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Cx37和Cx43在小鼠卵泡中的表达研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-14页
第一章 间隙连接与卵巢卵泡发育第14-27页
   ·哺乳动物卵泡发育第14-17页
     ·原始卵泡(Primordial follicles, PROFs)的形成第14-15页
     ·初级卵泡(Primary follicles, PRIFs)的发育第15-16页
     ·次级卵泡(Second follicles)的形成及生长第16-17页
     ·卵泡及卵母细胞成熟第17页
   ·间隙连接第17-26页
     ·Cx 种类、结构及功能第18-21页
     ·间隙连接蛋白在卵巢中的分布和功能第21-22页
     ·间隙连接与卵泡发育第22-26页
   ·结语第26-27页
第二章 卵泡体外发育及冷冻保存第27-35页
   ·卵泡体外发育第27-32页
     ·腔前卵泡体外分离研究第27-28页
     ·腔前卵泡体外培养研究第28-31页
     ·卵母细胞体外成熟第31-32页
   ·卵泡冷冻保存的研究进展第32-34页
     ·卵泡冷冻及运用方法第32-33页
     ·冷冻技术第33-34页
     ·卵泡冷冻后分析第34页
   ·结语第34-35页
第三章 CX37 在小鼠卵巢各级卵泡内表达第35-47页
   ·材料与方法第35-39页
     ·主要试剂第35页
     ·试验动物第35页
     ·免疫组织化学染色第35-36页
     ·细胞Cx37 cDNA 扩增检测第36-37页
     ·原位杂交第37-38页
     ·颗粒细胞分泌Cx37 检测第38-39页
     ·显微摄影、图像分析及数据处理第39页
   ·结果第39-45页
     ·抗体特异性检测第39-40页
     ·Cx37 蛋白在卵巢中的表达第40-42页
     ·Cx37 mRNA 在卵母细胞和颗粒细胞中的表达第42-44页
     ·Cx37 在颗粒细胞中的表达第44-45页
   ·讨论第45-46页
     ·Cx37 在小鼠卵巢卵泡颗粒细胞中的表达与意义第45-46页
     ·Cx37 在不同发育期小鼠卵巢各级卵泡中的表达与意义第46页
   ·小结第46-47页
第四章 CX43 在小鼠卵巢各级卵泡内表达第47-53页
   ·材料与方法第47-49页
     ·主要试剂第47页
     ·试验动物第47页
     ·免疫化学第47-48页
     ·cDNA 扩增第48-49页
     ·显微摄影、图像分析及数据处理第49页
   ·结果第49-51页
     ·Cx43 在小鼠卵巢中的表达第49-51页
     ·Cx43 mRNA 在卵泡卵母细胞和颗粒细胞中的表达第51页
   ·讨论第51-52页
   ·小结第52-53页
第五章 小鼠动情周期和妊娠期卵泡中CX37 和CX43 的变化第53-64页
   ·材料与方法第53-56页
     ·主要试剂第53页
     ·试验动物及菌种第53页
     ·实验动物获取第53-54页
     ·免疫组织化学第54页
     ·卵巢内卵泡Cx37 和Cx43 mRNA 检测第54-56页
     ·显微摄影、图像分析及数据处理第56页
   ·结果第56-61页
     ·Cx37 和Cx43 动情周期变化第56-59页
     ·Cx37 和Cx43 妊娠期变化第59-61页
   ·讨论第61-63页
   ·小结第63-64页
第六章 小鼠卵泡体外发育过程中CX37 和CX43 表达检测第64-74页
   ·材料与方法第64-66页
     ·主要试剂第64页
     ·菌种第64页
     ·试验动物第64-65页
     ·腔前卵泡的分离培养与诱导排卵第65页
     ·体外培养卵泡质量感官评价第65页
     ·卵泡直径的测量第65页
     ·卵泡收集及处理第65页
     ·Real-time PCR 检测体内外发育卵泡Cx37 和Cx43 的mRNA 表达第65-66页
     ·数据分析第66页
   ·结果第66-71页
     ·小鼠腔前卵泡体外生长特征第66-68页
     ·体外卵泡正常发育过程中Cx37 和Cx43 基因表达的动态变化第68-70页
     ·体外卵泡异常发育过程中Cx37 和Cx43 基因表达的动态变化第70-71页
   ·讨论第71-73页
     ·腔前卵泡体外分离培养第71页
     ·体外卵泡发育过程中Cx37 和Cx43 基因表达变化第71-72页
     ·Cx37 和Cx43 基因在体外发育卵泡中的异常表达第72-73页
   ·小结第73-74页
第七章 CX37 和CX43 在冷冻小鼠腔前卵泡体外短期培养中的表达第74-81页
   ·材料与方法第74-76页
     ·实验试剂第74页
     ·实验动物第74-75页
     ·卵泡分离第75页
     ·卵泡冷冻第75页
     ·卵泡复苏及短期培养第75页
     ·Real-time PCR 检测卵泡Cx37 和Cx43 mRNA第75-76页
     ·卵泡Cx37 和Cx43 蛋白检测第76页
     ·统计学方法第76页
   ·结果第76-78页
     ·冷冻复苏后卵泡体外发育第76-77页
     ·Cx37 和Cx43 mRNA 表达第77-78页
     ·Cx37 和Cx43 蛋白表达第78页
   ·讨论第78-80页
     ·冷冻卵泡体外发育第78-79页
     ·冷冻卵泡体外发育过程中Cx37 和Cx43 的表达第79-80页
   ·小结第80-81页
结论第81-82页
主要创新点第82-83页
进一步研究方向第83-84页
参考文献第84-98页
附录第98-103页
 附录1 主要溶液配制第98-100页
 附录2 主要仪器第100-101页
 附录3 Cx37 PCR 产物测序图第101-102页
 附录4 Cx43 PCR 产物测序图第102-103页
缩略语第103-105页
致谢第105-106页
作者简介第106页

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