摘要 | 第3-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
第1章 前言 | 第16-19页 |
第2章 材料与方法 | 第19-34页 |
2.1 实验材料 | 第19-21页 |
2.1.1 实验细胞 | 第19页 |
2.1.2 试验药物 | 第19页 |
2.1.3 主要试剂 | 第19-20页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-34页 |
2.2.1 CIA大鼠滑膜细胞的培养 | 第21-22页 |
2.2.2 实验分组 | 第22页 |
2.2.3 MIT检测瑞香素和5-aza-Dc对CIA大鼠滑膜细胞增殖的抑制作用 | 第22-24页 |
2.2.4 甲基化特异性PCR(MSP)检测CIA大鼠滑膜细胞促凋亡基因DR3、PDCD5、FasL及p53的甲基化状态 | 第24-26页 |
2.2.5 实时荧光定量RT-PCR检测CIA大鼠滑膜细胞促凋亡基DR3、PDCD5、p53、FasL及甲基化转移酶DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的mRNA表达情况 | 第26-29页 |
2.2.6 流式细胞术检测CIA大鼠滑膜细胞促凋亡基因DR3、PDCD5、FasL和p53的蛋白表达情况 | 第29页 |
2.2.7 PI染色荧光显微镜观察各实验组CIA大鼠滑膜细胞的凋亡情况 | 第29-30页 |
2.2.8 Annexin V/PI双染流式细胞术检测各实验组CIA大鼠滑膜细胞凋亡率的改变 | 第30页 |
2.2.9 扫描电镜观察CIA大鼠滑膜细胞表面结构改变 | 第30-31页 |
2.2.10 透射电镜观察CIA大鼠滑膜细胞超微结构病变 | 第31-33页 |
2.2.11 统计学处理 | 第33-34页 |
第3章 结果 | 第34-47页 |
3.1 瑞香素与5-aza-Dc对CIA大鼠滑膜细胞增殖的抑制作用 | 第34-36页 |
3.1.1 瑞香素对CIA大鼠滑膜细胞增殖的抑制作用 | 第34-35页 |
3.1.2 5-aza-Dc对CIA大鼠滑膜细胞增殖的抑制作用 | 第35-36页 |
3.2 瑞香素对CIA大鼠滑膜细胞促凋亡基因DR3、PDCD5、FasL及p53的去甲基化作用 | 第36-37页 |
3.3 瑞香素对CIA大鼠滑膜细胞促凋亡基因DR3、PDCD5、FasL、p53及甲基化转移酶DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA表达的影响 | 第37-42页 |
3.3.1 RNA纯度鉴定 | 第37页 |
3.3.2 RNA完整性鉴定 | 第37-38页 |
3.3.3 RT-PCR测定β-actin、DR3、PDCD5、FasL、p53及DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA的熔解曲线 | 第38页 |
3.3.4 RT-PCR测定β-actin、DR3、PDCD5、FasL、p53及DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA的扩增曲线 | 第38-39页 |
3.3.5 瑞香素对CIA大鼠滑膜细胞促凋亡基因DR3、p53、PDCD5、FasL及甲基化转移酶DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA表达的影响 | 第39-42页 |
3.4 流式细胞仪检测CIA大鼠滑膜细胞促凋亡基因DR3、PDCD5、FasL及p53蛋白水平 | 第42-43页 |
3.5 PI染色荧光显微镜下观察结果 | 第43-44页 |
3.6 Annexin V/PI双染流式细胞术检测CIA大鼠滑膜细胞凋亡率变化 | 第44-45页 |
3.7 电镜观察CIA大鼠滑膜细胞超微结构的改变 | 第45-47页 |
3.7.1 扫描电镜观察CIA大鼠滑膜细胞表面超微结构的改变 | 第45-46页 |
3.7.2 透射电镜观察CIA大鼠滑膜细胞超微结构的改变 | 第46-47页 |
第4章 讨论 | 第47-53页 |
4.1 瑞香素对CIA大鼠滑膜细胞促凋亡基因DR3、PDCD5、FasL及p53甲基化状态及其基因表达的影响 | 第48-50页 |
4.2 瑞香素对CIA大鼠滑膜细胞凋亡的影响 | 第50-51页 |
4.3 瑞香素对CIA大鼠滑膜细胞的促凋亡作用的分子机制 | 第51-53页 |
第5章 结论 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第60-61页 |
综述 | 第61-69页 |
参考文献 | 第65-69页 |