摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
上篇 文献综述 | 第10-23页 |
第一章 文献综述 | 第11-23页 |
1 番茄斑萎病毒属病毒概述 | 第11-14页 |
1.1 番茄斑萎病毒特性 | 第11页 |
1.2 番茄斑萎病毒基因组结构和功能 | 第11-13页 |
1.3 番茄斑萎病毒属病毒编码的移动蛋白NSm研究进展 | 第13-14页 |
2 抗性基因的研究进展 | 第14-18页 |
2.1 植物NB-LRR类抗性基因研究进展 | 第14-17页 |
2.1.1 病原体直接识别NB-LRR免疫受体 | 第15页 |
2.1.2 病原体间接识别NB-LRR免疫受体 | 第15-16页 |
2.1.3 病原体识别效应子介导的非NB-LRR转录激活的蛋白质 | 第16页 |
2.1.4 NB-LRR需要其他免疫受体 | 第16页 |
2.1.5 NB-LRR免疫受体的其他功能 | 第16-17页 |
2.2 抗性基因Sw-5研究进展 | 第17-18页 |
3 植物防卫反应研究进展 | 第18-20页 |
3.1 植物防卫反应途径分类 | 第18-20页 |
3.2 植物过敏反应概述 | 第20页 |
4 本研究的目的和意义 | 第20-23页 |
下篇 研究内容 | 第23-47页 |
第二章 抗性蛋白SW-5b与番茄斑萎病毒无毒因子NSm识别位点的鉴定 | 第25-45页 |
1 实验材料 | 第25-26页 |
1.1 病毒、载体和菌种 | 第25页 |
1.2 植物材料 | 第25页 |
1.3 酶和生化试剂 | 第25页 |
1.4 抗体 | 第25页 |
1.5 主要仪器 | 第25-26页 |
1.6 常用引物 | 第26页 |
1.7 常用溶液、试剂及培养基的配置 | 第26页 |
2 基本实验方法 | 第26-36页 |
2.1 PCR体系 | 第26-27页 |
2.2 Overlap PCR | 第27-28页 |
2.3 PCR产物的切胶回收 | 第28-29页 |
2.4 PCR回收产物和载体的酶切及连接 | 第29-30页 |
2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第30-31页 |
2.6 菌落PCR筛选阳性克隆 | 第31页 |
2.7 大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第31-32页 |
2.8 测序 | 第32页 |
2.9 序列分析 | 第32页 |
2.10 农杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第32-33页 |
2.11 农杆菌浸润 | 第33页 |
2.12 电导率测定 | 第33-34页 |
2.13 Western blot检测蛋白表达水平 | 第34-35页 |
2.14 野生番茄种子消毒及催芽萌发 | 第35页 |
2.15 CTAB法提取野生番茄叶片基因组DNA | 第35页 |
2.16 病毒接种 | 第35页 |
2.17 斑点杂交(Dot-blot) | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-45页 |
3.1 Sw-5b LRR结构域是Sw-5b NB-LRR与NSm识别重要区段 | 第36-38页 |
3.2 两种NB-LRR氨基酸序列相似性分析 | 第38页 |
3.3 Sw-5b NB-LRR与NSm识别位点的鉴定 | 第38-41页 |
3.4 电导率比较分析Sw-5b NB-LRR突变体与NSm产生的HR强度 | 第41-42页 |
3.5 Western blot检测四种NB-LRR突变体蛋白表达水平 | 第42页 |
3.6 从进化角度分析Sw-5b NB-LRR与NSm的识别位点 | 第42-45页 |
第三章 本文总结 | 第45-47页 |
1 本文结论 | 第45页 |
2 展望 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-55页 |
附录A 本研究所用引物 | 第55-57页 |
附录B 本论文主要的重要缩写词及中文对照 | 第57-59页 |
附录C 研究生期间发表的学术论文 | 第59-61页 |
致谢 | 第61页 |