| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 文献综述 | 第13-26页 |
| 第一章 脂肪细胞甘油三酯积累的研究进展 | 第13-20页 |
| ·脂肪细胞分化的研究进展 | 第13-16页 |
| ·脂肪细胞分化的一般规律 | 第13页 |
| ·脂肪细胞分化的转录调控 | 第13-16页 |
| ·脂肪细胞甘油三酯水解及其调控的研究进展 | 第16-20页 |
| ·脂肪酶与甘油三酯水解 | 第17页 |
| ·PAT 家族蛋白与甘油三酯水解 | 第17-18页 |
| ·调控甘油三酯水解的主要通路 | 第18-20页 |
| 第二章 ERRα研究进展概述及其与脂肪沉积的关系 | 第20-26页 |
| ·ERRα简介 | 第20-21页 |
| ·ERRα的发现 | 第20页 |
| ·ERRα的组织分布 | 第20页 |
| ·ERRα的结构 | 第20-21页 |
| ·ERRα相关辅调节因子 | 第21页 |
| ·ERRα调控能量代谢过程 | 第21-23页 |
| ·ERRα促进脂肪酸氧化 | 第21-22页 |
| ·ERRα促进线粒体的生物合成及功能 | 第22-23页 |
| ·ERRα调节葡萄糖代谢 | 第23页 |
| ·ERRα基因敲出鼠脂肪组织含量减少 | 第23-26页 |
| 试验研究 | 第26-71页 |
| 前言 | 第26-27页 |
| 第三章 ERRα在脂肪组织中的表达模式分析 | 第27-38页 |
| ·材料与方法 | 第27-32页 |
| ·实验动物 | 第27页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·仪器与器械 | 第27-28页 |
| ·主要溶液配方 | 第28-29页 |
| ·蛋白标准曲线的制备 | 第29-30页 |
| ·组织及细胞总蛋白的提取 | 第30-31页 |
| ·蛋白电泳及免疫印迹 | 第31页 |
| ·大鼠原代前体脂肪细胞的分离培养及诱导分化 | 第31页 |
| ·油红O 染色 | 第31页 |
| ·ERRα的免疫荧光化学染色 | 第31-32页 |
| ·统计分析 | 第32页 |
| ·结果 | 第32-36页 |
| ·考马斯亮蓝蛋白定量曲线和BCA 蛋白测定曲线的绘制 | 第32页 |
| ·ERRα在脂肪组织中表达模式 | 第32-35页 |
| ·ERRα随脂肪细胞分化表达变化 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 第四章 ERRα基因的克隆及其腺病毒表达载体构建 | 第38-52页 |
| ·材料与方法 | 第38-46页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·仪器与器械 | 第38页 |
| ·主要溶液及配方 | 第38-39页 |
| ·RNA 提取和反转录PCR | 第39页 |
| ·猪和大鼠ERRα基因CDS 序列的扩增及回收及测序 | 第39-42页 |
| ·重组穿梭质粒的构建 | 第42-43页 |
| ·重组腺病毒骨架载体的构建 | 第43-45页 |
| ·重组腺病毒Ad-ERRα的包装、扩繁及滴度测定 | 第45-46页 |
| ·统计分析 | 第46页 |
| ·结果 | 第46-50页 |
| ·大鼠和猪脂肪ERRα基因的克隆和同源性比对 | 第46-48页 |
| ·重组腺病毒表达载体的构建 | 第48-49页 |
| ·重组腺病毒的包装、扩繁及滴度测定 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 第五章 ERRα在脂肪细胞分化过程中作用的研究 | 第52-65页 |
| ·材料与方法 | 第52-55页 |
| ·实验动物 | 第52页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·仪器与器械 | 第52页 |
| ·主要溶液及配方 | 第52页 |
| ·大鼠原代前体脂肪细胞的分离培养 | 第52页 |
| ·大鼠原代分化的脂肪细胞的培养 | 第52-53页 |
| ·大鼠原代前体脂肪细胞和分化的脂肪细胞处理 | 第53页 |
| ·甘油三酯测量公式的制备及甘油三酯测量 | 第53页 |
| ·细胞总RNA 的提取 | 第53页 |
| ·Real-Time PCR 引物的设计和合成及PCR 反应 | 第53-54页 |
| ·HEK293 细胞的培养、转染及荧光素酶活性检测 | 第54-55页 |
| ·免疫共沉淀分析PGC-1β与ERRα、PPARγ和SREBP-1c 间的作用 | 第55页 |
| ·统计分析 | 第55页 |
| ·结果 | 第55-63页 |
| ·实现对ERRα蛋白表达的调控 | 第56页 |
| ·ERRα通过抑制Wnt/β-catenin 信号通路，促进前体脂肪细胞分化 | 第56-59页 |
| ·ERRα通过PGC-1β依赖的方式促进分化的脂肪细胞积累TG | 第59-63页 |
| ·讨论 | 第63-64页 |
| ·小结 | 第64-65页 |
| 第六章 ERRα对脂肪水解作用的研究 | 第65-71页 |
| ·材料与方法 | 第65-66页 |
| ·材料 | 第65页 |
| ·仪器与器械 | 第65页 |
| ·主要溶液及配方 | 第65页 |
| ·大鼠前体脂肪细胞的分离培养、诱导分化及处理 | 第65-66页 |
| ·甘油三酯含量的检测 | 第66页 |
| ·甘油检测标准曲线的制备及样品中甘油检测 | 第66页 |
| ·Western Blot 检测perilipin A、β-actin、PPARγ、HSL 和ATGL 表达 | 第66页 |
| ·统计分析 | 第66页 |
| ·结果 | 第66-69页 |
| ·标准曲线制备 | 第66-67页 |
| ·ERRα促进脂肪细胞甘油三酯积累及甘油释放 | 第67-68页 |
| ·PKA 通路及ERK1/2 通路不参与调控ERRα | 第68页 |
| ·ERRα调控HSL、ATGL、PPARγ及perilipin A 蛋白表达 | 第68-69页 |
| ·讨论 | 第69-70页 |
| ·小结 | 第70-71页 |
| 结论 | 第71页 |
| 创新点 | 第71页 |
| 进一步研究内容 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 缩略词表 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 作者简介 | 第81页 |
