摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第10-19页 |
1.1 海胆 | 第10页 |
1.2 多糖的生物活性 | 第10-14页 |
1.2.1 免疫调节作用 | 第10-11页 |
1.2.2 抗肿瘤作用 | 第11页 |
1.2.3 抗病毒作用 | 第11页 |
1.2.4 抗衰老作用 | 第11-12页 |
1.2.5 抗凝血作用 | 第12页 |
1.2.6 降血糖、降血脂作用 | 第12页 |
1.2.7 抗炎作用 | 第12-13页 |
1.2.8 成骨分化作用 | 第13-14页 |
1.3 海胆多糖活性研究现状 | 第14-15页 |
1.4 细胞成骨分化简介 | 第15-17页 |
1.4.1 BMP-2信号通路在细胞分化过程中的作用 | 第15-17页 |
1.4.2 成骨分化过程中重要诱导因子 | 第17页 |
1.5 立题背景及意义 | 第17-18页 |
1.6 研究内容 | 第18-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-31页 |
2.1 实验材料 | 第19-23页 |
2.1.1 实验原料 | 第19页 |
2.1.2 主要实验试剂 | 第19-21页 |
2.1.3 主要仪器和设备 | 第21-23页 |
2.2 虾夷马粪海胆生殖腺粗多糖的制备 | 第23-24页 |
2.2.1 蛋白酶-Sevag法脱蛋白 | 第23页 |
2.2.2 虾夷马粪海胆生殖腺粗多糖糖原去除 | 第23页 |
2.2.3 超滤分级 | 第23页 |
2.2.4 单糖组成分析 | 第23-24页 |
2.2.5 SUP的纯度鉴定 | 第24页 |
2.3 SUP对调控MC3T3-E1细胞成熟分化的影响 | 第24-29页 |
2.3.1 细胞培养 | 第24-25页 |
2.3.2 MTT法检测细胞增殖率 | 第25页 |
2.3.3 碱性磷酸酶(ALP)活性的测定 | 第25-26页 |
2.3.4 茜素红染色法检测矿化结节 | 第26页 |
2.3.5 骨钙素含量的检测 | 第26-27页 |
2.3.6 免疫荧光检测BMP-2与细胞的结合能力 | 第27页 |
2.3.7 Western blot检测MC3T3-E1细胞蛋白的表达 | 第27-29页 |
2.4 统计学分析 | 第29-31页 |
第三章 结果与讨论 | 第31-58页 |
3.1 虾夷马粪海胆生殖腺多糖的性质 | 第31-34页 |
3.1.1 PMP柱前衍生法测定SUP的单糖组成 | 第31-33页 |
3.1.2 SUP的纯度鉴定 | 第33-34页 |
3.2 MC3T3-E1细胞的形态学观察 | 第34-35页 |
3.3 SUP对小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖的影响 | 第35-37页 |
3.4 肝素对MC3T3-E1细胞碱性磷酸酶(ALP)的影响 | 第37-40页 |
3.5 SUP对MC3T3-E1细胞碱性磷酸酶(ALP)的影响 | 第40-44页 |
3.6 SUP对MC3T3-E1细胞矿化能力的影响 | 第44-45页 |
3.7 SUP对MC3T3-E1细胞分泌骨钙素含量的影响 | 第45-49页 |
3.8 免疫荧光检测BMP-2与细胞的结合能力 | 第49-51页 |
3.9 SUP对MC3T3-E1细胞功能蛋白表达的影响 | 第51-58页 |
3.9.1 SUP对MC3T3-E1细胞中BMP-2蛋白表达的影响 | 第51-54页 |
3.9.2 SUP对MC3T3-E1细胞中Runx-2蛋白表达的影响 | 第54-58页 |
第四章 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
附录 | 第67页 |