |
1.5 反转录RNA | 第62页 |
1.6 实时荧光定量PCR分析 | 第62-63页 |
2 结果与分析 | 第63-69页 |
2.1 大豆疫霉四个细胞凋亡基因的鉴定 | 第63-64页 |
2.2 大豆疫霉四个细胞凋亡基因的进化分析 | 第64-65页 |
2.3 大豆疫霉四个细胞凋亡基因的序列分析 | 第65-66页 |
2.4 AIF基因在大豆疫霉侵染过程中是上调表达的 | 第66页 |
2.5 大豆疫霉侵染过程中EndoG基因的转录分析 | 第66-67页 |
2.6 大豆疫霉侵染过程中CYCS基因的转录分析 | 第67-68页 |
2.7 大豆疫霉侵染过程中TatD基因的转录分析 | 第68-69页 |
3 讨论 | 第69-72页 |
参考文献 | 第72-86页 |
全文结论和创新点 | 第86-88页 |
攻读硕士学位期间发表的研究论文 | 第88-90页 |
致谢 | 第90页 |