| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 1 文章综述 | 第10-14页 |
| 1.1 蚊虫OR研究进展 | 第10-12页 |
| 1.1.1 蚊虫嗅觉系统 | 第10页 |
| 1.1.2 蚊虫OR特点及特征 | 第10页 |
| 1.1.3 不同蚊种OR研究 | 第10-12页 |
| 1.2 RNAI技术在蚊虫中研究与应用 | 第12-14页 |
| 1.2.1 RNAi背景 | 第12页 |
| 1.2.2 RNAi作用分子机制 | 第12-13页 |
| 1.2.3 RNAi在蚊虫基因功能研究中的应用 | 第13-14页 |
| 2 不同OR在致倦库蚊发育阶段的表达 | 第14-29页 |
| 2.1 材料 | 第14页 |
| 2.1.1 供试蚊种 | 第14页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第14页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第14页 |
| 2.2 方法 | 第14-19页 |
| 2.2.1 不同生长阶段蚊虫及蚊虫头部收集 | 第14-15页 |
| 2.2.2 不同生长阶段蚊虫及蚊虫头部RNA提取 | 第15页 |
| 2.2.3 cDNA获得 | 第15-16页 |
| 2.2.4 PCR扩增气味受体(ORs)基因 | 第16页 |
| 2.2.5 电泳与测序 | 第16页 |
| 2.2.6 PCR产物的纯化 | 第16-17页 |
| 2.2.7 LB培养基的配制 | 第17-18页 |
| 2.2.8 连接及转化反应 | 第18页 |
| 2.2.9 重组质粒的筛选与鉴定 | 第18页 |
| 2.2.10 提取重组质粒 | 第18页 |
| 2.2.11 目标ORs基因及内参标准曲线的构建 | 第18-19页 |
| 2.2.12 不同ORs在致倦库蚊不同生长阶段实时荧光定量PCR分析 | 第19页 |
| 2.3 结果 | 第19-27页 |
| 2.3.1 气味受体(ORs)基因和内参标准曲线的建立 | 第19页 |
| 2.3.2 不同ORs基因在致倦库蚊不同生长阶段的表达分析 | 第19-20页 |
| 2.3.3 不同ORs基因在致倦库蚊同一生长阶段的表达比较 | 第20-21页 |
| 2.3.4 不同ORs基因在吸血情况不同蚊虫头部的表达分析 | 第21-27页 |
| 2.4 讨论与分析 | 第27-29页 |
| 3 致倦库蚊CQUIOR117的功能验证 | 第29-42页 |
| 3.1 材料 | 第29页 |
| 3.1.1 供试蚊种 | 第29页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第29页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第29页 |
| 3.2 方法 | 第29-33页 |
| 3.2.1 模板cDNA获得 | 第29-30页 |
| 3.2.2 体外合成dsRNA | 第30-31页 |
| 3.2.3 蚊虫的微量注射 | 第31-32页 |
| 3.2.4 微量注射dsRNA | 第32页 |
| 3.2.5 注射RNA后CquiOR117表达情况分析 | 第32页 |
| 3.2.6 蚊虫嗜血行为实验 | 第32-33页 |
| 3.3 结果 | 第33-39页 |
| 3.3.1 体外dsRNA合成情况 | 第33页 |
| 3.3.2 蚊虫不同麻醉方式效果 | 第33-34页 |
| 3.3.3 注射量及部位选择 | 第34-35页 |
| 3.3.4 RT-PCR检测注射RNA后蚊虫的干扰率 | 第35-36页 |
| 3.3.5 实时荧光定量PCR检测CquiOR117干扰后表达情况 | 第36-37页 |
| 3.3.6 蚊虫嗜血行为实验结果分析 | 第37-39页 |
| 3.4 讨论与分析 | 第39-42页 |
| 4 尖音库蚊复合组中气味受体基因克隆与比较 | 第42-70页 |
| 4.1 材料 | 第42页 |
| 4.1.1 供试蚊虫 | 第42页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第42页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第42页 |
| 4.2 方法 | 第42-44页 |
| 4.2.1 骚扰库蚊、淡色库蚊和致倦库蚊头部RNA的提取 | 第42-43页 |
| 4.2.2 骚扰库蚊、淡色库蚊和致倦库蚊头部气味受体基因(ORs)的扩增 | 第43页 |
| 4.2.3 PCR产物的回收与纯化 | 第43-44页 |
| 4.2.4 连接与转化 | 第44页 |
| 4.2.5 重组质粒的筛选与鉴定 | 第44页 |
| 4.2.6 尖音库蚊复合组气味受体基因测序结果处理 | 第44页 |
| 4.3 结果 | 第44-48页 |
| 4.3.1 致倦库蚊、骚扰库蚊和淡色库蚊气味受体基因克隆结果 | 第44-45页 |
| 4.3.2 尖音库蚊复合组蚊虫中亚种之间气味受体进化分析 | 第45页 |
| 4.3.3 致倦库蚊、骚扰库蚊和淡色库蚊气味受体氨基酸突变位点分析 | 第45-47页 |
| 4.3.4 尖音库蚊复合气味受体编码蛋白结构分析 | 第47-48页 |
| 4.4 讨论与分析 | 第48-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
