| 摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略语表(Abbreviations) | 第13-14页 |
| 1 前言 | 第14-25页 |
| 1.1 雷帕霉素靶蛋白(Target of Rapamyxin,TOR)的鉴定 | 第14-15页 |
| 1.2 TOR蛋白的结构和生物学功能 | 第15页 |
| 1.3 酵母和哺乳动物TOR复合体的组成及TOR信号通路蛋白 | 第15-17页 |
| 1.4 植物TOR在生长发育中的作用及调控 | 第17-18页 |
| 1.5 核糖体蛋白S6激酶(S6K)的生物学功能及调控 | 第18-21页 |
| 1.5.1 酵母和动物S6K的作用及调控方式 | 第19页 |
| 1.5.2 植物S6K的作用及调控方式 | 第19-21页 |
| 1.6 Raptor的生物学功能及调控 | 第21-22页 |
| 1.6.1 动物Raptor作用及调控 | 第21页 |
| 1.6.2 植物Raptor的作用及调控 | 第21-22页 |
| 1.7 动物TOR/S6K信号在脂质代谢中的作用及其研究进展 | 第22页 |
| 1.8 叶绿体类囊体膜组分、功能及膜脂合成调控 | 第22-23页 |
| 1.9 本研究的科学意义和目的 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-28页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第25页 |
| 2.1.2 植物材料及生长条件 | 第25页 |
| 2.1.3 主要试剂的配置 | 第25-26页 |
| 2.1.4 实验试剂 | 第26-27页 |
| 2.1.5 实验仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.6 引物序列 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-35页 |
| 2.2.1 植物材料的种植和处理 | 第28页 |
| 2.2.2 生物信息学分析 | 第28页 |
| 2.2.3 植物DNA提取及PCR | 第28-29页 |
| 2.2.4 Trizol提取RNA及反转录PCR合成cDNA | 第29页 |
| 2.2.5 Semi-quantitive PCR及real-time PCR | 第29-30页 |
| 2.2.6 亚细胞定位分析 | 第30页 |
| 2.2.7 突变体的分离及回补 | 第30-31页 |
| 2.2.8 S6K1超表达载体构建及鉴定 | 第31页 |
| 2.2.9 S6K1原核表达 | 第31-32页 |
| 2.2.10 可溶性糖和淀粉含量测定 | 第32页 |
| 2.2.11 叶绿素含量测定和光合速率测定 | 第32-33页 |
| 2.2.12 游离氨基酸含量测定 | 第33页 |
| 2.2.13 薄层层析(TLC)分离脂质和定量分析 | 第33页 |
| 2.2.14 蛋白表达、纯化、S6K1和TOR激酶活性分析 | 第33-34页 |
| 2.2.15 免疫共沉淀 | 第34-35页 |
| 3 结果和分析 | 第35-66页 |
| 3.1 核糖体蛋白S6激酶受TOR/Raptor2介导调控类囊体膜合成 | 第35-58页 |
| 3.1.1 S6K和Raptor同源序列比对和进化树分析 | 第35-37页 |
| 3.1.2 S6K基因的克隆和超表达植株鉴定 | 第37-39页 |
| 3.1.3 S6K1缺失突变导致叶片黄化、光合效率较低 | 第39-41页 |
| 3.1.4 S6K酶活性分析 | 第41-43页 |
| 3.1.4.1 S6K1催化核糖体蛋白S6保守序列多肽的磷酸化活性 | 第41-42页 |
| 3.1.4.2 S6K1体内激酶活性 | 第42-43页 |
| 3.1.5 S6K表达模式和亚细胞定位 | 第43-45页 |
| 3.1.5.1 S6K表达模式 | 第43-44页 |
| 3.1.5.2 S6K亚细胞定位 | 第44-45页 |
| 3.1.6 S6K1对体内蛋白合成的影响 | 第45-46页 |
| 3.1.7 S6K1缺失导致类囊体基粒片层结构缺陷 | 第46-47页 |
| 3.1.8 S6K1对膜脂代谢的影响 | 第47-50页 |
| 3.1.9 S6K1和Raptor2互作共同调控类囊体膜的生物合成 | 第50-53页 |
| 3.1.10 Raptor2/S6K1参与糖脂生物合成受TOR信号的调控 | 第53-55页 |
| 3.1.11 抑制S6K1、Raptor2和TOR出现相似的糖脂代谢基因的下调 | 第55-56页 |
| 3.1.12 S6K1影响脂代谢相关基因的酶活并反馈调节PA信号 | 第56-58页 |
| 3.2 S6K1在生长发育中的作用 | 第58-66页 |
| 3.2.1 S6K1缺失导致植株全生育期生长发育受到抑制 | 第58-60页 |
| 3.2.2 S6K1影响水稻气孔的分布和花粉的发育 | 第60-63页 |
| 3.2.3 S6K1影响水稻根的发育 | 第63-64页 |
| 3.2.4 S6K1和E2F3在体外互作并影响E2F3的表达 | 第64-66页 |
| 4 讨论 | 第66-72页 |
| 4.1 水稻S6K1在功能上具有独特性且受到TOR/Raptor2信号所调控 | 第66-68页 |
| 4.2 TOR/Raptor2/S6K1在调控类囊体膜的生物合成和基粒片层构建具有重要作用 | 第68-70页 |
| 4.3 脂质代谢和脂质信号中的Raptor2/S6K1反馈调节 | 第70页 |
| 4.4 S6K1影响植物的糖分积累和糖信号感应,对植物生长具有双重影响 | 第70-71页 |
| 4.5 S6K1与E2F3互作调控生长发育 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-79页 |
| 附录一 | 第79-84页 |
| 附录二 | 第84-89页 |
| 附录三 S6K和Raptor多序列比对 | 第89-91页 |
| 作者简介 | 第91页 |
| 在读期间发表的论文 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
