| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-29页 |
| 1.1 γ-氨基丁酸的理化性质 | 第15-16页 |
| 1.2 γ-氨基丁酸的分布 | 第16-17页 |
| 1.3 γ-氨基丁酸的代谢 | 第17页 |
| 1.4 γ-氨基丁酸的生理作用 | 第17-20页 |
| 1.4.1 延缓大脑衰老 | 第17-18页 |
| 1.4.2 降低血压 | 第18页 |
| 1.4.3 治疗癫痫 | 第18-19页 |
| 1.4.4 抗焦虑 | 第19页 |
| 1.4.5 活化肝肾 | 第19页 |
| 1.4.6 对呼吸系统的作用 | 第19页 |
| 1.4.7 生殖生理作用 | 第19-20页 |
| 1.4.8 其他作用 | 第20页 |
| 1.5 γ-氨基丁酸的开发应用 | 第20-21页 |
| 1.5.1 GABA茶 | 第20页 |
| 1.5.2 发芽糙米 | 第20页 |
| 1.5.3 其他应用 | 第20-21页 |
| 1.6 γ-氨基丁酸的制备 | 第21-25页 |
| 1.6.1 化学法制备GABA | 第21-22页 |
| 1.6.2 天然产物组织提取制备GABA | 第22-23页 |
| 1.6.3 生物法制备GABA | 第23-25页 |
| 1.7 GABA的分离纯化 | 第25-26页 |
| 1.8 谷氨酸脱羧酶 | 第26页 |
| 1.9 GABA测定方法 | 第26-28页 |
| 1.9.1 双酶法 | 第26-27页 |
| 1.9.2 薄层层析法快速鉴定 | 第27页 |
| 1.9.3 比色法法快速鉴定 | 第27-28页 |
| 1.9.4 高效液相色谱法鉴定 | 第28页 |
| 1.10 本研究的目的及意义 | 第28-29页 |
| 第二章 材料与方法 | 第29-44页 |
| 2.1 材料 | 第29-33页 |
| 2.1.1 试剂 | 第29页 |
| 2.1.2 仪器 | 第29页 |
| 2.1.3 实验所用质粒和菌株 | 第29页 |
| 2.1.4 培养基配置 | 第29-30页 |
| 2.1.5 实验使用的主要溶液和配方 | 第30-33页 |
| 2.1.5.1 常用溶液配制 | 第30-31页 |
| 2.1.5.2 快速提取质粒DNA试剂配制 | 第31页 |
| 2.1.5.3 琼脂糖凝胶电泳缓冲液配置 | 第31-32页 |
| 2.1.5.4 SDS-PAGE电泳缓冲液配制 | 第32页 |
| 2.1.5.5 Western Blot相关试剂 | 第32-33页 |
| 2.1.5.6 引物 | 第33页 |
| 2.2.方法 | 第33-44页 |
| 2.2.1 TB法制备大肠杆菌感受态细胞 | 第33-34页 |
| 2.2.1.1 菌种划线 | 第33页 |
| 2.2.1.2 接种 | 第33页 |
| 2.2.1.3 感受态细胞制作 | 第33-34页 |
| 2.2.2 感受态细胞制作 | 第34页 |
| 2.2.2.1 大肠杆菌的常规转化 | 第34页 |
| 2.2.2.2 大肠杆菌的快速转化 | 第34页 |
| 2.2.3 GAD重组子的构建 | 第34-36页 |
| 2.2.4 琼脂糖凝胶DNA回收 | 第36页 |
| 2.2.5 小量质粒DNA提取 | 第36-37页 |
| 2.2.6 试剂盒提取质粒DNA | 第37页 |
| 2.2.7 琼脂糖凝胶电泳 | 第37-38页 |
| 2.2.8 重组蛋白的表达 | 第38-41页 |
| 2.2.8.1 重组质粒的筛选 | 第38页 |
| 2.2.8.2 重组蛋白的表达 | 第38页 |
| 2.2.8.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测重组蛋白的表达 | 第38-40页 |
| 2.2.8.4 Western-Blot检测重组蛋白的表达 | 第40-41页 |
| 2.2.9 GAD活性测定 | 第41-42页 |
| 2.2.9.1 GAD活性定义 | 第41页 |
| 2.2.9.2 GAD活性标准曲线的建立 | 第41-42页 |
| 2.2.9.3 GAD活性测定 | 第42页 |
| 2.2.10 GABA柱前衍生化 | 第42-44页 |
| 第三章 结果与分析 | 第44-57页 |
| 3.1 GAD重组质粒的构建 | 第44-45页 |
| 3.2 GAD活性快速测定方法的优化 | 第45页 |
| 3.3 GAD摇瓶表达验证 | 第45-46页 |
| 3.4 重组GAD全细胞转化活性的探究 | 第46-48页 |
| 3.5 重组GAD全细胞转化活性的探究 | 第48-50页 |
| 3.6 重组GAD菌株高密度发酵 | 第50-51页 |
| 3.7 全细胞生物转化制备GABA | 第51-54页 |
| 3.8 全细胞生物转化制备GABA | 第54-55页 |
| 3.9 GABA结晶重化 | 第55页 |
| 3.10 HPLC柱前衍生化测定GABA含量 | 第55-57页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第57-59页 |
| 4.1 讨论 | 第57页 |
| 4.2 展望 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 致谢 | 第63页 |