| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第14-29页 |
| 1.1 高尿酸血症、痛风及抗痛风活性物质 | 第14-17页 |
| 1.1.1 高尿酸血症及痛风概述 | 第14页 |
| 1.1.2 抗痛风活性物质 | 第14-17页 |
| 1.1.2.1 天然产物的抗痛风活性 | 第14-16页 |
| 1.1.2.2 多肽的抗痛风活性 | 第16-17页 |
| 1.2 黄嘌呤氧化酶及其测定方法 | 第17-20页 |
| 1.2.1 黄嘌呤氧化酶概述 | 第17-18页 |
| 1.2.2 黄嘌呤氧化酶酶活测定方法 | 第18-20页 |
| 1.3 磁性高分子微球概述 | 第20-27页 |
| 1.3.1 磁性高分子微球的组成与结构 | 第20-22页 |
| 1.3.2 磁性高分子微球的制备 | 第22-25页 |
| 1.3.2.1 包埋法 | 第22页 |
| 1.3.2.2 单体聚合法 | 第22-24页 |
| 1.3.2.3 原位合成法 | 第24-25页 |
| 1.3.3 磁性高分子微球的应用 | 第25-27页 |
| 1.3.3.1 药物靶向传递 | 第25-26页 |
| 1.3.3.2 蛋白质分离纯化 | 第26页 |
| 1.3.3.3 固定化酶和细胞 | 第26-27页 |
| 1.3.3.4 免疫检测 | 第27页 |
| 1.4 本课题的立题依据与研究内容 | 第27-29页 |
| 1.4.1 立题依据 | 第27-28页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第28-29页 |
| 第二章 筛选降尿酸肽的体外测定方法的建立与优化 | 第29-48页 |
| 2.1 引言 | 第29-30页 |
| 2.2 实验材料与试剂 | 第30-32页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第30页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第30-32页 |
| 2.3 实验方法 | 第32-33页 |
| 2.3.1 双酶偶联法测定XO活性 | 第32页 |
| 2.3.1.1 实验原理 | 第32页 |
| 2.3.1.2 全波长扫描 | 第32页 |
| 2.3.1.3 实验方法 | 第32页 |
| 2.3.2 高效液相色谱法测定尿酸含量 | 第32-33页 |
| 2.3.3 数据分析 | 第33页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第33-47页 |
| 2.4.1 双酶偶联分光光度法测定XO活性 | 第33-39页 |
| 2.4.1.1 全波长扫描 | 第33-34页 |
| 2.4.1.2 底物浓度的选择 | 第34-35页 |
| 2.4.1.3 黄嘌呤氧化酶酶活的选择 | 第35-36页 |
| 2.4.1.4 反应温度的选择 | 第36页 |
| 2.4.1.5 反应pH的选择 | 第36-37页 |
| 2.4.1.6 反应时间的选择 | 第37-38页 |
| 2.4.1.7 双酶偶联法稳定性实验 | 第38-39页 |
| 2.4.2 HPLC法测定黄嘌呤氧化酶酶活 | 第39-47页 |
| 2.4.2.1 尿酸、黄嘌呤和别嘌呤醇全波长扫描 | 第39页 |
| 2.4.2.2 HPLC法流动相的优化 | 第39-42页 |
| 2.4.2.3 尿酸标准曲线 | 第42-43页 |
| 2.4.2.4 HPLC法测定别嘌呤醇、非布司他及多肽的黄嘌呤氧化酶抑制活性 | 第43-44页 |
| 2.4.2.5 HPLC法与双酶偶联法精密度比较 | 第44-46页 |
| 2.4.2.6 HPLC法与双酶偶联法准确度比较 | 第46-47页 |
| 2.5 本章小结 | 第47-48页 |
| 第三章 磁性微球固定化黄嘌呤氧化酶的制备及性质研究 | 第48-64页 |
| 3.1 引言 | 第48-49页 |
| 3.2 实验材料与试剂 | 第49-50页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第49页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第49-50页 |
| 3.3 实验方法 | 第50-53页 |
| 3.3.1 磁性壳聚糖微球的制备 | 第50-51页 |
| 3.3.2 磁性壳聚糖微球的活化[95] | 第51页 |
| 3.3.3 磁性壳聚糖微球的结构表征 | 第51-52页 |
| 3.3.3.1 傅里叶红外光谱分析 | 第51页 |
| 3.3.3.2 粒径分析 | 第51页 |
| 3.3.3.3 热重分析 | 第51-52页 |
| 3.3.4 磁性微球固定化黄嘌呤氧化酶的制备 | 第52页 |
| 3.3.4.1 固定化工艺研究 | 第52页 |
| 3.3.4.2 磁性微球固定化黄嘌呤氧化酶酶活的测定 | 第52页 |
| 3.3.5 磁性微球固定化黄嘌呤氧化酶的酶学性质研究 | 第52-53页 |
