摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
1 序言 | 第12-35页 |
1.1 Synechocystis 6803遗传特征 | 第12-13页 |
1.2 蓝细菌膜系统的介绍 | 第13-17页 |
1.3 Synechocystis 6803营养类型 | 第17-18页 |
1.4 蓝细菌的CO_2浓缩机制 | 第18-21页 |
1.5 蓝细菌捕光系统 | 第21-22页 |
1.6 蓝细菌组学的研究 | 第22-29页 |
1.6.1 蓝细菌基因组学研究 | 第22-23页 |
1.6.2 蓝细菌转录组学 | 第23-24页 |
1.6.3 蓝细菌蛋白组学研究 | 第24-27页 |
1.6.4 代谢组学研究 | 第27-28页 |
1.6.5 组学的交叉应用 | 第28-29页 |
1.7 蓝细菌研究中常用的数据库 | 第29-30页 |
1.8 Synechocystis 6803碳代谢特征及研究进展 | 第30-34页 |
1.9 本课题的研究目的与意义 | 第34-35页 |
2 Slr0280的功能及结构研究 | 第35-108页 |
2.1 序言 | 第35-36页 |
2.2 实验材料 | 第36-41页 |
2.2.1 菌种与质粒 | 第36页 |
2.2.2 培养基 | 第36-37页 |
2.2.3 试剂 | 第37-38页 |
2.2.4 试剂配制 | 第38-40页 |
2.2.5 实验仪器 | 第40-41页 |
2.3 实验方法 | 第41-74页 |
2.3.1 藻基因组DNA的提取 | 第41页 |
2.3.2 小量感受态细胞的制备及转化 | 第41-42页 |
2.3.3 碱裂解法小量质粒的提取 | 第42页 |
2.3.4 突变体的构建 | 第42-45页 |
2.3.5 突变体的筛选 | 第45页 |
2.3.6 不同条件下的培养 | 第45-46页 |
2.3.7 生长曲线的测定 | 第46页 |
2.3.8 细胞内叶绿素a含量的测定 | 第46页 |
2.3.9 葡萄糖摄取的测定 | 第46-48页 |
2.3.10 细胞内糖原含量的测定 | 第48页 |
2.3.11 藻细胞的电镜观测 | 第48页 |
2.3.12 光合作用活性的测定 | 第48-49页 |
2.3.13 Slr0280细胞定位分析 | 第49-52页 |
2.3.14 转录水平分析 | 第52-57页 |
2.3.15 蛋白组学分析 | 第57-66页 |
2.3.16 酶活性分析 | 第66-67页 |
2.3.17 Slr0280的系统进化树分析 | 第67页 |
2.3.18 Slr0280相互作用亚文库的筛选 | 第67-72页 |
2.3.19 Slr0280的晶体结构研究 | 第72-74页 |
2.3.19.1 Slr0280的表达与纯化 | 第72页 |
2.3.19.2 Slr0280中甲硫氨酸硒代化表达与纯化 | 第72-73页 |
2.3.19.3 Slr0280结晶条件的筛选及优化 | 第73-74页 |
2.3.19.4 晶体衍射数据的收集及处理 | 第74页 |
2.4 结果与分析 | 第74-105页 |
2.4.1 突变体的筛选与鉴定 | 第74-75页 |
2.4.2 不同条件下?slr0280的生长曲线的测定 | 第75-79页 |
2.4.3 slr0280对其邻近基因无极性效应 | 第79页 |
2.4.4 互补及超表达实验 | 第79-80页 |
2.4.5 Slr0280对葡萄糖的利用具有正调控作用 | 第80-81页 |
2.4.6 ?slr0280糖原含量高于WT | 第81-84页 |
2.4.7 Slr0280对OPP途径具有正调节作用 | 第84页 |
2.4.8 Slr0280影响细胞的光合作用活性 | 第84-86页 |
2.4.9 混养条件下?slr0280中相关基因的转录水平变化 | 第86-92页 |
2.4.10 混养条件下?slr0280中的蛋白组学水平变化 | 第92-97页 |
2.4.11 Slr0280是一个含多结构域的保守的周质蛋白 | 第97-100页 |
2.4.12 Slr0280相互作用蛋白的筛选 | 第100-102页 |
2.4.13 Slr0280的晶体结构 | 第102-105页 |
2.5 总结 | 第105-108页 |
3 Synechocystis 6803 AP-B中ApcD的定点突变 | 第108-125页 |
3.1 序言 | 第108-110页 |
3.2 材料与方法 | 第110页 |
3.2.1 菌种与质粒 | 第110页 |
3.2.2 培养基 | 第110页 |
3.2.3 试剂 | 第110页 |
3.2.4 溶液配制 | 第110页 |
3.2.5 实验仪器 | 第110页 |
3.3 实验方法 | 第110-113页 |
3.3.1 APC(AP-B),CPC生物信息学分析 | 第110-111页 |
3.3.2 ApcD突变体的构建 | 第111-112页 |
3.3.3 ApcD与PCB的体内重组 | 第112页 |
3.3.4 色素化ApcD的表达与纯化 | 第112页 |
3.3.5 ApcD的光谱测定 | 第112页 |
3.3.6 摩尔消光系数及荧光量子产率的计算 | 第112-113页 |
3.3.7 聚集态的确定 | 第113页 |
3.4 结果与分析 | 第113-123页 |
3.4.1 APC(AP-B),CPC生物信息学分析 | 第113-115页 |
3.4.2 ApcD突变体的克隆及表达 | 第115-116页 |
3.4.3 ApcD色素结合类型的确定 | 第116-117页 |
3.4.4 ApcD突变体的光谱特征 | 第117-121页 |
3.4.5 ApcD及其突变体的聚集态分析 | 第121-122页 |
3.4.6 尿素对ApcD及其突变的影响 | 第122-123页 |
3.5 总结 | 第123-125页 |
参考文献 | 第125-142页 |
附录1 攻读博士期间发表的学术论文 | 第142-143页 |
附录2 文章中主要载体的图谱 | 第143-146页 |
致谢 | 第146-147页 |