摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第1章 绪论 | 第15-29页 |
1.1 选题依据及意义 | 第15-16页 |
1.2 共轭亚油酸的概述 | 第16-17页 |
1.3 共轭亚油酸的天然来源 | 第17-18页 |
1.4 共轭亚油酸的生理功能 | 第18-20页 |
1.4.1 抗癌作用 | 第18页 |
1.4.2 抗动脉粥样硬化 | 第18-19页 |
1.4.3 预防心脑血管疾病 | 第19页 |
1.4.4 抗氧化 | 第19页 |
1.4.5 增强免疫力 | 第19-20页 |
1.4.6 其他功能 | 第20页 |
1.5 共轭亚油酸的人工合成 | 第20-23页 |
1.5.1 化学合成法 | 第20-21页 |
1.5.2 生物合成法 | 第21-23页 |
1.6 亚油酸异构酶的研究进展 | 第23-25页 |
1.7 共轭亚油酸的检测方法 | 第25-27页 |
1.7.1 紫外分光光度法 | 第25页 |
1.7.2 红外光谱检测法 | 第25页 |
1.7.3 气相色谱法 | 第25-26页 |
1.7.4 银离子高效液相色谱法 | 第26页 |
1.7.5 气质联用法 | 第26页 |
1.7.6 核磁共振法 | 第26-27页 |
1.8 本课题研究内容及创新点 | 第27-29页 |
1.8.1 研究内容 | 第27-28页 |
1.8.2 技术路线 | 第28页 |
1.8.3 创新点 | 第28-29页 |
第2章 三株乳酸菌产亚油酸异构酶的诱导培养 | 第29-37页 |
2.1 实验材料 | 第29-31页 |
2.1.1 菌种 | 第29页 |
2.1.2 主要实验试剂 | 第29-30页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第30页 |
2.1.4 嗜酸乳杆菌MRS培养基 | 第30-31页 |
2.1.5 植物乳杆菌MRS培养基 | 第31页 |
2.2 实验方法 | 第31-33页 |
2.2.1 菌种活化 | 第31页 |
2.2.2 种子培养 | 第31页 |
2.2.3 诱导物添加量对三株乳酸菌产亚油酸异构酶的影响 | 第31页 |
2.2.4 菌体细胞收集 | 第31-32页 |
2.2.5 粗酶液的制备 | 第32页 |
2.2.6 亚油酸乳化液的制备 | 第32页 |
2.2.7 酶促反应及酶活的测定 | 第32页 |
2.2.8 共轭亚油酸的萃取 | 第32-33页 |
2.2.9 共轭亚油酸标准曲线的绘制 | 第33页 |
2.3 结果与分析 | 第33-36页 |
2.3.1 共轭亚油酸标准曲线的绘制 | 第33-34页 |
2.3.2 诱导物添加量对三株乳酸菌产亚油酸异构酶的影响 | 第34-36页 |
2.4 小结与讨论 | 第36-37页 |
第3章 三株乳酸菌亚油酸异构酶的分离纯化 | 第37-49页 |
3.1 实验材料 | 第37-40页 |
3.1.1 菌种 | 第37页 |
3.1.2 主要实验试剂 | 第37-39页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第39页 |
3.1.4 嗜酸乳杆菌MRS培养基(略) | 第39页 |
3.1.5 植物乳杆菌MRS培养基(略) | 第39页 |
3.1.6 嗜酸乳杆菌(Lactibacillus acidophilus)CGMCC1.1854产酶培养基 | 第39-40页 |
3.1.7 植物乳杆菌(Lactibacillus plantarum)CGMCC1.557产酶培养基 | 第40页 |
3.1.8 植物乳杆菌(Lactibacillus plantarum)3-9 产酶培养基 | 第40页 |
3.2 实验方法 | 第40-43页 |
3.2.1 考马斯亮蓝法绘制蛋白质标准曲线 | 第40页 |
3.2.2 考马斯亮蓝法测定样品蛋白质含量 | 第40页 |
3.2.3 菌种活化(略) | 第40-41页 |
3.2.4 种子培养(略) | 第41页 |
3.2.5 三株乳酸菌产亚油酸异构酶的诱导培养 | 第41页 |
3.2.6 菌体细胞收集(略) | 第41页 |
3.2.7 粗酶液的制备(略) | 第41页 |
3.2.8 三株菌粗酶液的硫酸铵分级沉淀处理 | 第41页 |
3.2.9 三株菌酶液的透析处理 | 第41-42页 |
3.2.10 三株菌酶液的浓缩处理 | 第42页 |
3.2.11 三株菌酶液的凝胶过滤层析 | 第42-43页 |
3.3 结果与分析 | 第43-48页 |
3.3.1 考马斯亮蓝法绘制蛋白质标准曲线 | 第43-44页 |
3.3.2 三株菌粗酶液的硫酸铵分级沉淀处理 | 第44-45页 |
3.3.3 三株菌酶液的凝胶过滤层析 | 第45-47页 |
3.3.4 三株菌亚油酸异构酶的电泳分析 | 第47-48页 |
3.4 小结与讨论 | 第48-49页 |
第4章 三株乳酸菌亚油酸异构酶酶学性质的分析比较 | 第49-60页 |
4.1 实验材料 | 第49-51页 |
4.1.1 菌种 | 第49页 |
4.1.2 主要实验试剂 | 第49-50页 |
4.1.3 主要仪器设备 | 第50-51页 |
4.2 实验方法 | 第51-53页 |
