摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
常用缩略语 | 第11-12页 |
第一章 文章综述 | 第12-22页 |
1 骨骼肌卫星细胞 | 第12-15页 |
1.1 肌肉生成概述 | 第12页 |
1.2 卫星细胞的体外分离培养方法 | 第12-13页 |
1.3 卫星细胞的纯化 | 第13-14页 |
1.4 骨骼肌卫星细胞的鉴定 | 第14页 |
1.5 肌卫星细胞的遗传调控与信号传导通路 | 第14-15页 |
2 Wnt/β-catenin信号通路概述 | 第15-19页 |
2.1 Wnt蛋白 | 第15-16页 |
2.2 Wnt信号在成脂中的作用 | 第16-17页 |
2.3 Wnt信号在成肌过程中的作用 | 第17-19页 |
3 miRNA概述 | 第19-22页 |
3.1 miRNA的成熟和作用机制 | 第19页 |
3.2 miRNA和siRNA的区别 | 第19-20页 |
3.3 miRNA在骨骼肌、Wnt通路和脂肪组织中的研究 | 第20-22页 |
第二章 牛骨骼肌卫星细胞原代培养以及鉴定 | 第22-32页 |
1 材料与方法 | 第22-23页 |
1.1 实验地点和时间 | 第22页 |
1.2 实验动物 | 第22-23页 |
1.3 主要酶和试剂 | 第23页 |
1.4 主要仪器 | 第23页 |
2 试验方法 | 第23-25页 |
2.1 骨骼肌卫星细胞的分离培养 | 第23-24页 |
2.2 骨骼肌卫星细胞的纯化、传代 | 第24页 |
2.3 骨骼肌卫星细胞诱导分化 | 第24-25页 |
2.4 骨骼肌卫星细胞鉴定 | 第25页 |
3 结果与分析 | 第25-29页 |
3.1 牛骨骼肌卫星细胞形态学鉴定 | 第25-27页 |
3.2 骨骼肌卫星细胞诱导分化 | 第27-28页 |
3.3 细胞免疫化学检测骨骼肌卫星细胞标志性基因表达 | 第28-29页 |
4 讨论 | 第29-32页 |
第三章 骨骼肌卫星细胞成脂诱导中Wnt/β-catenin信号相关miRNA表达谱研究 | 第32-48页 |
1 材料与方法 | 第33-34页 |
1.1 试验地点和时间 | 第33页 |
1.2 实验动物 | 第33页 |
1.3 试剂 | 第33页 |
1.4 主要仪器 | 第33-34页 |
2 试验方法 | 第34-38页 |
2.1 实验分组及处理 | 第34页 |
2.2 RNA提取 | 第34-35页 |
2.3 骨骼肌卫星细胞miRNA微阵列分析 | 第35页 |
2.4 cDNA合成反应 | 第35-36页 |
2.5 qRT-PCR | 第36-37页 |
2.6 miRNA靶基因预测以及GO注释和KEGG信号通路富集分析 | 第37页 |
2.7 数据分析 | 第37-38页 |
3 结果与分析 | 第38-46页 |
3.1 Wnt/β-catenin信号通路激活验证 | 第38页 |
3.2 总RNA提取质量控制 | 第38-39页 |
3.3 芯片杂交与扫描 | 第39页 |
3.4 芯片检测结果 | 第39-42页 |
3.5 芯片结果验证 | 第42页 |
3.6 差异表达的miRNAs GO和KEGG分析 | 第42-46页 |
4 讨论 | 第46-48页 |
全文结论 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
致谢 | 第56页 |