| 摘要 | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-33页 |
| 1 植物油脂脂肪酸组成 | 第11-13页 |
| 2 棕榈油酸 | 第13-17页 |
| 3 植物种子油脂和棕榈油酸合成积累的生物化学过程 | 第17-22页 |
| 3.1 植物种子油脂合成积累的生物化学过程 | 第17-20页 |
| 3.2 棕榈油酸合成积累的生物化学过程 | 第20-22页 |
| 4 参与植物种子油脂以及棕榈油酸合成积累的关键酶 | 第22-27页 |
| 4.1 参与植物油脂合成积累的关键酶 | 第22-25页 |
| 4.1.1 乙酰辅酶 A 羧化酶(acetyl-CoA carboxylase, ACCase) | 第22-23页 |
| 4.1.2 酰基载体蛋白 (acyl carrier protein, AGP) | 第23页 |
| 4.1.3 酮酯酰-ACP 合酶（β-ketoacy I-ACP synthase, KAS) | 第23-24页 |
| 4.1.4 甘油-3-磷酸酰基转移酶(Glycerol-3-Phosphate Acyltransferase, GPAT) | 第24-25页 |
| 4.1.5 溶血磷脂酸酰基转移酶（lysophosphatidic acid acyltransferase 或1-Acyl glycerol-Phosphate Acyl transferase, LPAT) | 第25页 |
| 4.2 棕榈油酸合成积累的关键酶 | 第25-27页 |
| 4.2.1 酰基-Δ9 脱氨酶（acyl-Δ9 desatuase,Δ9D) | 第25-26页 |
| 4.2.2 酰基-ACP硫酯酶（(Acyl-Acyl Carrie Protein thioesterases. FAT) | 第26页 |
| 4.2.3 二酰甘油酰基转移酶(diacylglycerol acyltransferase, DGAT) | 第26-27页 |
| 5 植物种子油脂与棕桐油酸合成积累的遗传修饰 | 第27-30页 |
| 5.1 植物种子油脂合成积累的遗传修饰 | 第27-29页 |
| 5.2 棕榈油酸生物合成的遗传修饰 | 第29-30页 |
| 6 本论文的研究目的和意义 | 第30-31页 |
| 7 本论文的主要研究内容 | 第31-33页 |
| 第二章 棕榈油酸合成关键酶酰基-Δ9脱氢酶基因的克隆和底物特异性鉴定 | 第33-54页 |
| 要点 | 第33页 |
| 1 材料与方法 | 第33-38页 |
| 1.1 生物材料及其制备 | 第33-34页 |
| 1.2 生物样品DNA和RNA的提取 | 第34页 |
| 1.3 酿酒酵母细胞型CoA-Δ9脱氢酶的ORF的扩增 | 第34页 |
| 1.4 平菇细胞型CoA-Δ9脱氢酶的cDNA克隆 | 第34-35页 |
| 1.5 猫爪草质体型ACP-Δ9脱氢酶的cDNA克隆 | 第35页 |
| 1.6 Southern blot检测所克隆的酰基-Δ9脱氢酶基因的拷贝数 | 第35-36页 |
| 1.7 应用营养缺陷型酵母表达体系鉴定酵母和平菇酰基-Δ9脱氢酶基因cDNA克隆的酶活性和功能 | 第36-37页 |
| 1.8 点突变鉴定酵母和平菇酰基-Δ9脱氢酶基因cDNA克隆的酶活性和功能 | 第37-38页 |
| 1.9 脂类成分分析 | 第38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-51页 |
| 2.1 酿酒酵母细胞型CoA-Δ9脱氢酶基因的cDNA克隆 | 第38-39页 |
| 2.2 平菇细胞型CoA-Δ9脱氢酶基因的cDNA克隆及序列分析 | 第39-41页 |
