| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 1 文献综述 | 第15-43页 |
| 1.1 猪流行性腹泻病毒概述 | 第15-21页 |
| 1.1.1 猪流行性腹泻病毒简介 | 第15页 |
| 1.1.2 PEDV的生物学特性 | 第15-18页 |
| 1.1.3 PEDV流行病学 | 第18页 |
| 1.1.4 PEDV的诊断 | 第18-20页 |
| 1.1.5 PEDV的防治 | 第20-21页 |
| 1.2 SIgA与粘膜免疫 | 第21-23页 |
| 1.2.1 粘膜免疫 | 第21页 |
| 1.2.2 SIgA结构及其功能 | 第21-23页 |
| 1.3 胶体金免疫层析技术 | 第23-26页 |
| 1.3.1 胶体金概述 | 第23页 |
| 1.3.2 胶体金免疫层析技术 | 第23-24页 |
| 1.3.3 胶体金免疫检测技术的主要模式 | 第24-25页 |
| 1.3.4 胶体金免疫层析试纸条在猪病方面的主要研究进展 | 第25页 |
| 1.3.5 胶体金免疫层析试纸条检测的优点 | 第25-26页 |
| 1.4 目的和意义 | 第26-27页 |
| 2.材料与方法 | 第27-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-28页 |
| 2.1.1 细胞、SIgA蛋白和实验动物 | 第27页 |
| 2.1.2 主要试剂与耗材 | 第27页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第27页 |
| 2.1.4 主要培养基的配制 | 第27-28页 |
| 2.2 方法 | 第28-43页 |
| 2.2.1 猪SC基因的扩增 | 第28-30页 |
| 2.2.2 重组质粒的构建及鉴定 | 第30-31页 |
| 2.2.3 猪SC蛋白的真核表达及鉴定 | 第31-33页 |
| 2.2.4 免疫原SIgA的制备 | 第33页 |
| 2.2.5 免疫原SIgA的鉴定 | 第33-34页 |
| 2.2.6 抗猪SIgA单克隆抗体的制备 | 第34-37页 |
| 2.2.7 猪SIgA单克隆抗体免疫活性的鉴定 | 第37-38页 |
| 2.2.8 玻璃器皿的清洗和硅化 | 第38页 |
| 2.2.9 胶体金溶液的制备 | 第38页 |
| 2.2.10 胶体金与抗SC单克隆抗体结合物的制备 | 第38-39页 |
| 2.2.11 PEDV病毒的繁殖与纯化 | 第39页 |
| 2.2.12 胶体金试纸条T线和C线浓度的确定 | 第39-40页 |
| 2.2.13 胶体金试纸条的组装 | 第40页 |
| 2.2.14 胶体金试纸条结果的判定 | 第40-41页 |
| 2.2.15 胶体金试纸条的检测 | 第41-43页 |
| 3 结果 | 第43-53页 |
| 3.1 SC基因的扩增及重组质粒酶切结果 | 第43页 |
| 3.2 SC蛋白的鉴定结果 | 第43-44页 |
| 3.2.1 SC蛋白的IFA鉴定 | 第43页 |
| 3.2.2 SC蛋白westernblot鉴定 | 第43-44页 |
| 3.3 SIgA纯化结果 | 第44-45页 |
| 3.4 抗SIgA单克隆抗体的筛选及鉴定 | 第45-48页 |
| 3.4.1 阳性杂交瘤细胞株的筛选 | 第45页 |
| 3.4.2 阳性杂交瘤细胞株的IFA鉴定 | 第45-46页 |
| 3.4.3 阳性杂交瘤细胞株的westernblot鉴定 | 第46页 |
| 3.4.4 阳性杂交瘤细胞株效价的测定 | 第46-47页 |
| 3.4.5 小鼠腹水的纯化结果 | 第47页 |
| 3.4.6 阳性杂交瘤细胞株亚类的测定 | 第47-48页 |
| 3.5 胶体金溶液的制备及鉴定 | 第48-49页 |
| 3.5.1 胶体金溶液的制备 | 第48页 |
| 3.5.2 胶体金颗粒的鉴定 | 第48-49页 |
| 3.6 胶体金与单克隆抗体结合物的制备 | 第49页 |
| 3.6.1 胶体金与单克隆抗体结合最佳pH值的确定 | 第49页 |
| 3.6.2 胶体金与单克隆抗体结合最佳蛋白结合量的确定 | 第49页 |
| 3.7 胶体金试纸条T线和C线最佳浓度的确定 | 第49-50页 |
| 3.8 胶体金试纸条的检测 | 第50-52页 |
| 3.8.1 胶体金试纸条特异性的检测 | 第50页 |
| 3.8.2 胶体金试纸条重复性的检测 | 第50-51页 |
| 3.8.3 胶体金试纸条稳定性的检测 | 第51页 |
| 3.8.4 胶体金试纸条敏感性的检测 | 第51-52页 |
| 3.9 临床样品试验 | 第52-53页 |
| 4 结论 | 第53-57页 |
| 4.1 SC蛋白的表达 | 第53页 |
| 4.2 抗SIgA单克隆抗体的制备 | 第53-54页 |
| 4.3 胶体金试纸条的研制 | 第54-57页 |
| 5 结论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 个人简历 | 第70页 |
