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维生素D受体在SD大鼠原代脂肪细胞分化过程中的表达规律及脂质沉积研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 绪论第12-24页
    1.1 维生素受体第12-17页
        1.1.1 维生素D受体概述第12-13页
        1.1.2 维生素D受体的功能结构域第13-16页
        1.1.3 维生素D受体反应元件第16-17页
    1.2 PPAR概述第17-21页
        1.2.1 PPARγ 与脂肪细胞的关系第19-20页
        1.2.2 PPARγ 与疾病信号传导第20-21页
    1.3 维生素D受体与脂肪细胞相关研究进展第21-24页
第二章 维生素D受体在脂肪组织中的表达定位研究第24-32页
    2.0 引言第24-25页
    2.1 试验材料第25-26页
        2.1.1 试验动物第25页
        2.1.2 抗体及所需试剂第25页
        2.1.3 仪器设备第25-26页
    2.2 实验方法第26-27页
        2.2.1 脂肪组织石蜡切片制作方法第26页
        2.2.2 脂肪组织HE染色方法第26页
        2.2.3 脂肪组织免疫荧光染色方法第26-27页
        2.2.4 肪组织 RNA 提取与反转录方法第27页
    2.3 实验结果第27-29页
        2.3.1 大鼠皮下脂肪组织HE染色结果第27-28页
        2.3.2 大鼠皮下脂肪组织免疫荧光染色结果第28页
        2.3.3 大鼠不同部位脂肪组织PCR半定量分析结果第28-29页
    2.4 小结第29-32页
第三章 SD大鼠原代脂肪细胞分离培养及诱导分化第32-36页
    3.1 试验材料第32页
        3.1.1 试验动物第32页
        3.1.2 培养基及所需试剂第32页
        3.1.3 仪器设备第32页
    3.2 实验方法第32-33页
        3.2.1 脂肪细胞的分离第32-33页
        3.2.2 脂肪细胞的培养第33页
    3.3 实验结果第33-35页
        3.3.1 脂肪细胞培养结果第33-35页
    3.4 讨论第35-36页
第四章 维生素D受体与PPARg基因表达研究第36-46页
    4.0 引言第36页
    4.1 试验材料第36-37页
        4.1.1 试验动物第36-37页
        4.1.2 培养基及所需试剂第37页
        4.1.3 仪器设备第37页
    4.2 实验方法第37-39页
        4.2.1 Bodipy染色第37页
        4.2.2 细胞免疫荧光染色第37-38页
        4.2.3 qPCR检测基因表达量第38页
        4.2.4 Western Blot检测蛋白质表达量第38-39页
    4.3 结果第39-43页
        4.3.1 细胞分化各阶段脂滴荧光染色结果第39-40页
        4.3.2 细胞分化各阶段VDR免疫荧光染色结果第40-42页
        4.3.3 细胞分化各阶段VDR蛋白表达结果第42页
        4.3.4 细胞分化各阶段VDR基因表达结果第42-43页
    4.4 讨论第43-46页
第五章 维生素D受体超表达载体构建及功能分析第46-56页
    5.1 引言第46-47页
    5.2 试验材料第47-48页
        5.2.1 细菌及细胞第47页
        5.2.2 酶和所需试剂第47页
        5.2.3 仪器设备第47-48页
    5.3 试验方法第48-51页
        5.3.1 引物设计与合成第48页
        5.3.2 目的基因的PCR扩增第48页
        5.3.3 目的片段和载体的双酶切、回收、和纯化第48-49页
        5.3.4 目的基因与载体的连接与转化DH5α第49页
        5.3.5 菌液PCR检测阳性菌落第49页
        5.3.6 293T细胞及Hela细胞培养第49-50页
        5.3.7 重组质粒转染 293T细胞和Hela细胞第50页
        5.3.8 Western Blot及qPCR分析第50-51页
    5.4 结果第51-54页
        5.4.1 目的基因PCR扩增,双酶切及阳性克隆鉴定结果第51-52页
        5.4.2 293T细胞及Hela细胞形态观察及质粒转染结果第52页
        5.4.3 Western Blot结果第52-53页
        5.4.4 qPCR结果第53-54页
    5.5 讨论第54-56页
结论第56-58页
    小结第56页
    创新点第56页
    研究展望第56-58页
参考文献第58-62页
中英文缩略词表第62-64页
附图第64-66页
攻读硕士学位期间学术成果第66-68页
致谢第68页

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