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瑞香素对CIA大鼠滑膜细胞促凋亡基因去甲基化作用及分子机制

摘要第3-7页
ABSTRACT第7-11页
第1章 前言第16-19页
第2章 材料与方法第19-34页
    2.1 实验材料第19-21页
        2.1.1 实验细胞第19页
        2.1.2 试验药物第19页
        2.1.3 主要试剂第19-20页
        2.1.4 主要仪器设备第20-21页
    2.2 实验方法第21-34页
        2.2.1 CIA大鼠滑膜细胞的培养第21-22页
        2.2.2 实验分组第22页
        2.2.3 MIT检测瑞香素和5-aza-Dc对CIA大鼠滑膜细胞增殖的抑制作用第22-24页
        2.2.4 甲基化特异性PCR(MSP)检测CIA大鼠滑膜细胞促凋亡基因DR3、PDCD5、FasL及p53的甲基化状态第24-26页
        2.2.5 实时荧光定量RT-PCR检测CIA大鼠滑膜细胞促凋亡基DR3、PDCD5、p53、FasL及甲基化转移酶DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的mRNA表达情况第26-29页
        2.2.6 流式细胞术检测CIA大鼠滑膜细胞促凋亡基因DR3、PDCD5、FasL和p53的蛋白表达情况第29页
        2.2.7 PI染色荧光显微镜观察各实验组CIA大鼠滑膜细胞的凋亡情况第29-30页
        2.2.8 Annexin V/PI双染流式细胞术检测各实验组CIA大鼠滑膜细胞凋亡率的改变第30页
        2.2.9 扫描电镜观察CIA大鼠滑膜细胞表面结构改变第30-31页
        2.2.10 透射电镜观察CIA大鼠滑膜细胞超微结构病变第31-33页
        2.2.11 统计学处理第33-34页
第3章 结果第34-47页
    3.1 瑞香素与5-aza-Dc对CIA大鼠滑膜细胞增殖的抑制作用第34-36页
        3.1.1 瑞香素对CIA大鼠滑膜细胞增殖的抑制作用第34-35页
        3.1.2 5-aza-Dc对CIA大鼠滑膜细胞增殖的抑制作用第35-36页
    3.2 瑞香素对CIA大鼠滑膜细胞促凋亡基因DR3、PDCD5、FasL及p53的去甲基化作用第36-37页
    3.3 瑞香素对CIA大鼠滑膜细胞促凋亡基因DR3、PDCD5、FasL、p53及甲基化转移酶DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA表达的影响第37-42页
        3.3.1 RNA纯度鉴定第37页
        3.3.2 RNA完整性鉴定第37-38页
        3.3.3 RT-PCR测定β-actin、DR3、PDCD5、FasL、p53及DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA的熔解曲线第38页
        3.3.4 RT-PCR测定β-actin、DR3、PDCD5、FasL、p53及DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA的扩增曲线第38-39页
        3.3.5 瑞香素对CIA大鼠滑膜细胞促凋亡基因DR3、p53、PDCD5、FasL及甲基化转移酶DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA表达的影响第39-42页
    3.4 流式细胞仪检测CIA大鼠滑膜细胞促凋亡基因DR3、PDCD5、FasL及p53蛋白水平第42-43页
    3.5 PI染色荧光显微镜下观察结果第43-44页
    3.6 Annexin V/PI双染流式细胞术检测CIA大鼠滑膜细胞凋亡率变化第44-45页
    3.7 电镜观察CIA大鼠滑膜细胞超微结构的改变第45-47页
        3.7.1 扫描电镜观察CIA大鼠滑膜细胞表面超微结构的改变第45-46页
        3.7.2 透射电镜观察CIA大鼠滑膜细胞超微结构的改变第46-47页
第4章 讨论第47-53页
    4.1 瑞香素对CIA大鼠滑膜细胞促凋亡基因DR3、PDCD5、FasL及p53甲基化状态及其基因表达的影响第48-50页
    4.2 瑞香素对CIA大鼠滑膜细胞凋亡的影响第50-51页
    4.3 瑞香素对CIA大鼠滑膜细胞的促凋亡作用的分子机制第51-53页
第5章 结论第53-54页
致谢第54-55页
参考文献第55-60页
攻读学位期间的研究成果第60-61页
综述第61-69页
    参考文献第65-69页

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