| 3.3.5.1 固定化酶的最适反应温度 | 第52页 |
| 3.3.5.2 固定化酶的最适反应pH | 第52页 |
| 3.3.5.3 固定化酶的热稳定性 | 第52-53页 |
| 3.3.5.4 固定化酶的pH稳定性 | 第53页 |
| 3.3.5.5 固定化酶的重复使用性 | 第53页 |
| 3.3.5.6 固定化酶的储存稳定性 | 第53页 |
| 3.3.6 数据分析 | 第53页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第53-63页 |
| 3.4.1 磁性壳聚糖微球的活化 | 第53-56页 |
| 3.4.1.1 环氧氯丙烷体积分数对磁性壳聚糖微球表面环氧基密度的影响 | 第53-54页 |
| 3.4.1.2 NaBH_4浓度对磁性壳聚糖微球表面环氧基密度的影响 | 第54-55页 |
| 3.4.1.3 NaOH浓度对磁性壳聚糖微球表面环氧基密度的影响 | 第55-56页 |
| 3.4.2 磁性壳聚糖微球的结构表征 | 第56-59页 |
| 3.4.2.1 傅里叶红外光谱分析 | 第56-57页 |
| 3.4.2.2 粒径分析 | 第57-58页 |
| 3.4.2.3 热重分析 | 第58-59页 |
| 3.4.3 磁性微球固定化黄嘌呤氧化酶的制备 | 第59-61页 |
| 3.4.3.1 最适固定化反应时间 | 第59页 |
| 3.4.3.2 最适固定化反应温度 | 第59-60页 |
| 3.4.3.3 最适固定化反应pH | 第60-61页 |
| 3.4.4 磁性微球固定化黄嘌呤氧化酶的酶学性质 | 第61-63页 |
| 3.4.4.1 固定化酶的最适反应温度 | 第61页 |
| 3.4.4.2 固定化酶的最适反应pH | 第61页 |
| 3.4.4.3 固定化酶的热稳定性 | 第61页 |
| 3.4.4.4 固定化酶的pH稳定性 | 第61页 |
| 3.4.4.5 固定化酶的重复使用性 | 第61-63页 |
| 3.4.4.6 固定化酶的储存稳定性 | 第63页 |
| 3.5 本章小结 | 第63-64页 |
| 第四章 磁性微球固定化黄嘌呤氧化酶的应用研究 | 第64-79页 |
| 4.1 引言 | 第64页 |
| 4.2 实验材料与试剂 | 第64-66页 |
| 4.2.1 实验仪器 | 第64-65页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第65-66页 |
| 4.3 实验方法 | 第66-68页 |
| 4.3.1 磁性微球固定化黄嘌呤氧化酶吸附别嘌呤醇 | 第66-67页 |
| 4.3.1.1 亲和吸附与洗脱 | 第66页 |
| 4.3.1.2 别嘌呤醇吸附量计算 | 第66-67页 |
| 4.3.1.3 别嘌呤醇含量测定 | 第67页 |
| 4.3.1.4 高效液相色谱测定洗脱液组分 | 第67页 |
| 4.3.2 磁性微球固定化黄嘌呤氧化酶吸附还原型谷胱甘肽 | 第67-68页 |
| 4.3.2.1 亲和吸附与洗脱 | 第67页 |
| 4.3.2.2 还原型谷胱甘肽吸附量计算 | 第67-68页 |
| 4.3.2.3 还原型谷胱甘肽含量测定 | 第68页 |
| 4.3.2.4 高效液相色谱测定洗脱液组分 | 第68页 |
| 4.3.3 数据分析 | 第68页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第68-77页 |
| 4.4.1 磁性微球固定化黄嘌呤氧化酶吸附别嘌呤醇 | 第68-72页 |
| 4.4.1.1 别嘌呤醇标准曲线 | 第68-69页 |
| 4.4.1.3 别嘌呤醇的浓度对吸附量的影响 | 第69页 |
| 4.4.1.4 吸附时间对吸附量的影响 | 第69-70页 |
| 4.4.1.5 吸附温度对吸附量的影响 | 第70-71页 |
| 4.4.1.6 缓冲液pH对吸附量的影响 | 第71-72页 |
| 4.4.2 磁性微球固定化黄嘌呤氧化酶吸附GSH | 第72-77页 |
| 4.4.2.1 GSH测定方法优化 | 第72页 |
| 4.4.2.2 GSH初始浓度对吸附量的影响 | 第72-73页 |
| 4.4.2.3 吸附时间对吸附量的影响 | 第73-74页 |
| 4.4.2.4 吸附温度对吸附量的影响 | 第74-75页 |
| 4.4.2.5 吸附pH对吸附量的影响 | 第75-76页 |
| 4.4.2.6 不同洗脱剂对GSH的洗脱效果 | 第76页 |
| 4.4.2.7 对GSH的吸附机理研究 | 第76-77页 |
| 4.5 本章小结 | 第77-79页 |
| 结论与展望 | 第79-81页 |
| 一、结论 | 第79-80页 |
| 二、论文创新点 | 第80页 |
| 三、展望 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-90页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91-93页 |
| 附件 | 第93页 |
