英文缩略词表 | 第7-9页 |
摘要 | 第9-10页 |
abstract | 第10页 |
1 前言 | 第11-21页 |
1.1 伪狂犬病 | 第11页 |
1.2 伪狂犬病病毒 | 第11-12页 |
1.2.1 病毒粒子基本结构 | 第11-12页 |
1.2.2 病毒基因组 | 第12页 |
1.3 gB蛋白研究进展 | 第12-13页 |
1.4 其它糖蛋白研究进展 | 第13-17页 |
1.4.1 必需糖蛋白 | 第13-15页 |
1.4.2 非必需糖蛋白 | 第15-17页 |
1.5 单克隆抗体技术应用 | 第17页 |
1.6 B细胞抗原表位研究进展 | 第17-19页 |
1.6.1 抗原表位预测法 | 第18页 |
1.6.2 生物合成肽法 | 第18-19页 |
1.6.3 噬菌体肽库法 | 第19页 |
1.7 研究目的和意义 | 第19-21页 |
2 猪伪狂犬病病毒HeN1株gB蛋白单克隆抗体制备及鉴定 | 第21-39页 |
2.1 实验材料 | 第21-22页 |
2.1.1 实验动物 | 第21页 |
2.1.2 毒株、细胞、菌株、质粒和单克隆抗体 | 第21页 |
2.1.3 试剂、耗材及试剂盒 | 第21-22页 |
2.1.4 实验仪器 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-29页 |
2.2.1 病毒的纯化 | 第22-23页 |
2.2.2 gB的真核表达 | 第23页 |
2.2.3 间接免疫荧光(IFA)检测方法的建立 | 第23-24页 |
2.2.4 BALB/c小鼠的免疫 | 第24页 |
2.2.5 细胞融合及杂交瘤细胞株的筛选 | 第24-26页 |
2.2.6 单克隆抗体腹水的制备 | 第26页 |
2.2.7 单克隆抗体的生物学特性鉴定 | 第26-29页 |
2.3 实验结果及分析 | 第29-35页 |
2.3.1 免疫原的鉴定 | 第29页 |
2.3.2 免疫后小鼠血清的鉴定 | 第29-30页 |
2.3.3 杂交瘤细胞株的筛选 | 第30-31页 |
2.3.4 单克隆抗体的生物学特性分析 | 第31-35页 |
2.4 讨论 | 第35-37页 |
2.5 小结 | 第37-39页 |
3 猪伪狂犬病病毒HeN1株gB蛋白B细胞线性表位的鉴定 | 第39-51页 |
3.1 实验材料 | 第39-40页 |
3.1.1 菌株和载体 | 第39页 |
3.1.2 试剂、耗材及试剂盒 | 第39页 |
3.1.3 实验仪器 | 第39-40页 |
3.2 实验方法 | 第40-45页 |
3.2.1 实验截短方案及引物设计 | 第40-41页 |
3.2.2 Westernblot鉴定gB糖蛋白B细胞表位 | 第41-45页 |
3.2.3 抗原表位的保守性分析 | 第45页 |
3.3 实验结果及分析 | 第45-50页 |
3.3.1 gB各截短片段的PCR扩增 | 第45页 |
3.3.2 gB各重组质粒的酶切鉴定 | 第45-46页 |
3.3.3 单克隆抗体识别gB糖蛋白表位的鉴定 | 第46-47页 |
3.3.4 抗原表位的保守性分析 | 第47-49页 |
3.3.5 gB抗原表位的突变验证 | 第49-50页 |
3.4 讨论 | 第50页 |
3.5 小结 | 第50-51页 |
4 结论 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-63页 |
附录 | 第63-65页 |
致谢 | 第65-67页 |
个人简历 | 第67页 |