| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第1章 绪论 | 第15-21页 |
| 第2章 耐辐射奇球菌pprA与ppr I基因在真核细胞中的共表达 | 第21-47页 |
| 2.1 材料与方法 | 第21-25页 |
| 2.1.1 实验所用菌株、质粒及培养条件 | 第21-22页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.1.4 培养基及试剂的配制 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-39页 |
| 2.2.1 大肠杆菌中质粒DNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.2 DNA片段的纯化和回收 | 第26-27页 |
| 2.2.3 大肠杆菌感受态的制备 | 第27-28页 |
| 2.2.4 大肠杆菌细胞的转化 | 第28页 |
| 2.2.5 重组载体构建 | 第28-33页 |
| 2.2.6 细胞的培养、复苏、传代及冻存 | 第33-35页 |
| 2.2.7 去内毒素试剂盒小提质粒 | 第35-36页 |
| 2.2.8 脂质体2000介导细胞转染 | 第36页 |
| 2.2.9 融合蛋白的Western blot检测 | 第36-39页 |
| 2.3 结果和分析 | 第39-43页 |
| 2.3.1 ppr I、pprA基因的PCR扩增 | 第39页 |
| 2.3.2 重组载体的鉴定 | 第39-41页 |
| 2.3.3 ppr I、pprA基因转染 293T细胞 | 第41-42页 |
| 2.3.4 Western blot验证融合蛋白表达 | 第42-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-47页 |
| 第3章 PprI、PprA蛋白相互作用预测及其在细胞内的共定位 | 第47-53页 |
| 3.1 材料和方法 | 第47-48页 |
| 3.1.1 实验所用细胞、菌株、质粒及培养条件 | 第47页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第47页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第47页 |
| 3.1.4 主要生化试剂的配制 | 第47-48页 |
| 3.2 方法 | 第48页 |
| 3.2.1 STRING在线软件预测PprA、PprI相互作用 | 第48页 |
| 3.2.2 蛋白质细胞内共定位 | 第48页 |
| 3.3 结果 | 第48-51页 |
| 3.3.1 STRING软件预测结果 | 第48-49页 |
| 3.3.2 PprI、PprA在 293T细胞中的共定位 | 第49-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-53页 |
| 第4章 pprI与pprA基因对真核 293T细胞辐射抗性的影响 | 第53-69页 |
| 4.1 材料和方法 | 第53-55页 |
| 4.1.1 实验所用细胞、菌株、质粒及培养条件 | 第53页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第53-54页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第54页 |
| 4.1.4 主要生化试剂的配制 | 第54-55页 |
| 4.2 实验方法 | 第55-60页 |
| 4.2.1 实验分组 | 第55页 |
| 4.2.2 MTT法检测 293T细胞的存活率 | 第55-56页 |
| 4.2.3 细胞活性氧（ROS）检测 | 第56页 |
| 4.2.4 细胞丙二醛（MDA）含量检测 | 第56-57页 |
| 4.2.5 细胞还原型谷胱甘肽含量（GSH）检测 | 第57页 |
| 4.2.6 细胞超氧化物歧化酶(SOD)活力检测 | 第57-58页 |
| 4.2.7 细胞的克隆形成能力检测 | 第58-59页 |
| 4.2.8 细胞内γ-H2AX焦点检测 | 第59-60页 |
| 4.2.9 统计分析及制图 | 第60页 |
| 4.3 实验结果 | 第60-65页 |
| 4.3.1 电离辐射对 293T细胞生存率的影响 | 第60页 |
| 4.3.2 基因转染对 293T细胞存活率的影响 | 第60-61页 |
| 4.3.3 辐照后 293T细胞内ROS含量的影响 | 第61-62页 |
| 4.3.4 辐照后 293T细胞GSH和SOD活力及MDA含量的影响 | 第62-63页 |
| 4.3.5 辐照后 293T细胞克隆形成能力的影响 | 第63-64页 |
| 4.3.6 辐照后 293T细胞内γ-H2AX焦点数 | 第64-65页 |
| 4.4 讨论 | 第65-69页 |
| 第5章 结论 | 第69-71页 |
| X参考文献 | 第71-77页 |
| 综述 辐射防护基因治疗 | 第77-93页 |
| 参考文献 | 第86-93页 |
| 附录 | 第93-95页 |
| 作者攻读学位期间的科研成果 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
