摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 引言 | 第11-21页 |
1.1 鱼类卵母细胞最终成熟研究进展 | 第11-17页 |
1.1.1 调控鱼类卵母细胞最终成熟的激素 | 第11-14页 |
1.1.2 参与鱼类卵母细胞最终成熟的基因 | 第14-17页 |
1.2 环境内分泌干扰物对卵母细胞最终成熟影响机制研究进展 | 第17页 |
1.3 内参基因筛选 | 第17-18页 |
1.4 本研究的意义、内容和技术路线 | 第18-21页 |
1.4.1 研究意义 | 第18-19页 |
1.4.2 研究内容 | 第19-20页 |
1.4.3 技术路线 | 第20-21页 |
第2章 不同化合物对鲤鱼卵母细胞GVBD的影响 | 第21-26页 |
2.1 材料与方法 | 第21-22页 |
2.1.1 实验材料 | 第21页 |
2.1.2 鲤鱼卵母细胞培养液 | 第21页 |
2.1.3 卵母细胞收集 | 第21页 |
2.1.4 卵母细胞体外培养 | 第21页 |
2.1.5 卵母细胞形态观察 | 第21-22页 |
2.1.6 数据分析 | 第22页 |
2.2 结果与分析 | 第22-24页 |
2.2.1 DHP对卵母细胞GVBD的影响 | 第22-23页 |
2.2.2 DES对卵母细胞GVBD的影响 | 第23页 |
2.2.3 DEHP对卵母细胞GVBD的影响 | 第23-24页 |
2.3 讨论 | 第24-26页 |
第3章 不同化合物诱导鲤鱼卵母细胞最终成熟内参基因的筛选 | 第26-43页 |
3.1 材料与方法 | 第26-29页 |
3.1.1 实验材料 | 第26页 |
3.1.2 鲤鱼卵母细胞培养液 | 第26页 |
3.1.3 引物设计 | 第26页 |
3.1.4 总RNA的提取和DNA污染的去除 | 第26-27页 |
3.1.5 逆转录合成c DNA第一链和PCR扩增 | 第27-28页 |
3.1.6 实时荧光定量PCR反应 | 第28页 |
3.1.7 基因引物特异性鉴定 | 第28页 |
3.1.8 引物扩增效率验证和标准曲线的绘制 | 第28页 |
3.1.9 内参基因表达稳定性的分析 | 第28-29页 |
3.1.10 LHR基因表达的分析 | 第29页 |
3.2 结果与分析 | 第29-39页 |
3.2.1 鲤鱼卵细胞总RNA的提取 | 第29-30页 |
3.2.2 鲤鱼卵母细胞内参筛选结果 | 第30-39页 |
3.3 讨论 | 第39-43页 |
第4章 不同化合物对鲤卵母细胞最终成熟相关基因表达的影响 | 第43-61页 |
4.1 材料和方法 | 第43-44页 |
4.1.1 实验材料 | 第43页 |
4.1.2 培养液 | 第43页 |
4.1.3 引物设计 | 第43页 |
4.1.4 总RNA的提取和DNA污染的去除 | 第43页 |
4.1.5 逆转录合成c DNA第一链和PCR扩增 | 第43页 |
4.1.6 基因引物特异性鉴定 | 第43页 |
4.1.7 引物扩增效率验证和标准曲线的绘制 | 第43页 |
4.1.8 鲤卵母细胞最终成熟相关基因的表达分析 | 第43-44页 |
4.2 结果 | 第44-57页 |
4.2.1 细胞色素P450芳香化酶(cytochrome P450 aromatase,cyp19) | 第44-46页 |
4.2.2 促黄体生成素受体(Luteinizing Hormone Receptor,LHR) | 第46-48页 |
4.2.3 20β-羟基类固醇脱氢酶(20β- hydroxysteroid dehydrogenase,20β-HSD) | 第48-50页 |
4.2.4 孕激素膜受体 γ(membrane-bound progestin receptor gamma,m PRγ) | 第50-52页 |
4.2.5 细胞分裂周期 2(cell division cycle 2,cdc2) | 第52-53页 |
4.2.6 细胞周期蛋白B(cyclin B) | 第53-55页 |
4.2.7 胰岛素样生长因子结合蛋白-2(insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP2) | 第55-57页 |
4.3 讨论 | 第57-61页 |
第5章 结论与展望 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-71页 |
在学期间发表的学术论文 | 第71页 |