| 2.3 平菇细胞型CoA-Δ9脱氢酶基因的拷贝数及同源序列分析 | 第41-44页 |
| 2.4 酵母和平菇细胞型CoA-Δ9脱氢酶cDNA克隆的功能分析 | 第44页 |
| 2.5 酵母和平菇细胞型CoA-Δ9脱氢酶活性区关键位点的分析 | 第44-46页 |
| 2.6 酵母和平菇细胞型CoA-Δ9脱氢酶功能的活体快速鉴定 | 第46-47页 |
| 2.7 猫爪草质体型酰基-ACP-△9脱氢酶(ACP-Δ9D)cDNA克隆及功能鉴定 | 第47-49页 |
| 2.8 三个酰基-Δ9脱氢酶基因的进化树分析 | 第49-51页 |
| 3 讨论 | 第51-52页 |
| 4 结论 | 第52-54页 |
| 第三章 种子特异超表达CoA-Δ9脱氢酶提高大豆种子棕榈油酸合成积累 | 第54-70页 |
| 要点 | 第54-55页 |
| 1 材料与方法 | 第55-61页 |
| 1.1 材料 | 第55页 |
| 1.2 方法 | 第55-61页 |
| 1.2.1 植物表达载体的构建 | 第55-57页 |
| 1.2.2 大豆的转化 | 第57-58页 |
| 1.2.3 大豆转化植株的分子检测 | 第58-59页 |
| 1.2.4 总脂肪酸的提取和气相色谱法（GC)分析脂肋酸的成份W及含量 | 第59-60页 |
| 1.2.5 亚细胞定位表达和Western蛋白质印迹杂交 | 第60-61页 |
| 2 结果与分析 | 第61-68页 |
| 2.1. ScΔ9D大豆转化体的鉴定 | 第61页 |
| 2.2. 转基因大豆发育种子中酵母酰基CoA-△9脱氢酶(ScA9D)蛋白的亚细胞定位 | 第61-62页 |
| 2.3. 转ScΔ9D基因大豆种子油脂中的脂肪酸成份分析 | 第62-67页 |
| 2.4. 亚细胞定位表达Sc△9D酶催化效率的鉴定 | 第67-68页 |
| 3 讨论 | 第68-69页 |
| 4 结论 | 第69-70页 |
| 第四章 组成型亚细胞定位表达脂酰-△9脱氢酶及其对烟草脂肪酸合成的影响 | 第70-88页 |
| 要点 | 第70页 |
| 1 材料与方法 | 第70-75页 |
| 1.1 材料 | 第70-71页 |
| 1.1.1 植物材料及菌株 | 第70-71页 |
| 1.1.2 载体 | 第71页 |
| 1.1.3 PCR反应引物 | 第71页 |
| 1.2 方法 | 第71-75页 |
| 1.2.1 植物表达载体的构建 | 第71-72页 |
| 1.2.2 烟草的遗传转化 | 第72-74页 |
| 1.2.3 转基因烟草植株的分子鉴定 | 第74页 |
| 1.2.4 ScΔ9D亚细胞定位表达的检测 | 第74-75页 |
| 1.2.5 总脂肪酸提取和气相色谱(GC)检测脂肪酸成分及含量 | 第75页 |
| 2 结果与分析 | 第75-84页 |
| 2.1 转基因烟草植株的测定 | 第75页 |
| 2.2 ScΔ9D蛋白的亚细胞定位 | 第75-77页 |
| 2.3 ScΔ9D转基因烟叶组织中脂肪酸组成的变化 | 第77-79页 |
| 2.4 ScΔ9D转基因烟草茎组织中脂肪酸成分的变化 | 第79-82页 |
| 2.5 ScΔ9D转基因烟草种子脂肪酸成分变化 | 第82-83页 |
| 2.6 ScΔ9D超表达的去饱和效应及其对饱和脂肪酸含量的影响 | 第83-84页 |
| 3 讨论 | 第84-86页 |
| 4 结论 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-96页 |
| Abstract | 第96-99页 |
| 作者攻读博士学位期间发表的论文和奖励 | 第100-102页 |
| 致谢 | 第102页 |
