| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1 MYB转录因子研究进展 | 第13-19页 |
| 1.1 MYB转录因子的结构与分类 | 第13-15页 |
| 1.2 MYB转录因子的起源和进化 | 第15-16页 |
| 1.3 MYB转录因子的生物学功能 | 第16-19页 |
| 1.3.1 参与非生物和生物胁迫应答 | 第16-17页 |
| 1.3.2 调控细胞代谢和植物生长发育 | 第17页 |
| 1.3.3 调控植物次生代谢 | 第17-19页 |
| 2 木质素研究进展 | 第19-25页 |
| 2.1 木质素的组成和生物合成 | 第19-21页 |
| 2.1.1 木质素的组成 | 第19-20页 |
| 2.1.2 木质素的生物合成 | 第20-21页 |
| 2.2 关键酶基因对木质素的调控作用 | 第21-22页 |
| 2.3 R2R3-MYB转录因子对木质素合成的调控作用 | 第22-25页 |
| 第二章 荷花NnMYB4转录因子全长ORF的克隆及序列分析 | 第25-35页 |
| 1 材料与方法 | 第26-30页 |
| 1.1 植物材料 | 第26页 |
| 1.2 试剂与仪器 | 第26页 |
| 1.2.1 试剂、菌株与载体 | 第26页 |
| 1.2.2 仪器设备 | 第26页 |
| 1.3 实验方法 | 第26-30页 |
| 1.3.1 ORF特异性引物设计 | 第26-27页 |
| 1.3.2 RNA提取 | 第27页 |
| 1.3.3 1st-Strand cDNA合成及检测 | 第27-28页 |
| 1.3.4 高保真ORF全长扩增 | 第28-29页 |
| 1.3.5 目的片段的连接转化 | 第29页 |
| 1.3.6 重组子筛选及测序 | 第29-30页 |
| 1.3.7 序列比对与进化树构建 | 第30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-33页 |
| 2.1 RNA提取质量与反转录效果检测 | 第30页 |
| 2.2 NnMYB4全长ORF的克隆 | 第30-31页 |
| 2.3 荷花NnMYB4氨基酸序列同源性比对 | 第31-32页 |
| 2.4 系统进化树构建 | 第32-33页 |
| 3 讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 荷花NMYB4转录因子的表达特性及转录激活活性分析 | 第35-45页 |
| 1 材料与方法 | 第36-40页 |
| 1.1 植物材料 | 第36页 |
| 1.2 试剂与仪器 | 第36-37页 |
| 1.2.1 主要试剂和菌株 | 第36页 |
| 1.2.2 仪器设备 | 第36-37页 |
| 1.3 实验方法 | 第37-40页 |
| 1.3.1 荷花总RNA提取及反转录 | 第37页 |
| 1.3.2 荷花NnMYB4基因的Real time-PCR分析 | 第37页 |
| 1.3.3 荷花NnMYB4的亚细胞定位转化载体构建 | 第37-39页 |
| 1.3.4 洋葱表皮细胞瞬时表达 | 第39页 |
| 1.3.5 显微镜观察 | 第39页 |
| 1.3.6 酵母表达载体构建 | 第39页 |
| 1.3.7 酵母感受态的制备与转化 | 第39-40页 |
| 1.3.8 阳性克隆筛选 | 第40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-42页 |
| 2.1 荷花NnMYB4组织定量表达特性 | 第40-41页 |
| 2.2 亚细胞定位分析 | 第41页 |
| 2.3 NnMYB4转录激活活性分析 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-45页 |
| 第四章 荷花NnMYB4转录因子的功能分析 | 第45-55页 |
| 1 材料与方法 | 第46-50页 |
| 1.1 植物材料 | 第46页 |
| 1.2 试剂与仪器 | 第46页 |
| 1.2.1 试剂及菌株 | 第46页 |
| 1.2.2 仪器设备 | 第46页 |
| 1.3 实验方法 | 第46-50页 |
| 1.3.1 NnMYB4正义表达载体的构建 | 第46页 |
| 1.3.2 拟南芥的遗传转化 | 第46-47页 |
| 1.3.3 转基因拟南芥的阳性筛选及分子鉴定 | 第47页 |
| 1.3.4 拟南芥横截面切片观察 | 第47页 |
| 1.3.5 细胞壁总木质素含量测定 | 第47-48页 |
| 1.3.6 木质素、纤维素合成关键酶基因的表达分析 | 第48-50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-53页 |
| 2.1 转基因拟南芥鉴定 | 第50页 |
| 2.2 转基因拟南芥表型及花序茎横截面观察 | 第50-52页 |
| 2.3 荷花NnMYB4转录因子对木质素合成的影响 | 第52页 |
| 2.4 转基因拟南芥木质素、纤维素合成关键酶基因表达量分析 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| 全文结论 | 第55-57页 |
| 创新点 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-71页 |
| 附录 | 第71-81页 |
| 发表论文 | 第81-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