4.2.1 粗酶液的制备(略) | 第51页 |
4.2.2 三株菌粗酶液的硫酸铵分级沉淀 | 第51页 |
4.2.3 三株菌酶液的透析(略) | 第51页 |
4.2.4 三株菌酶液的浓缩(略) | 第51页 |
4.2.5 三株菌酶液的凝胶过滤层析 | 第51-52页 |
4.2.6 三株乳酸菌亚油酸异构酶酶学性质的分析比较 | 第52-53页 |
4.3 结果与分析 | 第53-58页 |
4.3.1 温度对三株乳酸菌亚油酸异构酶活性的影响 | 第53页 |
4.3.2 三株乳酸菌亚油酸异构酶热稳定性的比较 | 第53-56页 |
4.3.3 pH对三株乳酸菌亚油酸异构酶活性的影响 | 第56页 |
4.3.4 三株乳酸菌亚油酸异构酶酸碱稳定性的比较 | 第56-57页 |
4.3.5 三株乳酸菌亚油酸异构酶的动力学参数 | 第57-58页 |
4.4 小结与讨论 | 第58-60页 |
第5章 亚油酸异构酶转化菜油脚料生成共轭亚油酸的工艺研究 | 第60-72页 |
5.1 实验材料 | 第60-62页 |
5.1.1 菌种 | 第60-61页 |
5.1.2 主要实验试剂 | 第61页 |
5.1.3 主要仪器设备 | 第61-62页 |
5.2 实验方法 | 第62-64页 |
5.2.1 亚油酸乳化液的制备 | 第62页 |
5.2.2 菜油脚料乳化液的制备 | 第62页 |
5.2.3 共轭亚油酸的萃取(略) | 第62页 |
5.2.4 三株菌酶促亚油酸生成共轭亚油酸活力的比较 | 第62页 |
5.2.5 三株菌酶促菜油脚料生成共轭亚油酸活力的比较 | 第62-63页 |
5.2.6 底物添加量对 3-9 菌株的酶促菜油脚料生成CLA的影响 | 第63页 |
5.2.7 缓冲液种类对 3-9 菌株的酶促菜油脚料生成CLA的影响 | 第63页 |
5.2.8 转化时间对 3-9 菌株的酶促菜油脚料生成CLA的影响 | 第63-64页 |
5.2.9 振荡速度对 3-9 菌株的酶促菜油脚料生成CLA的影响 | 第64页 |
5.2.10 正交分析优化 3-9 菌株的酶促菜油脚料生成CLA的条件 | 第64页 |
5.3 结果与分析 | 第64-71页 |
5.3.1 三株菌酶促亚油酸生成共轭亚油酸活力的比较 | 第64-65页 |
5.3.2 三株菌酶促菜油脚料生成共轭亚油酸活力的比较 | 第65-66页 |
5.3.3 底物添加量对 3-9 菌株的酶促菜油脚料生成CLA的影响 | 第66-67页 |
5.3.4 缓冲液种类对 3-9 菌株的酶促菜油脚料生成CLA的影响 | 第67-68页 |
5.3.5 转化时间对 3-9 菌株的酶促菜油脚料生成CLA的影响 | 第68-69页 |
5.3.6 振荡速度对 3-9 菌株的酶促菜油脚料生成CLA的影响 | 第69-70页 |
5.3.7 正交分析优化 3-9 菌株的酶促菜油脚料生成CLA的条件 | 第70-71页 |
5.4 小结与讨论 | 第71-72页 |
第6章 影响植物乳杆菌 3-9 酶促菜油脚料生成共轭亚油酸因素的研究 | 第72-78页 |
6.1 实验材料 | 第72-74页 |
6.1.1 菌种 | 第72页 |
6.1.2 主要实验试剂 | 第72-73页 |
6.1.3 主要仪器设备 | 第73-74页 |
6.2 实验方法 | 第74-75页 |
6.2.1 菜油脚料乳化液的制备(略) | 第74页 |
6.2.2 共轭亚油酸的萃取(略) | 第74页 |
6.2.3 3-9 菌株的酶促菜油脚料生成CLA体系的建立 | 第74页 |
6.2.4 辅酶因子对 3-9 菌株的酶促菜油脚料生成CLA的影响 | 第74页 |
6.2.5 金属离子对 3-9 菌株的酶促菜油脚料生成CLA的影响 | 第74页 |
6.2.6 螯合剂对 3-9 菌株的酶促菜油脚料生成CLA的影响 | 第74-75页 |
6.2.7 3-9 菌株的酶促菜油脚料生成CLA激活剂的筛选 | 第75页 |
6.3 结果与分析 | 第75-77页 |
6.3.1 辅酶因子对 3-9 菌株的酶促菜油脚料生成CLA的影响 | 第75-76页 |
6.3.2 金属离子对 3-9 菌株的酶促菜油脚料生成CLA的影响 | 第76页 |
6.3.3 螯合剂对 3-9 菌株的酶促菜油脚料生成CLA的影响 | 第76-77页 |
6.3.4 3-9 菌株的酶促菜油脚料生成CLA激活剂的筛选 | 第77页 |
6.4 小结与讨论 | 第77-78页 |
第7章 结论与展望 | 第78-81页 |
7.1 结论 | 第78-80页 |
7.1.1 三株乳酸菌产亚油酸异构酶的诱导培养 | 第78页 |
7.1.2 三株乳酸菌亚油酸异构酶的分离纯化 | 第78页 |
7.1.3 三株乳酸菌亚油酸异构酶酶学性质的分析比较 | 第78-79页 |
7.1.4 亚油酸异构酶转化菜油脚料生成共轭亚油酸的工艺研究 | 第79页 |
7.1.5 影响植物乳杆菌 3-9 酶促菜油脚料生成共轭亚油酸因素的研究 | 第79-80页 |
7.2 展望 | 第80-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-89页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第89页 |