| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 引言 | 第9-20页 |
| 1.1 褐藻胶简介 | 第9-11页 |
| 1.1.1 褐藻胶的来源和结构 | 第9-10页 |
| 1.1.2 褐藻胶的应用 | 第10-11页 |
| 1.2 褐藻胶裂解酶简介 | 第11-18页 |
| 1.2.1 褐藻胶裂解酶来源 | 第11页 |
| 1.2.2 褐藻胶裂解酶的作用机制 | 第11-12页 |
| 1.2.3 褐藻胶裂解酶的分类 | 第12页 |
| 1.2.4 褐藻胶裂解酶的活性检测 | 第12-13页 |
| 1.2.5 褐藻胶裂解酶的性质 | 第13-15页 |
| 1.2.6 褐藻胶裂解酶的分离纯化方法 | 第15-16页 |
| 1.2.7 褐藻胶裂解酶的分子生物学研究 | 第16-17页 |
| 1.2.8 褐藻胶裂解酶的应用 | 第17-18页 |
| 1.3 本课题的选题依据与研究内容 | 第18-20页 |
| 1.3.1 选题依据 | 第18-19页 |
| 1.3.2 研究内容 | 第19-20页 |
| 第二章 产褐藻胶裂解酶微生物的筛选 | 第20-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 样品来源 | 第20页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第20页 |
| 2.1.3 主要药品 | 第20页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第20-21页 |
| 2.1.5 培养基 | 第21页 |
| 2.1.6 常用试剂的配制 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-28页 |
| 2.2.1 产褐藻胶裂解酶微生物的筛选 | 第22页 |
| 2.2.2 褐藻胶裂解酶活力测定 | 第22-24页 |
| 2.2.3 菌株形态观察 | 第24-25页 |
| 2.2.4 菌株分子生物学鉴定 | 第25-28页 |
| 2.2.5 菌种保藏 | 第28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-34页 |
| 2.3.1 产褐藻胶裂解酶微生物的筛选 | 第28-33页 |
| 2.3.2 产褐藻胶裂解酶微生物的分子生物学鉴定 | 第33-34页 |
| 2.4 小结 | 第34-35页 |
| 第三章 菌株BYS-2产褐藻胶裂解酶条件优化 | 第35-48页 |
| 3.1 实验材料 | 第35-36页 |
| 3.1.1 菌株来源 | 第35页 |
| 3.1.2 主要药品及试剂 | 第35页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第35页 |
| 3.1.4 培养基 | 第35-36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-38页 |
| 3.2.1 葡萄糖标准曲线绘制 | 第36页 |
| 3.2.2 褐藻胶裂解酶活力测定 | 第36页 |
| 3.2.3 褐藻胶裂解酶产酶条件优化 | 第36-38页 |
| 3.3 结果与分析 | 第38-46页 |
| 3.3.1 碳源种类优化 | 第38-39页 |
| 3.3.2 碳源添加量优化 | 第39-40页 |
| 3.3.3 氮源种类优化 | 第40页 |
| 3.3.4 氮源添加量优化 | 第40-42页 |
| 3.3.5 三种氮源复配比例的正交试验优化 | 第42-43页 |
| 3.3.6 发酵培养基初始pH的优化 | 第43-44页 |
| 3.3.7 接种量优化 | 第44页 |
| 3.3.8 发酵温度优化 | 第44-45页 |
| 3.3.9 装液量优化 | 第45页 |
| 3.3.10 摇床转速优化 | 第45-46页 |
| 3.3.11 产酶时间优化 | 第46页 |
| 3.4 小结 | 第46-48页 |
| 第四章 褐藻胶裂解酶基因调取及分析 | 第48-67页 |
| 4.1 实验材料 | 第48页 |
| 4.1.1 菌株来源 | 第48页 |
| 4.1.2 主要药品及试剂 | 第48页 |
| 4.1.3 培养基 | 第48页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第48页 |
| 4.2 实验方法 | 第48-51页 |
| 4.2.1 保守区简并引物的设计 | 第48-49页 |
| 4.2.2 褐藻胶裂解酶基因片段的扩增 | 第49-50页 |
| 4.2.3 褐藻胶裂解酶基因片段序列分析 | 第50页 |
| 4.2.4 褐藻胶裂解酶基因全长序列的扩增 | 第50-51页 |
| 4.2.5 褐藻胶裂解酶基因全长序列分析 | 第51页 |
| 4.3 结果与分析 | 第51-66页 |
| 4.3.1 保守区简并引物的设计 | 第51-55页 |
| 4.3.2 褐藻胶裂解酶基因片段的扩增及序列分析 | 第55-58页 |
| 4.3.3 褐藻胶裂解酶基因全长序列的扩增 | 第58-59页 |
| 4.3.4 褐藻胶裂解酶基因全长序列分析 | 第59-66页 |
| 4.4 小结 | 第66-67页 |
| 第五章 alg738在大肠杆菌中的表达及重组酶酶学性质研究 | 第67-83页 |
| 5.1 实验材料 | 第67-69页 |
| 5.1.1 菌株和质粒 | 第67页 |
| 5.1.2 主要药品 | 第67页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第67-68页 |
| 5.1.4 常用溶液及试剂 | 第68-69页 |
| 5.2 实验方法 | 第69-75页 |
| 5.2.1 褐藻胶裂解酶基因的克隆 | 第69页 |
| 5.2.2 重组质粒的构建 | 第69-70页 |
| 5.2.3 大肠杆菌工程菌的构建 | 第70-71页 |
| 5.2.4 褐藻胶裂解酶的诱导表达 | 第71-72页 |
| 5.2.5 重组酶的分离纯化 | 第72-73页 |
| 5.2.6 重组酶的酶学性质研究 | 第73-75页 |
| 5.3 结果与分析 | 第75-82页 |
| 5.3.1 褐藻胶裂解酶基因克隆 | 第75-76页 |
| 5.3.2 alg738在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第76-78页 |
| 5.3.3 重组酶AIg738的酶学性质研究 | 第78-82页 |
| 5.4 小结 | 第82-83页 |
| 结论和展望 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-91页 |
| 附录 | 第91-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 个人简历 | 第97页 |