| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 研究综述 | 第7-19页 |
| 1.1 捕食线虫真菌的生物防治 | 第7-10页 |
| 1.1.1 线虫的危害 | 第7-8页 |
| 1.1.2 捕食线虫真菌—线虫的克星 | 第8-9页 |
| 1.1.3 寡孢节丛孢的研究现状 | 第9-10页 |
| 1.2 小RNA的简介及功能研究进展 | 第10-19页 |
| 1.2.1 小RNA的种类 | 第11-12页 |
| 1.2.2 小RNA的生成途径 | 第12-14页 |
| 1.2.3 小RNA生成途径中的关键蛋白因子 | 第14页 |
| 1.2.4 小RNA的作用机制 | 第14-16页 |
| 1.2.5 小RNA的功能及应用 | 第16-19页 |
| 第二章 MilRNAs编码基因敲除载体的构建 | 第19-31页 |
| 2.1 前言 | 第19-20页 |
| 2.2 实验用品及仪器 | 第20-22页 |
| 2.2.1 实验菌株和质粒 | 第20页 |
| 2.2.2 实验所用的培养基 | 第20-21页 |
| 2.2.3 实验药品及试剂 | 第21页 |
| 2.2.4 主要仪器及设备 | 第21-22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-25页 |
| 2.3.1 敲除片段的引物设计 | 第22页 |
| 2.3.2 寡孢节丛孢总DNA提取 | 第22页 |
| 2.3.3 质粒pSCN44的提取 | 第22页 |
| 2.3.4 扩增目的片段 | 第22-24页 |
| 2.3.5 扩增及酶切基因的胶回收 | 第24页 |
| 2.3.6 酵母感受态制备及电转 | 第24-25页 |
| 2.3.7 酵母转化子质粒提取 | 第25页 |
| 2.4 实验结果 | 第25-29页 |
| 2.4.1 寡孢节丛孢中2个milRNAs编码基因同源片段及hph扩增 | 第25-26页 |
| 2.4.2 pRS426质粒酶切结果 | 第26页 |
| 2.4.3 酵母的电转结果 | 第26-27页 |
| 2.4.4 验证酵母转化子 | 第27-29页 |
| 2.5 讨论与小结 | 第29-31页 |
| 第三章 寡孢节丛孢原生质体转化和验证 | 第31-41页 |
| 3.1 前言 | 第31页 |
| 3.2 实验用品及仪器 | 第31-32页 |
| 3.2.1 实验菌株 | 第31页 |
| 3.2.2 主要溶液及培养基 | 第31-32页 |
| 3.2.3 药品及试剂 | 第32页 |
| 3.2.4 主要仪器及设备 | 第32页 |
| 3.3 实验方法 | 第32-35页 |
| 3.3.1 敲除载体全长片段扩增及回收 | 第32页 |
| 3.3.2 寡孢节丛孢原生质体的制备 | 第32页 |
| 3.3.3 寡孢节丛孢原生质体的转化 | 第32-33页 |
| 3.3.4 寡孢节丛孢敲除转化子基因组提取 | 第33页 |
| 3.3.5 敲除转化子的PCR验证 | 第33页 |
| 3.3.6 敲除转化子的Southern blot验证 | 第33-35页 |
| 3.4 实验结果 | 第35-39页 |
| 3.4.1 原生质体转化子验证 | 第35-36页 |
| 3.4.2 Southern blot验证敲除株 | 第36-39页 |
| 3.5 讨论与小结 | 第39-41页 |
| 第四章 寡孢节丛孢野生型菌株与敲除菌株的表型比较 | 第41-61页 |
| 4.1 前言 | 第41页 |
| 4.2 实验用品及仪器 | 第41-42页 |
| 4.2.1 实验菌株 | 第41页 |
| 4.2.2 主要培养基 | 第41页 |
| 4.2.3 主要药品 | 第41页 |
| 4.2.4 主要仪器及设备 | 第41-42页 |
| 4.3 实验方法 | 第42-43页 |
| 4.3.1 生长速率的比较 | 第42页 |
| 4.3.2 孢子产生的比较 | 第42页 |
| 4.3.3 产捕器比较 | 第42-43页 |
| 4.3.4 抗逆生长情况比较 | 第43页 |
| 4.4 实验结果 | 第43-59页 |
| 4.4.1 生长速率比较 | 第43-48页 |
| 4.4.2 孢子产生的比较 | 第48-49页 |
| 4.4.3 产捕器比较 | 第49-54页 |
| 4.4.4 抗逆生长情况比较 | 第54-59页 |
| 4.5 讨论与小结 | 第59-61页 |
| 第五章 MilRNAs 764、799靶基因及其功能预测 | 第61-67页 |
| 5.1 MilRNAs 764、799靶基因的预测 | 第61-63页 |
| 5.2 MilRNAs 764、799靶基因功能的预测 | 第63-65页 |
| 5.3 小结及展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-70页 |
| 附录 | 第70-72页 |
| 硕士期间发表论文及所获奖励 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
